[發明專利]檢測血清外泌體CTD-2376I4-1的引物、試劑盒及其在胃癌肝轉移診療中的應用在審
| 申請號： | 202010566970.3 | 申請日： | 2020-06-19 |
| 公開（公告）號： | CN111690745A | 公開（公告）日： | 2020-09-22 |
| 發明（設計）人： | 范鈺;何蓮;郎亞昆;谷旭宇;周永靜;龔丹丹 | 申請（專利權）人： | 鎮江市第一人民醫院 |
| 主分類號： | C12Q1/6886 | 分類號： | C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京縱橫知識產權代理有限公司 32224 | 代理人： | 王玉 |
| 地址： | 212002*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 檢測 血清 外泌體 ctd 2376 i4 引物 試劑盒 及其 胃癌 轉移 診療 中的 應用 | ||
1.檢測血清外泌體CTD-2376I4-1的引物，其特征是，所述引物的核苷酸序列如SEQ IDNO：1和SEQ ID NO：2所示。
2.檢測血清外泌體CTD-2376I4-1的試劑盒，其特征是，包括權利要求1所述的引物。
3.根據權利要求2所述的檢測血清外泌體CTD-2376I4-1的試劑盒，其特征是，還包括血清外泌體的RNA提取試劑、去基因組DNA反應體系、逆轉錄反應體系、qPCR反應體系。
4.權利要求2或3所述的試劑盒作為胃癌肝轉移診療試劑的應用。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征是，使用權利要求2或3所述的試劑盒檢測血清外泌體中的CTD-2376I4-1。
6.根據權利要求5所述的應用，其特征是，檢測血清外泌體中的CTD-2376I4-1的方法，包括：
提取待檢血清中外泌體，從外泌體樣本中提取RNA；
從提取的RNA中去除基因組DNA；
對于獲得的RNA進行逆轉錄至cDNA；
對于獲得的cDNA通過qPCR法進行檢測。
7.根據權利要求6所述的應用，其特征是，待檢血清外泌體樣本來自于胃癌患者及正常人。
8.根據權利要求6所述的應用，其特征是，提取待檢血清中外泌體的方法為：
全血以3000×g離心15min，移去細胞或細胞碎片；
取上層液體放入離心管，并以250 μl血清加入63 μl ExoQuick試劑，放入4℃ 30min靜置；
在4℃下以1500×g離心混合液30min；
吸出所有上清，在4℃下以1500 ×g 離心5min，并吸出全部上清；
放入200 μl 1 x PBS全部溶解沉淀，-20℃保存。
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