[發明專利]一種多巴絲肼復方制劑中芐絲肼雜質A的分析方法

在審

• 申請號: 202010562591.7
• 申請日: 2020-06-19
• 公開（公告）號: CN111812227A
• 公開（公告）日: 2020-10-23
• 發明（設計）人: 張麗君;盧金萍;趙周明;郭曉迪;沈霞;章正贊;婁貴川
• 申請（專利權）人: 浙江華海藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明提供了一種檢測多巴絲肼復方制劑中芐絲肼雜質A含量的方法，該方法采用親水基色譜柱，以含有庚烷磺酸鈉和磷酸二氫鉀，pH為1.7到9.0的水溶液作為流動相A，甲醇作為流動相B，采用階段性梯度洗脫方法對多巴絲肼復方制劑中芐絲肼雜質A的含量進行分離測定。該方法分離效果好，操作簡單，回收率高，方法靈敏度高，線性范圍寬，在制劑制備過程的質量控制方面具有重要的現實意義。

技術領域

本發明屬于藥物分析檢測領域，具體涉及一種HPLC檢測多巴絲肼復方制劑中芐絲肼雜質A(2RS)-2-氨基-3-羥丙酰肼的分析方法。

背景技術

原研公司Roche Holding AG制備的多巴絲肼復方片劑，商品名為Madopar(美多巴)，由左旋多巴及鹽酸芐絲肼組成，是治療帕金森或帕金森綜合癥(腦炎后、動脈硬化性或中毒性)的藥物。此藥能增加多巴胺在腦部細胞的含量，改善帕金森癥狀。同時芐絲肼可以阻止多巴脫羧酶在左旋多巴未進入大腦內之前被轉化成多巴胺，藉此增加腦內多巴胺，增強其療效并減少其外周不良反應。多巴絲肼復方制劑作為治療帕金森病或帕金森綜合癥的一線藥物，臨床實踐顯示可獲得良好的療效，與大劑量的左旋多巴效果一樣，且耐受性則要好得多。長期服用，帕金森綜合癥的癥狀均有顯著好轉。多巴絲肼結構式如下所示：

但是，在對多巴絲肼復方制劑穩定性及雜質分析研究時發現，鹽酸芐絲肼對光和濕都不穩定，會產生3個主要降解雜質，即芐絲肼雜質A：(2RS)-2-氨基-3-羥丙酰肼、芐絲肼雜質B：(2RS)-2-氨基-3-羥基-N,N-二(2,3,4-三羥基芐基)丙烷酰肼、芐絲肼雜質C：(2RS)-2-氨基-3-羥基-N'-[(EZ)-(2,3,4-三羥基苯基)亞甲基]丙酰肼，并有增長趨勢。

然而，現有的HPLC檢測多巴絲肼復方制劑中芐絲肼雜質A的方法，使用普通的C18等液相色譜柱，這些方法低濃度靈敏度小，響應小，輔料干擾大，導致準確度低，回收率不符合要求，且在后續樣品檢測過程中發現芐絲肼雜質A含量檢測偏低，從而造成質量問題。因此，為了更好地控制多巴絲肼復方制劑的產品質量，嚴格控制芐絲肼雜質A的含量，需要開發一個合適的方法提高檢測能力。

發明內容

本發明提供了一種檢測多巴絲肼復方制劑中芐絲肼雜質A含量的方法，該方法專屬性高，耐用性好、干擾雜質少，為多巴絲肼復方制劑中芐絲肼雜質A質量控制及臨床的用藥安全提供參考。

該方法包括以下步驟：

(1)色譜條件如下：

色譜柱：選自三官能團C18烷基鍵合硅膠或B型超高純全多孔球形硅膠填充的親水基色譜柱；

柱溫：30℃；

流動相A：庚烷磺酸鈉和磷酸二氫鉀至水中溶解，并用氫氧化鈉或磷酸調pH至2.0到7.0；

流動相B：甲醇；

檢測波長：210nm；

流速：1.0mL/min；

洗脫方式：梯度洗脫；

(2)供試品溶液制備：將多巴絲肼復方制劑溶解于稀釋液中以制備供試品溶液；

(3)測定方法：將步驟(2)中制備得到的供試品溶液注入液相色譜儀，并按照所述步驟(1)中的色譜條件對供試品溶液進行高效液相色譜分析，記錄色譜圖。

進一步的所述步驟(1)中流動相A中的庚烷磺酸鈉、磷酸二氫鉀和水的比例為1～3g:5～7g:1L，優選2.2g:6.8g:1L。

進一步的所述步驟(1)中洗脫方式是先用流動相A洗脫10～20min，然后用流動相A和流動相B梯度洗脫15～30min。