[發明專利]一種食品中異麥芽酮糖的分離和檢測方法

在審

• 申請號: 202010560144.8
• 申請日: 2020-06-18
• 公開（公告）號: CN111796034A
• 公開（公告）日: 2020-10-20
• 發明（設計）人: 蘇慧慧;徐日益;郭藝山;高俊永;張平軍;黃俊生;莫柳珍;高亞飛
• 申請（專利權）人: 廣東省生物工程研究所（廣州甘蔗糖業研究所）
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/34;G01N30/60;G01N30/74
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 胡輝

本發明公開了一種食品中異麥芽酮糖的分離和檢測方法，分離方法包括將樣品分散在水中，去除蛋白后微孔過濾，濾液使用酰胺鍵合色譜柱分離，分離使用的流動相為乙腈/去離子水。本發明一些分離方法的實例，采用對糖分離能力相對更弱但是具有更好穩定性的酰胺鍵合色譜柱，配合特定的洗脫程序，能將樣品中，如食品中蔗糖與異麥芽酮糖完全分離；異麥芽酮糖的檢出線低至50μg/mL。本發明一些檢測方法的實例，在50?1000ug/mL內工作曲線線性良好，相關系數r²＝0.9993，回收率在89.3％～98.3％之間。精密度(n＝6)為2.18％～2.58％。同時其前處理簡單，易于操作，檢測限低，在線性范圍內線性良好，相關系數高，測量結果精確度高，是檢測食品中異麥芽酮糖的有效方法。

技術領域

本發明涉及食品檢測領域，特別涉及一種食品中異麥芽酮糖的分離和檢測方法。

背景技術

異麥芽酮糖(α-D-吡喃葡萄糖基-1,6-D-果糖，Isomaltulose)，又稱帕拉金糖，是一種葡 萄糖和果糖以α-1,6糖苷鍵結合形成的還原性二糖，天然存在于蜂蜜、甘蔗汁，及其工業制成 品糖蜜、糖漿中。它是蔗糖的一種同分異構體，具有與蔗糖相似的甜味特性，可作為一種健 康食品添加劑，替代蔗糖應用于食品工業中。異麥芽酮糖是蔗糖的同分異構體，難以分離， 蔗糖是檢測食品中異麥芽酮糖的重要干擾物質。

目前糖檢測時較常用的檢測色譜柱是氨基柱，如：CN104849395A公開了一種食品中異 麥芽酮糖的檢測方法，所述的檢測方法的色譜條件為采用色譜柱Hypersil APS-2(NH₂)柱，規 格為250mm×4.6mm×5μm；流動相為乙腈與去離子水的體積比為88∶12～85∶15，流速為 1mL/min；柱溫為40；進樣體積為10μL；檢測器選用蒸檢測發光散射檢測器，氮氣流速為 1.6L/min，霧化器溫度為50℃，蒸發管溫度為80℃。

又如甘賓賓,蔣世瓊.高效液相色譜法測定帕拉金糖[J].化工技術與開發,2001,030(003):40-41.公開采用高效液相色譜法(HPLC),以Kromasil KR100-5NH2柱為分析柱,乙腈- 水(4:1)為流動相,示差折光儀為檢測器,一次進樣能同時測定樣品中果糖、葡萄糖、蔗糖、帕拉 金糖等.方法變異系數為0.41％～0.85％,回收率為98.67％～101.7％,線性相關系數為0.99992～ 1.0000.最低檢出限在微克級。

雖然氨基柱在糖類分析中有較高的靈敏度和分離的，但氨基溶液水解，當樣品通過時， 水解產物可以與樣品一同進入檢測器檢測造成干擾。在長時間的使用過程中，流動相通過氨 基柱時氨基基團會有脫落，存在噪聲；當樣品純度不高時，噪聲也會很大，氨基柱的柱效下 降很快。氨基柱的柱效下降是由氨基本身特性決定的，使用后的常規保養是起不到太大作用 的，所以導致氨基柱的使用壽命較短。同時，目前用于異麥芽酮糖檢測的HPLC常采用反相 系統，在流動相的選擇上，多選擇乙腈和水作為流動相，通過乙腈與水的不同比例的混合達 到分離異麥芽酮糖的目的。但是在氨基柱-乙腈水系統的分析中，隨著檢測異麥芽酮糖數量的 增加，氨基柱的柱效下降，使異麥芽酮糖的檢出線降低。為了保證檢測精度，必需經常更換 氨基柱，導致檢測成本較高。

因此，在保護柱子壽命的前提下，利用液相色譜法檢測食品中的異麥芽酮糖含量的檢測 最主要解決的是如何使食品中蔗糖與異麥芽糖完全分離問題。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的至少一個不足，提供一種食品中異麥芽酮糖的分離和 檢測方法。

本發明所采取的技術方案是：

本發明的第一個方面，提供：

一種樣品中異麥芽酮糖的分離方法，包括：

樣品前處理：稱取樣品，用去離子水分散樣品，加入蛋白沉淀劑，混勻靜置后過濾，取 濾液，進一步使用微孔濾膜過濾，得到微孔濾液；