[發(fā)明專利]SARS-CoV-2中和抗體檢測試劑盒

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• 申請日: 2020-06-18
• 公開（公告）號: CN111562368A
• 公開（公告）日: 2020-08-21
• 發(fā)明（設計）人: 姚繼承;吳晗琪;趙海英;劉海光;衣曉娜;叢向明
• 申請（專利權）人: 威海威高生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/543
• 代理公司: 廣州華進聯(lián)合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 林青中

本發(fā)明涉及一種SARS?CoV?2中和抗體檢測試劑盒，其包括固相載體、SARS?CoV?2的S蛋白的第一抗原以及第二抗原；所述第二抗原標記有信號物質(zhì)。通過免疫診斷技術來實現(xiàn)檢測中和抗體來判斷新冠病毒是否感染以及是否存在感染風險，該方法理論可靠，實際可行，只需在二級生物安全實驗室就可完成。

技術領域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)學檢測領域，具體而言，涉及一種SARS-CoV-2中和抗體檢測試劑盒。

背景技術

冠狀病毒科分為α、β、γ和δ4個屬，α、β屬的冠狀病毒可感染哺乳動物和人。嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒2(severe acute respiratory syndrome coro-navirus 2，SARS-CoV-2)屬于β屬的新型冠狀病毒，圓形或橢圓形，直徑60～140nm，電鏡下呈皇冠樣形狀。與2002年出現(xiàn)的SARS-CoV類似，SARS-CoV-2同屬于Sarbecovirus亞屬(冠狀病毒科，冠狀病毒屬)，都是依靠人細胞表面ACE2蛋白作為細胞進入受體。蛋白序列分析發(fā)現(xiàn)，SARS-CoV-2與SARS-CoV的7個保守非結(jié)構(gòu)蛋白氨基酸相似度為94.6％。

現(xiàn)有的對SARS-CoV-2的檢測方法主要有核酸檢測和抗體檢測，主要方法有熒光PCR法、酶聯(lián)免疫吸附法、膠體金層析法、化學發(fā)光法，其中核酸檢測靈敏度高，特異性強，準確度高，但是對操作要求相對較高，檢測時間長。抗體檢測靈敏度較高，特異性較強，但是需要在被感染7～14天后才能出現(xiàn)IgM/IgG抗體。而且目前這些方法只能檢測是否處于感染期，并不能針對治愈后患者是否存在再感染風險，以及普通大眾是否存在暴露及感染風險等進行確認。

新型冠狀病毒中和抗體是新型冠狀病毒肺炎患者在染病的數(shù)天或約一周后血液內(nèi)產(chǎn)生的一種抗體。中和抗體具有識別病毒表面的S蛋白(spike protein)的受體結(jié)合域(receptor binding domain，RBD)、阻斷其與細胞表面血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(angiotensin-converting enzyme 2，ACE2)的結(jié)合的功能，從而發(fā)揮抗病毒作用。因此，中和抗體的檢測可決定是否能夠更安全地重返工作崗位或參加更多的社交活動，現(xiàn)階段確認康復患者或無癥狀感染者有無再度感染風險，后期隨著疫苗的研制成功并廣泛應用，可作為疫苗效果的的評價指標。

新型冠狀病毒的檢測方法主要包括核酸檢測和抗體檢測，核酸檢測對儀器的要求標準高，操作繁瑣，耗時長，檢測費用昂貴；抗體檢測方法包括磁微粒化學發(fā)光發(fā)、膠體金法、普通化學發(fā)光法和酶聯(lián)免疫法等，普通化學發(fā)光法檢測時間長，檢測效率低，主要依靠純手動加樣，操作繁瑣，導致實驗結(jié)果易誤差大；酶促反應不夠徹底，且易受溫度、時間及材料濃度等外部干擾因素影響，檢測時特異性低、靈敏度差、檢測范圍窄。

發(fā)明內(nèi)容

為了實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術方案：

本發(fā)明涉及一種SARS-CoV-2中和抗體檢測試劑盒，其包括固相載體、SARS-CoV-2的S蛋白的第一抗原以及第二抗原；

所述第二抗原標記有信號物質(zhì)。

與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的有益效果為：

本發(fā)明所提供的新冠病毒中和抗體檢測試劑盒，采用雙抗原夾心法技術對冠病毒中和抗體進行檢測，該方法理論可靠，實際可行，只需在二級生物安全實驗室就可完成，且采用新冠病毒S蛋白抗原包被在固相載體上，新冠病毒中和抗體標記在例如發(fā)光標記物或酶標記物上，采用磁微粒化學發(fā)光法等技術結(jié)合例如化學發(fā)光儀測定，或者利用膠體金等免疫層析技術來進行快速診斷結(jié)果，判斷血清或者血漿中的新冠病毒中和抗體。該種免疫分析技術下，靈敏度高，操作簡單，檢測時間小于1小時，結(jié)果重復性好，干擾因素少，特異性強。