[發(fā)明專利]一株生產(chǎn)井岡霉素的吸水鏈霉菌突變株及其應用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010558185.3
• 申請日: 2020-06-18
• 公開（公告）號: CN111647535A
• 公開（公告）日: 2020-09-11
• 發(fā)明（設計）人: 殷紅福;王佳;包霞霞;申屠羅鳳;李忠;倪烈
• 申請（專利權）人: 浙江省桐廬匯豐生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N13/00;C12N15/01;C12P19/46;C12R1/55
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 瞿曉晶

本發(fā)明提供了一株生產(chǎn)井岡霉素的吸水鏈霉菌突變株及其應用，屬于井岡霉素生產(chǎn)技術領域，本發(fā)明提供的生產(chǎn)井岡霉素的吸水鏈霉菌突變株HF?1823，保藏編號為CGMCC No.19793；突變株HF?1823是以吸水鏈霉菌井岡變種hfgj?01為出發(fā)菌株經(jīng)過微波誘變、ARTP誘變和抗性篩選獲得。本發(fā)明所述的突變株HF?1823生產(chǎn)的井岡霉素中活性成分井岡霉素A含量高，非活性成分井岡羥胺A的含量顯著降低。同時本發(fā)明提供的突變株HF?1823遺傳穩(wěn)定性好，傳至四代產(chǎn)井岡霉素水平與第一代相當；能夠應用于井岡霉素的工業(yè)化生產(chǎn)中。

技術領域

本發(fā)明屬于井岡霉素生產(chǎn)技術領域，尤其涉及一株生產(chǎn)井岡霉素的吸水鏈霉菌突變株及其應用。

背景技術

井岡霉素是一種放線菌產(chǎn)生的抗生素，具有較強的內吸性，易被菌體細胞吸收并在其內迅速傳導，干擾和抑制菌體細胞生長和發(fā)育。井岡霉素是一種農用抗生素，主要用于水稻紋枯病，也可用于水稻稻曲病、玉米大小斑病以及蔬菜和棉花、豆類等作物病害的防治。多年大規(guī)模的田間使用結果充分顯示其“防效高、無藥害、無污染”的環(huán)保型農藥的特點，深受國內外用戶歡迎。井岡霉素已成為當今產(chǎn)量和使用面積最大的生物殺菌劑之一。

井岡霉素屬于氨基糖苷類物質，主要由A、B、C、D、E、F等組分組成，井岡羥胺是井岡霉素生物合成的中間產(chǎn)物，高含量井岡霉素A應用前景十分廣闊，井岡霉素A對紋枯病的防治作用最強，井岡羥胺A直接使用效果較差，井岡霉素A與井岡羥胺A的結構類似，難以通過離子交換樹脂等方法去除，井岡羥胺A的存在使產(chǎn)品中井岡霉素A純度維持在60％～70％，難以提高，影響了產(chǎn)品的進一步應用，因此，減少發(fā)酵液中井岡羥胺A的含量具有迫切性。

發(fā)明內容

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一株生產(chǎn)井岡霉素的吸水鏈霉菌突變株及其應用；所述突變株能夠生產(chǎn)發(fā)酵生產(chǎn)井岡霉素，產(chǎn)量高，并且發(fā)酵液中井岡羥胺A的含量低；發(fā)酵液中井岡羥胺A/井岡霉素A比值低。

為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供了以下技術方案：

本發(fā)明提供了一株生產(chǎn)井岡霉素的吸水鏈霉菌井岡變種(Streptomyceshygroscopicus var.jinggangensis)突變株HF-1823，保藏編號為CGMCC No.19793。

本發(fā)明提供了所述的突變株HF-1823在生產(chǎn)井岡霉素中的應用。

優(yōu)選的，包括以下步驟：

1)將所述突變株HF-1823活化、種子培養(yǎng)后獲得種子液；

2)將所述種子液接種至發(fā)酵培養(yǎng)基中進行發(fā)酵培養(yǎng)獲得發(fā)酵液。

優(yōu)選的，所述種子培養(yǎng)的溫度為39～41℃，所述種子培養(yǎng)的轉速為220～260rpm，所述種子培養(yǎng)的時間為18～20h。

優(yōu)選的，所述種子培養(yǎng)的培養(yǎng)基，以水為溶劑，每升包括以下質量的組分：大米粉35～45g，酵母粉15～25g，NaCl 0.2～0.4g，CaCO₃0.4～0.6g，KH₂PO₄0.2～0.4g。

優(yōu)選的，步驟2)中所述種子液的接種量為5％～10％(V/V)。

優(yōu)選的，步驟2)中所述發(fā)酵培養(yǎng)的通氣比為(0.8～1.2)：(0.8～1.2)；所述發(fā)酵培養(yǎng)的攪拌轉速為160～200rpm；所述發(fā)酵培養(yǎng)的溫度為39～41℃，所述發(fā)酵培養(yǎng)的時間為35～40h。

優(yōu)選的，所述發(fā)酵培養(yǎng)基，以水為溶劑，每升包括以下質量的組分：大米粉80～120g，花生餅粉22～28g，NaCl 0.2～0.4g，CaCO₃0.2～0.4g，KH₂PO₄0.2～0.4g，消泡劑0.08～0.12g。