[發(fā)明專利]血紅蛋白類物質(zhì)的檢測(cè)方法及其檢測(cè)設(shè)備

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010556522.5
• 申請(qǐng)日: 2020-06-17
• 公開（公告）號(hào): CN111562339B
• 公開（公告）日: 2022-11-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 徐巖;劉先成;曾映;胡明龍;胡文雍;張波
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 深圳普門科技股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88
• 代理公司: 廣東恩典律師事務(wù)所 44549
• 代理人: 張紹波;李健

本發(fā)明涉及一種血紅蛋白類物質(zhì)的檢測(cè)方法及其檢測(cè)設(shè)備。該血紅蛋白類物質(zhì)的檢測(cè)方法包括如下步驟：對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行陽離子交換液相色譜檢測(cè)，得到待測(cè)樣品的檢測(cè)信號(hào)，流動(dòng)相包括丁二酸鹽，流動(dòng)相的pH值為4~8；對(duì)檢測(cè)信號(hào)進(jìn)行分析，以判斷待測(cè)樣品中是否含有血紅蛋白類物質(zhì)，血紅蛋白類物質(zhì)包括血紅蛋白變異體，血紅蛋白變異體包括Hb New York。上述血紅蛋白類物質(zhì)的檢測(cè)方法能夠有效地檢測(cè)Hb New York，有利于避免Hb New York的血紅蛋白類物質(zhì)的檢測(cè)結(jié)果的干擾，解決了人們一直渴望解決但始終未能獲得成功的技術(shù)難題。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種血紅蛋白類物質(zhì)的檢測(cè)方法及其檢測(cè)設(shè)備。

背景技術(shù)

血紅蛋白（Hemoglobin，Hb）是紅細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸氧的特殊蛋白質(zhì)，是使血液呈紅色的蛋白，由珠蛋白和血紅素組成。血紅蛋白由HbA（血紅蛋白A）、HbA2（血紅蛋白A2）和HbF（血紅蛋白F）組成。其中，HbA主要存在于成人體內(nèi)，其珠蛋白肽鏈由兩個(gè)α鏈和兩個(gè)β鏈構(gòu)成。HbA分為HbA0和HbA1兩種，HbA0為未被糖基化HbA，而HbA1為糖基化HbA。HbA2珠蛋白亞基的多肽連由兩條α鏈和兩條δ鏈過程。HbF主要存在于胎兒期，其珠蛋白肽鏈包括兩條α鏈和兩條γ鏈。

血紅蛋白變異體是由血紅蛋白中珠蛋白發(fā)生基因突變而導(dǎo)致其肽鏈的單個(gè)或多個(gè)氨基酸替代或缺失，導(dǎo)致珠蛋白分子結(jié)構(gòu)改變而生成的一種物質(zhì)。目前，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)超過1173種血紅蛋白變異體。其中，Hb New York是珠蛋白β鏈異常血紅蛋白，是珠蛋白β鏈第113位的Val（纈氨酸）被Glu（谷氨酸）替代所形成的異常血紅蛋白。

一般地，檢測(cè)血紅蛋白的方法包括毛細(xì)管電泳法和液相色譜法。毛細(xì)管電泳法具有良好的精密度和正確度，不受常見血紅蛋白變異體的干擾。毛細(xì)管電泳法的自動(dòng)化程度地，檢測(cè)速度慢，不利于快速檢測(cè)。液相色譜法的自動(dòng)化程度高，檢測(cè)速度快，能夠用于血紅蛋白的快速檢測(cè)。然而，由于血紅蛋白變異體與血紅蛋白的等電點(diǎn)較為接近，采用液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)時(shí)容易受到血紅蛋白變異體的干擾而影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。尤其是Hb NewYork與血紅蛋白的等電點(diǎn)和電荷量均較為接近，非常影響液相色譜法的檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性。然后，現(xiàn)有的液相色譜法因?yàn)槠浞蛛x度還無法達(dá)到有效檢測(cè)Hb New York的水平，因此難以識(shí)別出Hb New York，避免其對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾。如何能夠通過液相色譜法檢測(cè)出Hb NewYork以便于避免Hb New York對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾，成為本技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)難題，一直未能被攻克。

發(fā)明內(nèi)容

基于此，有必要提供一種分離度較高的血紅蛋白類物質(zhì)的檢測(cè)方法。該檢測(cè)方法能夠有效檢測(cè)Hb New York。

一種血紅蛋白類物質(zhì)的檢測(cè)方法，包括如下步驟：

對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行陽離子交換液相色譜檢測(cè)，得到所述待測(cè)樣品的檢測(cè)信號(hào)，其中，流動(dòng)相包括丁二酸鹽，所述流動(dòng)相的pH值為4~8；及

對(duì)所述檢測(cè)信號(hào)進(jìn)行分析，以判斷所述待測(cè)樣品中是否含有血紅蛋白類物質(zhì)，所述血紅蛋白類物質(zhì)包括血紅蛋白變異體，所述血紅蛋白變異體包括Hb New York。

研究發(fā)現(xiàn)，Hb New York與HbA0的等電點(diǎn)和電荷量均非常接近，非常難以檢測(cè)和分離Hb New York。目前，全球范圍內(nèi)尚無報(bào)道通過液相色譜法能夠有效檢測(cè)Hb New York。而本研究經(jīng)過大量的研究，創(chuàng)造性地發(fā)現(xiàn)，以pH值為4~8的含有丁二酸鹽的溶液作為流動(dòng)相，對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行陽離子交換液相色譜檢測(cè)，不僅能夠提高Hb New York與HbA0的分離度，而且能夠有效地檢測(cè)出Hb New York，有利于避免Hb New York對(duì)血紅蛋白類物質(zhì)的檢測(cè)結(jié)果的干擾，解決了人們一直渴望解決但始終未能獲得成功的技術(shù)難題。經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證，采用上述血紅蛋白類物質(zhì)的檢測(cè)方法對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)，Hb New York與HbA0的分離度大于80%，對(duì)Hb New York與HbA0分離度較高，能夠有效地檢測(cè)Hb New York。