[發(fā)明專利]一種用于腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的微流控芯片及檢測(cè)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010552692.6
• 申請(qǐng)日: 2020-06-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113009134A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-06-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 韓琳;王春華;張宇;劉宏
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/574
• 分類號(hào): G01N33/574;G01N33/558;B01L3/00
• 代理公司: 青島華慧澤專利代理事務(wù)所(普通合伙) 37247
• 代理人: 劉娜

1.一種用于腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的微流控芯片，其特征在于，包括反應(yīng)層襯底和位于其上的微流道加樣層，所述反應(yīng)層襯底包括載玻片基板和組裝于載玻片基板上的氧化石墨烯量子點(diǎn)納米材料基底，所述氧化石墨烯量子點(diǎn)納米材料基底上印刷有條形檢測(cè)帶和質(zhì)控帶；所述微流道加樣層的底部設(shè)有多個(gè)微流道凹槽，多個(gè)所述微流道凹槽與多個(gè)所述條形檢測(cè)帶和質(zhì)控帶垂直布置形成多個(gè)反應(yīng)點(diǎn)陣，所述微流道加樣層上還設(shè)有上下貫通的流入孔和流出孔，所述微流道凹槽的兩端分別與所述流入孔和流出孔連通。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的微流控芯片，其特征在于，多個(gè)所述條形檢測(cè)帶和質(zhì)控帶周期性平鋪于氧化石墨烯量子點(diǎn)納米材料基底上形成探針區(qū)域。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的微流控芯片，其特征在于，多個(gè)所述條形檢測(cè)帶和質(zhì)控帶均勻排列，且平行間隔設(shè)置，多個(gè)所述微流道凹槽均勻垂直于多個(gè)所述條形檢測(cè)帶和質(zhì)控帶布置。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的微流控芯片，其特征在于，所述載玻片基板的材質(zhì)為硅酸鈣、硅酸鈉或二氧化硅。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的微流控芯片，其特征在于，所述氧化石墨烯量子點(diǎn)納米材料基底為將所述載玻片基板與氧化石墨烯量子點(diǎn)納米材料反應(yīng)后沖洗，晾干得到。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的微流控芯片，其特征在于，所述條形檢測(cè)帶和質(zhì)控帶是生物分子與氧化石墨烯量子點(diǎn)納米材料基底通過(guò)功能團(tuán)或π-π鍵物理吸附在載玻片基板上。

7.一種用于腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的方法，采用如權(quán)利要求1所述的一種用于腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的微流控芯片，其特征在于，包括如下過(guò)程：

(1)從多個(gè)流入孔分別注入不同的待測(cè)樣本，孵育15-30min，使待測(cè)樣本中的待測(cè)抗原充分與反應(yīng)層襯底上條形檢測(cè)帶和質(zhì)控帶的腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)抗體結(jié)合，孵育完成之后，從流出孔將多余的待測(cè)樣本取出，此時(shí)，待測(cè)抗原與腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)抗體特異性結(jié)合固定在反應(yīng)層襯底上；

(2)在含BSA質(zhì)量濃度為0.5-5％的DPBS中揭片，并且用質(zhì)量濃度為0.5-5％的BSA將沒(méi)有吸附在反應(yīng)層襯底上的待測(cè)抗原沖洗干凈；

(3)取混合檢測(cè)抗體溶液滿鋪在反應(yīng)層襯底上，孵育10-30min；

(4)用質(zhì)量濃度為0.5-5％的BSA沖洗，然后取APC-鏈霉親和素偶聯(lián)物滿鋪在反應(yīng)層襯底上，此時(shí)，APC-鏈霉親和素偶聯(lián)物與帶有生物素標(biāo)記的腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)抗體特異性結(jié)合固定在反應(yīng)層襯底上，然后對(duì)腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行熒光檢測(cè)。