[發(fā)明專利]一種可自動加液及調節(jié)預凍高度的精液冷凍稀釋方法

有效

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• 申請日: 2020-06-16
• 公開（公告）號: CN111602650B
• 公開（公告）日: 2021-12-24
• 發(fā)明（設計）人: 權國波;呂春榮;梁家充;吳國權;邵慶勇;信愛國;洪瓊花
• 申請（專利權）人: 云南省畜牧獸醫(yī)科學院
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02;A61D19/02
• 代理公司: 北京艾皮專利代理有限公司 11777
• 代理人: 李德勝

本發(fā)明涉及一種可自動加液及調節(jié)預凍高度的精液冷凍稀釋方法，包括如下步驟：將新鮮精液放入50ml的燒杯中，于自動加液稀釋裝置的恒溫水浴搖床上預熱，搖床轉速設定為10?220rpm；稀釋液下滴的速度控制為10?200微升/秒；液氮氣相預凍時，預凍裝置高度根據(jù)動物品種確定，最后投入液氮中保存。本發(fā)明可自動添加稀釋液，標準化操作，排除個人手工操作干擾，并根據(jù)不同動物調整不同的液氮氣相預凍高度。本發(fā)明的方法使用的裝置結構簡單，利用實驗室現(xiàn)有器械進行簡單改造即可使用，因此不會對凍精售價造成影響，但是顯著提高了凍精品質，在生產試驗中能提高產羔率8?9個百分點，顯著提高了畜牧養(yǎng)殖場的生產效益。

技術領域

本發(fā)明涉及動物繁殖育種領域，具體涉及一種可自動加液及調節(jié)預凍高度的精液冷凍稀釋方法。

背景技術

現(xiàn)代畜牧業(yè)，養(yǎng)牛養(yǎng)豬大部分都是用凍精來做人工授精讓母畜懷孕，場里很少養(yǎng)公牛，凍精要稀釋后做成細管，一個母畜一只細管，這樣一只公畜就能供很多母畜受孕，精液冷凍保存技術對于遺傳資源保護和人工授精技術推廣具有重要意義。冷凍精液的品質關系到母畜懷孕生產的效率和仔畜的強壯程度，是影響現(xiàn)代畜牧業(yè)生產效益的關鍵因素。通常，精液冷凍過程包括精液采集、質量評價、精液稀釋、低溫平衡、液氮氣相預凍和液氮保存等環(huán)節(jié)，對于如何提高冷凍精液品質，目前國內外相關研究主要集中于稀釋液配方上，最近還有文獻報道提出，由于稀釋效應的存在，冷凍精液中，稀釋液與需要冷凍的新鮮精液的比例會對解凍后的精子質量產生一定影響。

然而實際操作中，每個環(huán)節(jié)都會對凍精品質產生影響，特別是精液稀釋、液氮氣相預凍這2個環(huán)節(jié)，是給精液冷凍帶來負面效應的關鍵環(huán)節(jié)。稀釋液的添加速度以及精液與稀釋液混勻的速度對凍精品質有關鍵影響，但是長期以來，研究人員和日常生產人員對這一環(huán)節(jié)關注度不足，精液稀釋基本都是人工手動，靠經驗操作，稀釋液添加速度和精液與稀釋液混勻的速度無法實現(xiàn)標準化，不同的操作人員其稀釋效果差異大，不統(tǒng)一、不標準，是造成不同批次凍精質量差異的重要原因之一。

另外，在液氮氣相預凍操作時，目前的預凍裝置為一個金屬臺座，將細管放在金屬臺座上再放入液氮氣相中預凍，但是長期以來，研究人員和日常生產人員并未意識到液氮氣相的溫度隨高度不同而不同，不同品種的動物，精液在預凍時需要的溫度實際上并不相同，如果不管什么動物的精液預凍時都只用一個固定高度的金屬臺座，而不管凍精細管離液氮液面的高度，這樣做并不科學，也沒有完全挖掘提升凍精品質的潛力。

發(fā)明內容

為解決以上問題，本發(fā)明提出一種可自動加液及調節(jié)預凍高度的精液冷凍稀釋方法，對稀釋液添加方式和預凍方式提出標準化的解決方案。

本發(fā)明解決其技術問題所采用的技術方案為：

一種可自動加液及調節(jié)預凍高度的精液冷凍稀釋方法，包括如下步驟：

1)采集新鮮精液進行品質檢查，精子活力大于75％，精子密度大于2.5×10⁹/ml，畸形率小于10％的可以用于冷凍保存；

2)將步驟1)獲得的符合冷凍保存條件的新鮮精液放入50ml的燒杯中，所述燒杯事先放置于自動加液稀釋裝置的恒溫水浴搖床上預熱，溫度設置為36-40℃；

3)打開所述自動加液稀釋裝置的搖床，轉速設定為10-220rpm；

4)將稀釋液加入所述自動加液稀釋裝置的滴定管，打開滴定管下部的流量控制閥，將稀釋液下滴的速度控制為10-200微升/秒；

5)稀釋液滴盡后，關閉搖床，取下燒杯，將杯中已經稀釋好的精液分裝于0.25ml塑料細管中，封口；

6)將步驟5)獲得的塑料細管和預凍裝置一起置于5℃環(huán)境中平衡4小時，塑料細管與預凍裝置不接觸；