[發明專利]一種[2]-網狀索烴DNA單層陣列的制備方法及其應用

有效

• 申請號: 202010551136.7
• 申請日: 2020-06-17
• 公開（公告）號: CN111617097B
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發明（設計）人: 吳再生;尹洪衛;陳燕茹;王偉軍
• 申請（專利權）人: 福州大學
• 主分類號: A61K31/713
• 分類號: A61K31/713;C12N15/10;A61P35/00;C12P19/34
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 饒文君;蔡學俊

1.[2]-網狀索烴的DNA單層陣列的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）首先在ATP和PNK的幫助下，分別對參與組裝的兩條DNA鏈的5?端進行磷酸化，然后加熱滅活PNK酶，獲得DNA鏈1和DNA鏈2溶液，靜置4小時后備用；所述DNA鏈具有回文結構區域；

（2）用1×T4 DNA連接酶緩沖液分別將DNA鏈1和 DNA鏈2溶液稀釋至最終濃度1.6 μM；在恒溫金屬浴內90℃退火5分鐘后，讓溶液慢慢冷卻到室溫，分別得到由DNA鏈1縱向連接形成的納米線lPSa和DNA鏈2縱向連接形成的納米線lPSb；然后，將lPSa和lPSb溶液以相同的摩爾比混合，在恒溫振蕩金屬浴上室溫下繼續孵育30分鐘，組裝實驗的總體積為25 μL；此步驟可生成帶有缺口的陣列結構；隨后加入0.5 μL T4 DNA連接酶，16℃條件下反應1 h使兩種單鏈開口閉合形成環，然后65℃加熱20 min，使連接酶失活，即得到所述[2]-網狀索烴的DNA單層陣列；

所述DNA鏈1為PSa：P?CTTACCTGATAGCGCGCGCTTAGAACGAGTCATATCACACGCCCCGGGGCACTACTAAC；DNA鏈2為PSb：p?ACTCGTTCTAAGCGCGCGCTATCAGGTAAGGTTAGTAGTGCCCCGGGGCGTGTGATATG。

2.如權利要求1所述方法制備獲得的[2]-網狀索烴的DNA單層陣列。

3.如權利要求2所述的[2]-網狀索烴的DNA單層陣列在制備腫瘤靶向藥中的應用。