[發(fā)明專利]一種高穩(wěn)定性的膠乳增強免疫比濁法測定試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010550846.8
• 申請日: 2020-06-16
• 公開（公告）號: CN111929434B
• 公開（公告）日: 2023-03-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 黃晶晶;陳媛;張聞;周海濱;陳思思;方蓉
• 申請（專利權(quán)）人: 寧波瑞源生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 寧波市鄞州盛飛專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 33243
• 代理人: 王玲華;洪珊珊

本發(fā)明提供一種高穩(wěn)定性的膠乳增強免疫比濁法測定試劑盒，包括試劑R1和試劑R2；試劑R1包括：緩沖液、電解質(zhì)、表面活性劑、反應(yīng)促進劑、穩(wěn)定劑、防腐劑；試劑R2包括：緩沖液、抗體包被的膠乳顆粒、表面活性劑、水楊酸鈉、甘油、穩(wěn)定劑、防腐劑。試劑R2的pH值為7.8?8.3。本發(fā)明通過在試劑R2中添加水楊酸鈉和甘油，水楊酸鈉解離膠乳顆粒上的低聚物，甘油維持膠乳顆粒的懸浮狀態(tài)，并進一步限定試劑R2的pH值為7.8?8.3，有利于高濃度甘油的分散，有利于維持試劑的電荷平衡，并促進低聚物的快速分離，加快試劑趨于穩(wěn)定狀態(tài)；從而提高試劑R2的穩(wěn)定性，最終提高試劑盒檢測靈敏性和準確性。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于免疫測定技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種高穩(wěn)定性的膠乳增強免疫比濁法測定試劑盒。

背景技術(shù)

膠乳增強免疫比濁法是近年來出現(xiàn)的一種較為穩(wěn)定、準確的體液蛋白均相免疫比濁檢測方法。其檢驗原理是在高分子納米微球表面包被特定的抗體，當樣品中的抗原與包被有特定抗體的納米微球混合后，能夠在短時間內(nèi)迅速聚集在一起，形成抗原-抗體-納米微球復合物，從而引起吸光度的變化。且反應(yīng)液吸光度的變化值與被測抗原的濃度有較強的相關(guān)性，在一定范圍內(nèi)可以反應(yīng)樣品中被測抗原的含量。用膠乳增強免疫比濁法檢測樣品中抗原的含量具有如下優(yōu)點：(1)免疫復合物能在短時間內(nèi)迅速聚集，大大提高了檢測試劑的靈敏度；(2)可直接應(yīng)用于普通生化分析儀，操作簡單，容易實現(xiàn)自動化，可在各級基層醫(yī)療機構(gòu)普及應(yīng)用；(3)檢測結(jié)果不受人為操作和外界因素的干擾，結(jié)果具有良好的重復性。

現(xiàn)有的膠乳增強免疫比濁測定試劑盒一般包括試劑R1、試劑R2、校準試劑、質(zhì)控試劑等，試劑R2中的主要成分是包被有抗體的納米微球。在這個抗體-膠乳系統(tǒng)中，納米微球與納米微球、納米微球與抗體、抗體與抗體之間存在著物理化學等多種相互作用力，這些力的相互平衡是維持抗體-膠乳系統(tǒng)穩(wěn)定，保證產(chǎn)品始終具有較好免疫反應(yīng)性的重要前提。然而，在實際儲存過程中，受多方面因素的影響，試劑R2體系往往不穩(wěn)定，其反應(yīng)靈敏度會隨著儲存時間的延長而逐漸下降。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對已有膠乳增強免疫比濁法測定試劑盒中存在的不足，通過在試劑R2中添加水楊酸鈉和甘油成分，提高試劑R2體系的儲藏穩(wěn)定性，從而提高試劑盒的靈敏性和準確性。

本發(fā)明的以上目的通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)：一種高穩(wěn)定性的膠乳增強免疫比濁法測定試劑盒，所述試劑盒包括試劑R1和試劑R2；

試劑R1包括：緩沖液、電解質(zhì)、表面活性劑、反應(yīng)促進劑、穩(wěn)定劑、防腐劑；

試劑R2包括：緩沖液、抗體包被的膠乳顆粒、表面活性劑、水楊酸鈉、甘油、穩(wěn)定劑、防腐劑。

包被有抗體的膠乳顆粒在長期存儲過程中會因為自身的重力作用而逐漸聚集于緩沖液底部，形成沉淀，從而破壞試劑R2的穩(wěn)定性，本發(fā)明在試劑R2中添加的甘油有助于抗體-膠乳顆粒克服重力作用，使其均勻的懸浮于緩沖溶液中并保持一個穩(wěn)定的狀態(tài)。膠乳顆粒在制備時往往會殘留部分低聚物，這些低聚物會隨著時間的延長逐漸從水溶液中解離出來，使試劑的免疫反應(yīng)性逐漸下降，造成試劑的不穩(wěn)定，本發(fā)明添加的水楊酸鈉有助于殘留的低聚物從微球中快速解離，使試劑R2的免疫反應(yīng)性始終維持在一個穩(wěn)定的狀態(tài)。

本發(fā)明通過在膠乳增強免疫比濁法測定試劑盒的試劑R2中添加甘油和水楊酸鈉，有效提高試劑R2的穩(wěn)定性。

作為優(yōu)選，試劑R2中，所述水楊酸鈉的濃度為25-100mmol/L。

作為優(yōu)選，試劑R2中，所述甘油的質(zhì)量分數(shù)為5-15％。

在試劑R2中，水楊酸鈉和甘油的含量對其穩(wěn)定性至關(guān)重要：甘油的添加量與其助懸作用成正比，但是甘油的過多添加，會導致試劑變得粘稠，試劑R2中各成分分布不均勻，影響加樣均勻性；而如果添加過多的水楊酸鈉，試劑R2的電荷平衡會受到較大的破壞，影響膠乳顆粒穩(wěn)定性。

作為優(yōu)選，所述試劑R2的pH值為7.8-8.3。