[發明專利]一種肺泡吸入組合物及其制備方法和其應用

有效

• 申請號: 202010546476.0
• 申請日: 2020-06-15
• 公開（公告）號: CN111773251B
• 公開（公告）日: 2022-11-29
• 發明（設計）人: 閆小君;羅進
• 申請（專利權）人: 江蘇安泰生物技術有限公司
• 主分類號: C12N5/0775
• 分類號: C12N5/0775;A61K31/05;A61K31/343;A61K31/4415;A61K31/519;A61K31/715
• 代理公司: 北京中政聯科專利代理事務所(普通合伙) 11489
• 代理人: 尹瑋

本發明提供了一種肺泡吸入組合物及其制備方法和其應用。所述肺泡吸入組合物包括干細胞提取物和植物提取物，其在肺部疾病、肺部病變后功能修復的治療與預防具有顯著療效。

技術領域

本發明涉及生物醫藥領域，具體涉及一種肺泡吸入組合物及其制備方法和其應用。

背景技術

間充質干細胞(mesenchymal stem cells，MSCs)來源于發育早期的中胚層，是一類具有自我復制和多向分化能力的細胞。間充質干細胞廣泛存在于全身多處組織中，包括骨髓、脂肪、滑膜、牙髓、羊水、胎盤、臍帶、胚胎等，均可分離用于制備間充質干細胞。不同來源的間充質干細胞具有相似的形態，表達相同的表面標記，具有相似的生物學特性。MSCs除了具有多向組織細胞分化能力之外，還在免疫調節、組織修復等方面發揮重要的功能調節作用，可產生干細胞生長因子(SCF)、神經生長因子(NGF)、白介素-6(IL-6)、白介素-7(IL-7)、腫瘤壞死因子(TNF)、干擾素(IFN)等細胞活性因子，參與調節細胞生長、細胞凋亡、細胞分化、抗病毒、免疫成熟等過程，可用于治療急性肺損傷、重癥肺炎、急性呼吸窘迫綜合征等疾病。

徐暢等(Sci Sin Vitae，2020，50)報道了間充質干細胞(MSCs)用于治療COVID-19并取得了初步療效。第一例臨床試驗利用人臍帶來源MSCs進行三次靜脈回輸治療，結果表明，受試者中性粒細胞下降，淋巴細胞增加，CD4+T、CD8+T細胞恢復至正常水平，大部分生命體征得到改善。第二例臨床試驗顯示，MSCs靜脈移植治療2-4天后，受試者調節型樹突細胞群增大、促炎因子TNF-a水平下降、抗炎因子IL-10水平升高。結果表明，MSCs對重癥患者治療的有益作用。但MSCs產品為“活的藥物”，要求在其儲存、生產、運輸和應用等環節冷鏈運輸且要求極為苛刻。為此，如何開發新型藥物組合物利于提高其質量和療效、更好地滿足臨床應用需求成為醫藥領域迫切需要解決的技術問題。

發明內容

本發明的目的之一在于提供一種肺泡吸入組合物，每100mg所述的組合物中包括由3-10×10⁸個細胞制備得到的細胞提取物、5-25mg植物提取物(溶質質量)和藥學上可接受的載體。

本發明的優選技術方案中，所述細胞提取物為干細胞提取物，優選為間充質干細胞提取物。

本發明的優選技術方案中，所述間充質干細胞選自骨髓間充質干細胞、臍帶間充質干細胞、脂肪組織間充質干細胞、滑膜間充質干細胞、牙髓間充質干細胞、羊水間充質干細胞、胎盤間充質干細胞、胚胎間充質干細胞、多能干細胞來源的間充質干細胞的任一種或其組合。

本發明的優選技術方案中，所述細胞提取物的制備方法包括下述步驟：將培養成熟的細胞重懸于原培養液上清中，破碎細胞，收集破碎液，離心去除碎片，收集上清，即得。

本發明的優選技術方案中，所述培養成熟的細胞為傳代1-10次的細胞，優選為傳代3-7次的細胞，更優選為傳代5-6次的細胞。

本發明的優選技術方案中，所述重懸步驟中的細胞濃度為1-5×10⁸/ml，優選為1.5-4×10⁸/ml，更優選為2-3×10⁸/ml。

本發明的優選技術方案中，所述培養液中不含有抗生素及胎牛血清。

本發明的優選技術方案中，所述培養液為DMEM/F12(1:1)培養液。

本發明的優選技術方案中，采用超聲破碎法破碎細胞。

本發明的優選技術方案中，所述超聲破碎條件為：超聲功率為135w，超聲頻率為25KHz，超聲30-60min。

本發明的優選技術方案中，所述離心條件為：轉速為1000-3000g，離心5-10min。