[發明專利]利用RNA核酸適配體構建植物新型轉化報告系統

有效

• 申請號: 202010545088.0
• 申請日: 2020-06-15
• 公開（公告）號: CN111690656B
• 公開（公告）日: 2022-10-21
• 發明（設計）人: 趙云;王睿;白九元;王茂林
• 申請（專利權）人: 四川大學
• 主分類號: C12N15/115
• 分類號: C12N15/115;C12N15/82;C12N15/65;A01H5/00;A01H6/20
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所(普通合伙) 42001
• 代理人: 張紅兵

1.一種利用RNA核酸適配體構建RNA水平的植物轉化報告鑒定的方法，其特征在于，通過如下步驟制備得到：所述植物轉化報告系鑒定的方法以序列表SEQ ID NO：1所示序列作為RNA核酸適配體3WJ-4×Bro的遺傳標記，所述的遺傳標記是利用RNAfold在線服務系統對原始broccoli的核心位點進行優化，以四拷貝連接于新的三叉支架結構3WJ上，形成一個如SEQ ID NO：1所示序列的3WJ-4×Bro標記，將所述3WJ-4×Bro標記連接靶基因的3’端，得到一種融合基因，將所述融合基因導入植物表達載體NtTubα-3WJ-4×Bro中，該植物表達載體的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示，形成重組的植物表達載體pFGC5941-NtTubα-3WJ-4×Bro，所述重組的植物表達載體的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示，進一步轉化受體植物，向轉化受體植株的葉片滲透熒光小分子DFHBI-1T，在黑暗下處理 10h，采集受體植株的葉片置于熒光顯微鏡下觀察綠色熒光信號，即實現陽性轉化植株的報告鑒定。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，其中所述的受體植物選自擬南芥。

3.權利要求1所述的方法在植物轉基因鑒定中的應用。

4.如權利要求3所述的應用，其特征在于，所述的應用包括對轉基因植物的靶基因表達量的鑒定。

5.權利要求1所述的植物轉化報告鑒定的方法在構建植物表達載體中的應用。