[發明專利]一種即用型生物素檢測載體及其制備方法

有效

• 申請號: 202010543845.0
• 申請日: 2020-06-15
• 公開（公告）號: CN111635925B
• 公開（公告）日: 2023-08-25
• 發明（設計）人: 王舒樂;齊延林;胡云平;張恒
• 申請（專利權）人: 深圳市瑞賽生物技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02;C12N1/04;C12R1/25;C12R1/225;C12R1/445;C12R1/265;C12R1/145;C12R1/865
• 代理公司: 深圳中圳知識產權代理事務所(普通合伙) 44768
• 代理人: 廖苑濱

1.一種即用型生物素檢測載體的制備方法，其特征在于，其包括以下步驟：

（1）將生物素測試培養基與塑形填充劑混合，裝入載體容器后凍干，獲得生物素測試培養基固定層；

（2）將抗氧化阻隔液與塑形填充劑混合，裝入載體容器以覆蓋在已凍干的生物素測試培養基固定層上，凍干獲得位于生物素測試培養基固定層上的抗氧化阻隔層；

（3）將已活化的生物素測試菌種分散于凝膠保護劑中，取菌懸液黏附于載體容器中并固定化干燥，即得即用型生物素檢測載體；所述生物素測試菌種包含植物乳酸桿菌及其變異菌株；

步驟（1）（2）中，所述塑形填充劑組分包括：1~4wt%右旋糖酐5000~7500、2~6wt%聚乙二醇4000~8000及0.1~1wt%α-環狀糊精，余量為水；

步驟（2）中，所述抗氧化阻隔液組分包括：2~8wt%聚乙烯吡咯烷酮10k~40k、0.2~1wt%維生素E、1~4wt%抗壞血酸鈉及0.005~0.1wt%谷胱甘肽，余量為水。

2.根據權利要求1所述的即用型生物素檢測載體的制備方法，其特征在于，步驟（1）所述的生物素測試培養基與塑形填充劑混合體積比為（1~3）：1。

3.根據權利要求1所述的即用型生物素檢測載體的制備方法，其特征在于，步驟（2）所述的抗氧化阻隔液與塑形填充劑混合體積比為（1~3）：1。

4.根據權利要求1所述的即用型生物素檢測載體的制備方法，其特征在于，步驟（3）所述凝膠保護劑組分包括：2~6wt%甘露醇、0.05~0.2M氯化鎂、0.5~4wt%牛奶酪蛋白、0.05~0.2wt%瓜爾膠/卡拉膠/黃原膠，余量為水。

5.根據權利要求1所述的即用型生物素檢測載體的制備方法，其特征在于，步驟（3）所述已活化的生物素測試菌種是將生物素測試菌種菌粉或菌珠加入0.7~6mL生物素測試培養基中，再加入0.1~0.5ng/mL生物素標準溶液0.7~6mL進行活化獲得。

6.?根據權利要求1所述的即用型生物素檢測載體的制備方法，其特征在于，步驟（3）所述固定化干燥程序為：預凍階段為溫度控制在-60℃~-48℃，保持1~2h；一次升華干燥階段為溫度控制在-48℃~-40℃，將真空度降至0.22~0.42mbar，達到最終真空度時間為6~15h；二次升華干燥階段為溫度控制在0℃，真空度控制在0.22~0.42?mbar，達到最終溫度時間為7~14h；解析干燥階段為溫度控制在25℃，真空度控制在0.010~0.020mbar，達到最終溫度時間為?5~10h。

7.根據權利要求1所述的即用型生物素檢測載體的制備方法，其特征在于，所述載體容器為微孔板或離心管或培養試管。

8.一種即用型生物素檢測載體，其特征在于，其通過如權利要求1至7任一所述的即用型生物素檢測載體的制備方法制得。