[發明專利]一種即用型微量成分檢測試劑盒及其制備方法

有效

• 申請號: 202010542643.4
• 申請日: 2020-06-15
• 公開（公告）號: CN111705101B
• 公開（公告）日: 2021-08-24
• 發明（設計）人: 張恒;王舒樂;齊延林
• 申請（專利權）人: 深圳市瑞賽生物技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02;C12R1/25;C12R1/225;C12R1/645
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 劉春風

1.一種即用型微量成分檢測試劑盒的制備方法，該試劑盒包括即用型檢測微孔板和標準品，其特征在于，制備方法包括以下步驟：

（1）將微量成分特定測試培養基與塑形填充劑混合，裝入載體容器后凍干，獲得微量成分測試培養基固定層；

（2）將抗氧化阻隔液與塑形填充劑混合，裝入載體容器以覆蓋在已凍干的微量成分測試培養基固定層上，凍干獲得位于微量成分測試培養基固定層上的抗氧化阻隔層；

（3）將已活化的微量成分測試菌種分散于凝膠保護劑中，取菌懸液黏附于載體容器中并固定化干燥，即得即用型微量成分檢測微孔板；

（4）制備微量成分標準品；

步驟（3）所述固定化干燥為：預凍階段為溫度控制在-80℃~-48℃，保持0.5~3h；一次升華干燥階段為溫度控制在-60℃~-35℃，將真空度降至0.35~0.55mbar，達到最終真空度時間為8~12h；二次升華干燥階段為溫度控制在0℃，真空度控制在0.35~0.55 mbar，達到最終溫度時間為10~16h；解析干燥階段為溫度控制在24℃，真空度控制在0.010~0.020mbar，達到最終溫度時間為 8~12h；

其中，

微量成分為泛酸時，所述微量成分測試菌種為植物乳酸桿菌；所述塑形填充劑組分包括：2~8wt%右旋糖酐5000~7500、1~10wt%聚乙二醇4000~8000及0.5~1.5wt%α-環狀糊精，余量為水；所述抗氧化阻隔液組分包括：2~12wt%聚乙烯吡咯烷酮10k~40k、0.1~2wt%維生素E、2~4wt%抗壞血酸鈉及0.005~0.05wt%谷胱甘肽，余量為水；所述凝膠保護劑組分包括：2~6wt%甘露醇、0.1~0.8M氯化鎂、0.2~2wt%牛奶酪蛋白及0.02~0.2wt%瓜爾膠/卡拉膠/黃原膠，余量為水；或，

微量成分為煙酸和煙酰胺時，所述微量成分測試菌種為發酵乳酸桿菌；所述塑形填充劑組分包括：2~8wt%右旋糖酐5000~7500、2~8wt%聚乙二醇4000~8000及1~4wt%羥甲基纖維素，余量為水；所述抗氧化阻隔液組分包括：2~8wt%聚乙烯吡咯烷酮10k~40k、2~4wt%抗壞血酸鈉、0.01~0.06wt%維生素D及0.005~0.01wt%谷胱甘肽，余量為水；所述凝膠保護劑組分包括： 0.5~1M氯化鎂、0.2~2wt%牛奶酪蛋白、0.5~4wt%可溶性淀粉及0.02~0.2wt%瓜爾膠/卡拉膠/黃原膠，余量為水；或，

微量成分為維生素B6時，所述微量成分測試菌種為卡爾斯伯酵母菌；所述塑形填充劑組分包括： 2~10wt%聚乙二醇4000~8000、3~5wt%羥甲基纖維素及1~1.5wt%α-環狀糊精，余量為水；所述抗氧化阻隔液組分包括：2~12wt%聚乙烯吡咯烷酮10k~40k、0.1~3wt%維生素E、0.05~0.15wt%硫代硫酸鈉及0.01~0.05wt%谷胱甘肽，余量為水；所述凝膠保護劑組分包括：0.5~1M氯化鎂、2~5wt%可溶性淀粉及0.02~0.2wt%瓜爾膠/卡拉膠/黃原膠，余量為水；或，

微量成分為維生素B1時，所述微量成分測試菌種為鼠李糖乳酸桿菌；所述塑形填充劑組分包括：1~8wt%右旋糖酐5000~7500、1~8wt%聚乙二醇4000~8000及0.2~1wt%α-環狀糊精，余量為水；所述抗氧化阻隔液組分包括：1~8wt%聚乙烯吡咯烷酮10k~40k、2~4wt%抗壞血酸鈉及0.01~0.05wt%谷胱甘肽，余量為水；所述凝膠保護劑組分包括：2~6wt%甘露醇、0.5~1M氯化鎂0.02~0.2wt%瓜爾膠/卡拉膠/黃原膠，余量為水；或，

微量成分為維生素B2時，所述微量成分測試菌種為葡萄汁酵母菌；所述塑形填充劑組分包括：1~8wt%右旋糖酐5000~7500、1~8wt%聚乙二醇4000~8000及0.2~1.5wt%α-環狀糊精，余量為水；所述抗氧化阻隔液組分包括：1~8wt%聚乙烯吡咯烷酮10k~40k、2~4wt%抗壞血酸鈉及0.005~0.02wt%谷胱甘肽，余量為水；所述凝膠保護劑組分包括：2~6wt%甘露醇、0.1~0.8M氯化鎂及0.02~0.2wt%瓜爾膠/卡拉膠/黃原膠，余量為水；或，

微量成分為肌醇時，所述微量成分測試菌種為檸檬克勒克酵母菌；所述塑形填充劑組分包括：2~10wt%右旋糖酐5000~7500、2~10wt%聚乙二醇4000~8000及1~3wt%羥甲基纖維素，余量為水；所述抗氧化阻隔液組分包括：1~8wt%聚乙烯吡咯烷酮10k~40k、2~4wt%抗壞血酸鈉及0.01~0.1wt%維生素D，余量為水；所述凝膠保護劑組分包括：2~6wt%甘露醇、0.1~1M氯化鎂及0.02~0.2wt%瓜爾膠/卡拉膠/黃原膠，余量為水。