[發明專利]一種基于Trinder反應的檢測試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 202010542576.6
• 申請日: 2020-06-15
• 公開（公告）號: CN111808921A
• 公開（公告）日: 2020-10-23
• 發明（設計）人: 梁艷;趙暢;龔婷;吳年芬;凡速朋;舒芹;張雪嬌;趙愿安
• 申請（專利權）人: 武漢生之源生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/62
• 分類號: C12Q1/62;C12Q1/60;C12Q1/61;C12Q1/54;C12Q1/48;C12Q1/34;C12Q1/44;C12Q1/28;C12Q1/26;G01N21/31;G01N21/75
• 代理公司: 武漢智嘉聯合知識產權代理事務所(普通合伙) 42231
• 代理人: 易賢衛

本發明公開了一種基于Trinder反應的檢測試劑盒及其應用，屬于臨床化學檢測技術領域，由R1試劑和R2試劑組成，R1和R2試劑中包含催化待測物生成過氧化氫的酶，R1試劑中還含有緩沖液、防腐劑、過氧化物酶，R2試劑中含有緩沖液、防腐劑、過氧化物和色原底物，所述R1試劑中過氧化物酶的濃度為100～150KU/L，且R1試劑中還含有濃度為0.5～1g/L的4?氨基安替比林。其中R1試劑中的過氧化物酶和4?氨基安替比林可在Trinder反應前，去除待測物中可參與Trinder反應的臨床藥物，使得測定結果更加準確。本發明不需要在反應體系中額外加入其它物質，不會引入其它雜質；該方法簡單高效，可廣泛用于多種臨床化學檢測，避免臨床藥物的干擾，增強檢測結果的準確性，同時還提高了試劑盒的功能靈敏度。

技術領域

本發明屬于臨床化學檢測技術領域，具體涉及一種基于Trinder反應的檢測試劑盒及其應用。

背景技術

Trinder反應又稱“偶聯終點比色法”，其原理為被測物質通過酶作用產生的過氧化氫(H₂O₂)在4-氨基安替比林(4-AAP)、過氧化物酶(POD)的存在下，可生成紅色醌亞胺化合物，通過測定反應前后的吸光度差值，即可計算得到待測物的濃度。臨床生化許多檢測項目都應用了Trinder反應，如葡萄糖、甘油三脂、膽固醇、尿酸、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、游離脂肪酸等。如中國專利CN106191213B公開了一種游離脂肪酸測定試劑盒及其制備方法，其反應原理是人血清中游離脂肪酸和輔酶A在乙酰輔酶A合成酶的作用下反應生成脂酰輔酶A，脂酰輔酶A在乙酰輔酶A氧化酶的作用下生成H₂O₂，隨后通過Trinder反應在過氧化物酶(POD)的作用下生成有色物質以測定游離脂肪酸含量。

然而隨著醫學的迅猛發展，越來越多的藥物及檢驗項目運用于臨床，有研究表明，當患者服用1種藥物時，受藥物干擾的實驗所占百分比為7％，服用2種藥物時，占16.7％，服用三種或四種藥物時，百分比為66.7％，服用5種藥物時，受干擾的試驗占比達100％。藥物對檢測結果的影響，不僅導致對檢測結果的錯誤解釋、誤診，而且增加了一些不必要的檢查，所以解決檢測中的藥物干擾問題顯得尤為重要。臨床上常見藥物如：羥苯磺酸鈣(用于治療微血管疾病等)、酚磺乙胺(止血藥物)、甲基多巴(抗高血壓藥物)、左旋多巴(用于治療帕金森綜合征)、多巴胺(神經傳導物質)等，由于具有強還原性或與Trinder反應中的色原底物結構類似，因此會在Trinder反應時消耗過氧化氫，導致待測物的測量值偏低。并且這些藥物結構穩定、不易被破壞或降解，因此會對基于Trinder反應的臨床化學檢測產生干擾，影響測定結果。

發明內容

本發明針對現有技術存在的缺陷，提供了一種基于Trinder反應的檢測試劑盒，該試劑盒通過在R1試劑中提前加入過氧化物酶和4-氨基安替比林，去除待測物中參與Trinder反應的臨床藥物，從而避免了化學檢測過程中多種臨床藥物對Trinder反應檢測的干擾，將該試劑盒用于臨床化學檢測，可使得測定結果更準確、抗干擾能力更強。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案是：

一種基于Trinder反應的檢測試劑盒，由R1試劑和R2試劑組成，R1和R2試劑中包含催化待測物生成過氧化氫的酶，R1試劑中還含有緩沖液、防腐劑、過氧化物酶，R2試劑中含有緩沖液、防腐劑、過氧化物和色原底物，其中所述R1試劑中過氧化物酶的濃度為100～150KU/L，同時R1試劑中還含有濃度為0.5～1g/L的4-氨基安替比林；

所述檢測試劑盒可提高抗臨床藥物干擾的能力，所述臨床藥物包括：羥苯磺酸鈣、酚磺乙胺、甲基多巴、左旋多巴、多巴胺中的一種或多種。

本發明的技術方案還提供了一種提高Trinder反應檢測抗干擾能力的方法，包括以下步驟：