[發(fā)明專(zhuān)利]一種基于納米酶檢測(cè)葡萄糖-6-磷酸含量的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010542513.0
• 申請(qǐng)日: 2020-06-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111638212B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-07-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王光麗;孫冬雪;劉田利;顧萌萌
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 江南大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): G01N21/78
• 分類(lèi)號(hào): G01N21/78;G01N21/31
• 代理公司: 哈爾濱市陽(yáng)光惠遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211
• 代理人: 張勇

本發(fā)明公開(kāi)了一種基于納米酶檢測(cè)葡萄糖?6?磷酸含量的方法，屬于納米生物分析檢測(cè)領(lǐng)域。本發(fā)明方法通過(guò)偶聯(lián)葡萄糖?6?磷酸脫氫酶(G6PD)/對(duì)羥基苯甲酸羥化酶(PHBH)原位生成光活性納米材料模擬酶，具有多重信號(hào)放大作用，實(shí)現(xiàn)對(duì)葡萄糖?6?磷酸(G?6?P)的靈敏檢測(cè)；具體是由G6PD/PHBH酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)生成的3,4?二羥基苯甲酸(PCA)與鈦酸鍶(SrTiO₃)結(jié)合形成表面配合物而具有超強(qiáng)的模擬氧化酶活性，能夠氧化典型的顯色底物3,3',5,5'?四甲基聯(lián)苯胺(TMB)/2,2'?聯(lián)氮?雙?3?乙基苯并噻唑啉?6?磺酸(ABTS)并使之變色。本發(fā)明方法能檢測(cè)0.05–100μM范圍內(nèi)的G?6?P，檢測(cè)限低達(dá)0.022μM，具有非常優(yōu)異的應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及納米生物分析檢測(cè)領(lǐng)域，尤其涉及一種基于納米酶檢測(cè)葡萄糖-6-磷酸含量的方法。

背景技術(shù)

磷酸化碳水化合物是生化途徑中的關(guān)鍵中間體，葡萄糖的不同磷酸化與不同的生物過(guò)程有關(guān)。葡萄糖-6-磷酸(G-6-P)是糖酵解和糖原生成的中心點(diǎn)，也是戊糖磷酸途徑中的起始代謝產(chǎn)物[Nguyen A.H.；Deutsch J.M.；Xiao L.；Schultz Z.D.Anal.Chem.2018,90,11062-11069]。監(jiān)測(cè)血液或人體組織中的G-6-P濃度特別重要，因?yàn)樗梢灾苯臃从撑c許多分解代謝途徑相關(guān)的酶的相對(duì)活性，如磷酸葡萄糖苷酶，己糖激酶，和磷酸葡萄糖異構(gòu)酶等[Banerjee S.；Sarkar P.；Turner A.Anal.Biochem.2013,439,194–200]。此外，G-6-P水平的監(jiān)測(cè)已被用于深入了解人紅細(xì)胞[Kirkman H.N.；Gaetani G.F.J.Biol.Chem.1986,261,4033–4038.]和大鼠肝細(xì)胞中葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PDH)的調(diào)節(jié)[Sapag-Hagar M.；Lagunas R.；Sols A.Biochem.Biophys.Res.Commun.1973,50,179–185]。現(xiàn)已報(bào)道了幾種基于放射法，色譜法和光譜技術(shù)測(cè)定G-6-P濃度的方法[Kirkman H.N.；GaetaniG.F.J.Biol.Chem.1986,261,4033–4038；Sapag-Hagar M.；Lagunas R.；Sols A.Biochem.Biophys.Res.Commun.1973,50,179–185],但這些方法比較耗時(shí)，工作量大且需要昂貴的儀器試劑。