[發明專利]用于五種幼兒手足口病系列病毒檢測的試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 202010541964.2
• 申請日: 2020-06-15
• 公開（公告）號: CN111748648A
• 公開（公告）日: 2020-10-09
• 發明（設計）人: 吳詩品;金寧一;李體遠;李昌;杜壽文;田明堯;任琴;張星艷;王宇航
• 申請（專利權）人: 深圳市人民醫院;軍事科學院軍事醫學研究院軍事獸醫研究所
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 北京一枝筆知識產權代理事務所(普通合伙) 11791
• 代理人: 張慶瑞

本發明涉及生物檢測領域，具體涉及一種用于建立同時檢測五種幼兒手足口病系列病毒，如柯薩奇病毒A6/A10/A16(CA6/CA10/CA16)、腸道病毒71型(EV 71)和腸道病毒通用型(EVU)的極速檢測試劑盒及其應用。本發明具備很高的靈敏度和特異性，其建立的方法與其他熒光定量PCR相比，可在半小時內獲得結果，可達到臨床快速檢測，有望實現真正的POCT，具有很好的應用前景。

技術領域

本發明涉及生物檢測領域，特別涉及用于五種幼兒手足口病系列病毒檢測的試劑盒及其應用。

背景技術

手足口病(hand-foot-mouth disease)是以手、足、口出現水皰為特征，病情輕而短暫，兒童多見，主要由腸道病毒感染引起。潛伏期3～5天，有低熱、全身不適、腹痛等前驅癥。1～2天內口腔、咽、軟腭、頰黏膜、舌、齒齦出現疼痛性粟粒至綠豆大小水皰，周圍繞以紅暈，破潰成小潰瘍，由于疼痛，常流涎和拒食。同時手足亦出現皮疹，在手足的背側面和手指(趾)背側緣、甲周圍、掌跖部，出現數目不定的水皰，除手足口外，亦可見于臀部及肛門附近，偶可見于軀干及四肢，數天后干涸、消退，皮疹無瘙癢，無疼痛感。個別兒童可出現泛發性丘疹、水皰，伴發無菌性腦膜炎、腦炎、心肌炎等。一般經過良好，全病程約5～10天，多數可自愈，預后良好。

腸道病毒包括脊髓灰質炎病毒、柯薩奇病毒(Coxsackie virus)、致腸細胞病變人孤兒病毒(enterocytopathic human orphan virus，ECHO，簡稱埃可病毒)及新型腸道病毒共71個血清型。臨床表現輕者只有倦怠、乏力、低熱等，重者可全身感染，腦、脊髓、心、肝等重要器官受損，預后較差，并可遺留后遺癥或造成死亡。本類疾病分布于世界各地，在熱帶和亞熱帶全年都有，在溫帶夏季多見，在溫暖、潮濕、衛生條件差及人群擁擠的地區發病率高。成人和兒童均可發病，多見于兒童。有些病毒的感染常發生流行，不同年份的流行可由不同種、型的病毒引起。有些病毒感染的流行有周期性。腸道病毒顆粒小，呈20面體，直徑24～30nm，不含類脂體，核心有單鏈核糖核酸，耐乙醚和其它脂溶劑，耐酸，對各種抗生素、抗病毒藥及去污劑有抵抗作用。多數病毒在細胞培養中產生細胞病變。腸道病毒通常寄生于腸道﹐僅于少數情況下進入血流或神經組織。正常的病毒攜帶者不多見，隱性感染甚為普遍，人受染后出現臨床癥狀的也是少數。人是人腸道病毒的唯一自然寄主，病毒通過人與人之間的密切接觸(通過手指、餐具和食物)傳播擴散。感染者的咽部和腸中有病毒存在，從糞中排病毒的時間較長，可持續幾周。糞-口是主要的傳播途徑，也可以通過飛沫傳播。病毒在污水中存活的時間甚長。人食入病毒后，經過7～14天，存在于咽部和腸道淋巴樣組織的病毒經血流進入單核吞噬細胞中增殖，最后達到靶器官(如脊髓、腦、腦膜、心、肝、皮膚等)，在不同的器官中引起相應的臨床癥狀。