[發(fā)明專利]一種工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)輔酶Q10的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202010539816.7
• 申請日: 2020-06-15
• 公開（公告）號: CN111763636A
• 公開（公告）日: 2020-10-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 韓祎君;巴國政;張玉東;弓吉龍;劉艷新;王瑞霞
• 申請（專利權(quán)）人: 神舟生物科技有限責(zé)任公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P7/66;C12R1/01
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)輔酶Q10的方法，其特征在于，

采用菌種為類球紅細菌( Rhodobacter sphaeroides )，已于2018年10月24日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏中心登記入冊編號為CGMCCNo.16625；

所述方法包括如下步驟：

S1：菌種的平板培養(yǎng)：將菌種接種于平板，放入溫度32.0±0.5℃、濕度35%-45%的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5-7天；

S2：菌種的斜面培養(yǎng)；從S1中選擇培養(yǎng)成熟的菌種，放入溫度32.0±0.5℃、濕度35%-45%的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)周期為5-7天；

S3：20 L種子培養(yǎng)；從S2中選擇斜面培養(yǎng)成熟的菌種，放入滅菌后的20 L種子罐中，培養(yǎng)條件為0-12 h轉(zhuǎn)速控制60~80 rpm，13 h后轉(zhuǎn)速為160~200 rpm，空氣流量為0.6±0.2m³/h，溫度32.0±1℃，培養(yǎng)22~30 h；

S4：一級種子罐培養(yǎng)：待S3中種子液培養(yǎng)成熟后利用壓差法按接種量0.1～0.5％接入一級種子罐中，一級種子罐培養(yǎng)條件為罐壓0.03～0.05 MPa，通氣量100±20 m³/h，罐溫為32～34℃，轉(zhuǎn)速 180～200 rpm，培養(yǎng)周期24～32 h；

S5：二級種子培養(yǎng)：將S4中培養(yǎng)成熟的一級種子液利用壓差法按接種量8～20％接入二級種子罐中，二級種子罐培養(yǎng)條件為罐壓0.03～0.05 MPa，通氣量400±200 m³/h，罐溫為32～34℃，轉(zhuǎn)速120～160 rpm，培養(yǎng)周期18～26 h；

S6：三級發(fā)酵培養(yǎng)：將S5中培養(yǎng)成熟的二級種子液利用壓差法按接種量20～30％接入三級發(fā)酵罐中，三級發(fā)酵罐培養(yǎng)條件為罐壓0.03～0.05 MPa，發(fā)酵前40 h通氣量控制800±200 m³/h，40 h后至結(jié)束通氣量控制1000±200 m³/h，轉(zhuǎn)速控制80～100 rpm，罐溫為32～34℃，發(fā)酵過程需要進行3次補料；

S7：倒種再培養(yǎng)發(fā)酵：選取S6中培養(yǎng)至50~65 h符合純種培養(yǎng)標準的1批或1批以上給出罐發(fā)酵液，將其轉(zhuǎn)入同一個滅菌完成的接收罐中繼續(xù)培養(yǎng)，接收罐的罐壓0.03～0.05 MPa，發(fā)酵前40 h通氣量控制800±200 m³/h，40 h后至結(jié)束通氣量控制1000±200 m³/h，轉(zhuǎn)速控制80～100 rpm，罐溫為32～34℃，發(fā)酵過程需要進行3次補料。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)輔酶Q10的方法，其特征在于：所述S1平板培養(yǎng)和S2斜面培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基配方為：酵母粉1.0-10.0 g/L，磷酸二氫鉀0.1-2.5 g/L，硫酸鎂1.0-5.0 g/L，硫酸亞鐵0.1-1.0 g/L，氯化鈉0-5.0 g/L，硫酸銨1.5-3.5 g/L，谷氨酸鈉0.5-3.0g/L，玉米漿干粉0.5-3.0 g/L，葡萄糖5-20 g/L，瓊脂15-20 g/L，pH=6.5-7.3。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)輔酶Q10的方法，其特征在于：所述S3中20 L種子培養(yǎng)的培養(yǎng)罐培養(yǎng)基配方為：葡萄糖30-60 g/L，硫酸銨10-30 g/L，玉米漿干粉5-10 g/L，谷氨酸鈉1-10 g/L，一水硫酸鎂0.1-0.5 g/L，酵母浸粉5-20 g/L，工業(yè)鹽15-30 g/L，磷酸氫二鉀5-10 g/L，磷酸二氫鉀5-10 g/L，七水硫酸鎂10-30 g/L，七水硫酸亞鐵1-10 g/L，pH=6.5-7.3。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)輔酶Q10的方法，其特征在于：所述S4中一級種子罐培養(yǎng)基配方為：葡萄糖0.1-0.4%，硫酸銨0.2-0.5%，磷酸氫二鉀0.03-0.06%，磷酸二氫鉀0.03-0.06%，七水硫酸鎂0.1-0.3%，七水硫酸亞鐵0.01-0.03%，工業(yè)鹽0.1-0.4%，碳酸鈣0.5-1.0%，消泡劑0.01-0.05%，玉米漿干粉0.03-0.08%，谷氨酸鈉0.03-0.08%，一水硫酸鎂0.001-0.005%，六水氯化鈷0.0001-0.0005%，酵母浸粉0.1-0.5%，pH=6.5-7.3。