[發(fā)明專利]一種番茄抗病毒突變體的篩選方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202010539688.6 | 申請(qǐng)日: | 2020-06-15 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN111642395A | 公開(kāi)(公告)日: | 2020-09-11 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 陶則滿;李建科;劉艷軍;許丁帆;范麗娜;鮮睿;于祎晗;徐玖 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 天津農(nóng)學(xué)院 |
| 主分類號(hào): | A01H4/00 | 分類號(hào): | A01H4/00;A01H1/04 |
| 代理公司: | 天津盛理知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 12209 | 代理人: | 韓曉梅 |
| 地址: | 300384 *** | 國(guó)省代碼: | 天津;12 |
| 權(quán)利要求書(shū): | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū): | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 番茄 抗病毒 突變體 篩選 方法 | ||
本發(fā)明涉及一種番茄抗病毒突變體的篩選方法,步驟如下:⑴番茄帶病毒無(wú)菌苗的獲取;⑵番茄愈傷組織的誘導(dǎo);⑶將番茄愈傷組織分割成小塊,轉(zhuǎn)接到再生培養(yǎng)基中,再添加一定的滲透壓逆境,培養(yǎng)條件為24h光照,光照強(qiáng)度2000Lx,培養(yǎng)溫度23±1℃,并通過(guò)再生芽生長(zhǎng)狀況,初步篩選抗病毒再生芽,再經(jīng)病毒檢測(cè),即得番茄抗病毒突變體。本發(fā)明方法通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù),在離體條件下,通過(guò)逆境篩選,使得組織中某些抗病毒細(xì)胞的競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì),篩選出番茄抗病毒突變細(xì)胞系,再經(jīng)過(guò)離體再生技術(shù)獲得抗病毒植物,從而為番茄抗病毒育種提供良好的抗性種質(zhì)資源。同時(shí),也可為其他植物抗病毒育種提供一定的參考。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于植物生物技術(shù)領(lǐng)域,尤其是一種番茄抗病毒突變體的篩選方法。
背景技術(shù)
植物病毒是造成多種農(nóng)作物減產(chǎn)和品質(zhì)下降的重要病原之一,嚴(yán)重時(shí)甚至造成絕產(chǎn),給農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)帶來(lái)巨大損失,被稱為植物的“癌癥”。由于病毒種類繁多,傳播途徑廣泛,又是胞內(nèi)寄生,植物病毒病的防治非常困難。一般化學(xué)藥物很難破壞病毒結(jié)構(gòu),目前尚未發(fā)現(xiàn)某一種農(nóng)藥能夠一次根治植物病毒病。
目前,常規(guī)的抗病毒育種工作量大、育種周期長(zhǎng)、缺乏抗病毒種質(zhì)資源,不易獲得穩(wěn)定遺傳的抗性基因,且存在遠(yuǎn)緣雜交不親和等問(wèn)題。
在番茄的基因庫(kù)中很難找到相應(yīng)的抗病毒種質(zhì)資源,因此,不能通過(guò)雜交育種方法進(jìn)行抗病毒品種培育,雖然目前一些研究通過(guò)轉(zhuǎn)基因的手段可以解決某些植物病的問(wèn)題,但由于試驗(yàn)方法的局限,不能獲得具備普遍性的抗病毒效果。同時(shí)轉(zhuǎn)基因植物品種在釋放應(yīng)用上還存在一定的問(wèn)題,因此這一技術(shù)也沒(méi)有廣泛應(yīng)用。
植物組織脫毒培養(yǎng)雖可獲得番茄脫毒苗,是目前脫除植物體內(nèi)病毒的一種有效手段,但脫毒不等于抗病毒。番茄脫毒苗不具有抗病毒能力,且植物組織脫毒培養(yǎng)費(fèi)工費(fèi)時(shí),每次繁殖時(shí)都要重新進(jìn)行脫毒培養(yǎng),且在露地栽培過(guò)程中,會(huì)發(fā)生再次病毒感染現(xiàn)象,因此其在應(yīng)用上也存在較大的局限性。
通過(guò)檢索,尚未發(fā)現(xiàn)與本發(fā)明專利申請(qǐng)相關(guān)的專利公開(kāi)文獻(xiàn)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足之處,提供一種番茄抗病毒突變體的篩選方法。
本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是:
一種番茄抗病毒突變體的篩選方法,步驟如下:
⑴番茄帶病毒無(wú)菌苗的獲取
選取帶卷葉病毒番茄盆栽苗,剪取健壯的莖段,剪去葉片及葉柄,在超凈環(huán)境中剪成帶一個(gè)腋芽的莖段,70%乙醇浸泡30s,然后用含2.0%有效氯的次氯酸鈉溶液消毒5min,無(wú)菌水沖洗5次,每次5min,沖洗后用無(wú)菌濾紙吸干外植體表面,并將莖段兩端各剪去3mm,接種到MS培養(yǎng)基上進(jìn)行腋芽萌發(fā)培養(yǎng),培養(yǎng)條件為連續(xù)光照,光照強(qiáng)度2000Lx,培養(yǎng)溫度25±1℃;
經(jīng)過(guò)20d初代培養(yǎng),將萌發(fā)的腋芽從基部剪切,接種到MS培養(yǎng)基上進(jìn)行繼代增殖培養(yǎng),獲得番茄組培苗,備用;
⑵番茄愈傷組織的誘導(dǎo)
取步驟⑴獲得的番茄組培苗,剪取葉柄,接種到含愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo);
愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為:MS+1.0~2.0mg·L-16-芐氨基腺嘌呤/6-糠氨基嘌呤/玉米素+1.5~2.0mg·L-12,4-D+30.0g·L-1蔗糖,培養(yǎng)基pH為5.8,7g·L-1瓊脂粉固化;
培養(yǎng)條件為:24h光照,光照強(qiáng)度為1000Lx,培養(yǎng)溫度為25±1℃;
⑶抗病毒再生芽的逆境篩選
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息,商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于天津農(nóng)學(xué)院,未經(jīng)天津農(nóng)學(xué)院許可,擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購(gòu)買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作,請(qǐng)聯(lián)系【客服】
本文鏈接:http://www.szxzyx.cn/pat/books/202010539688.6/2.html,轉(zhuǎn)載請(qǐng)聲明來(lái)源鉆瓜專利網(wǎng)。
- 人生長(zhǎng)激素糖基化突變體的制備方法和組合物
- 具有改進(jìn)的轉(zhuǎn)化效率的細(xì)菌突變體
- 全基因組范圍的植物基因功能鑒定的方法
- 一種萊茵衣藻重金屬鎘吸附突變體的篩選方法
- 熱穩(wěn)定膽固醇酯酶突變體OPE-A<base:Sup>355
- 熱穩(wěn)定膽固醇酯酶突變體OPE-S<base:Sup>109
- 針對(duì)流感的免疫原性組合物
- 一種香蕉枯萎菌4號(hào)生理小種DCL基因缺失突變體及其小RNA
- 糖基轉(zhuǎn)移酶突變體以及在合成β-D-葡萄糖甙中的應(yīng)用
- 熱穩(wěn)定性提高的DNA聚合酶突變體及其構(gòu)建方法和應(yīng)用





