[發明專利]一株球紅冬孢酵母ZDFY1801及其應用

有效

• 申請號: 202010535974.5
• 申請日: 2020-06-12
• 公開（公告）號: CN111690546B
• 公開（公告）日: 2022-04-01
• 發明（設計）人: 羅鵬;楊艷君;劉勇斌;陳如欣;徐芃陽;云龍;莫壘先
• 申請（專利權）人: 中山大學附屬中學
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;A01N63/32;A01P1/00;C02F3/34;A23K10/18;A23K50/80;C12R1/645;C02F103/20;C02F101/16
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 陳潔娣;劉明星

本發明公開了一株球紅冬孢酵母ZDFY1801及其應用。該菌株的保藏編號為GDMCC No:60679。該菌株經18S rDNA基因鑒定為球紅冬孢酵母(Rhodosporidium sphaercarpum)，菌株ZDFY1801具有高效去除模擬養殖水體中氨氮的能力，對養殖水體中有機懸浮顆粒也具有絮凝澄清的作用。菌株ZDFY1801還可以顯著抑制養殖水體的弧菌，菌株ZDFY1801具有高度的生物安全性，此外還具有豐富的營養。這些特征表明球紅冬孢酵母ZDFY1801可以用于水產養殖中廢水的處理同時也可以用作水產養殖動物的餌料或者作為飼料添加劑使用。

技術領域

本發明涉及微生物應用技術領域，具體涉及一株球紅冬孢酵母ZDFY1801及其應用。

背景技術

在水產養殖中通常通過大量換水排放養殖廢物來解決氨氮超標和病原菌大量滋生問題。隨著生態文明建設的發展和社會各界環保意識的日益提高，以大量換水將養殖廢物排放到自然環境中的方式難以為繼，利用水產益生菌改良養殖水體逐漸得到了廣大養殖工作者的認可。然而，目前市面上廣泛使用的降氨氮水質益生菌以硝化細菌、亞硝化細菌等自養硝化微生物為主，該氨氮代謝過程是先通過亞硝化細菌將氨氧化為亞硝酸鹽，再由硝化細菌把亞硝酸進一步氧化為硝酸鹽。由于自養硝化細菌利用氧化過程供能且能源利用率低，因而菌株生長代謝速度緩慢，難以在養殖水體中形成優勢菌種，因此，在實際水產養殖中利用自養硝化細菌調控高氨氮和快速產生氨氮的養殖水體中效果極其有限。

海洋紅酵母是一類營腐生的異養真菌，作為自然環境中的分解者，能利用自然界中的有機物轉化為酵母生物量，具有較強的抗逆性，且代謝效率高，能在中等及富營養的環境中迅速形成優勢菌種，極易培養和發酵。海洋紅酵母主要應用于水產餌料以及生產類胡蘿卜素，但是未見海洋紅酵母其它用途的報道。

發明內容

本發明的目的在于提供一株具有多種功效的球紅冬孢酵母(Rhodosporidiumsphaercarpum)YLY01(ZDFY1801)(即球紅冬孢酵母YLY01，又名球紅冬孢酵母ZDFY1801)。

球紅冬孢酵母ZDFY1801分離自海水對蝦養殖水體及底泥混合樣，通過在富集培養基(YPD)中加入葡萄糖做碳源，酵母提取物和蛋白胨作為氮源和生長因子，同時加入卡那霉素(Kn)和四環素(Tc)作為細菌抑制劑富集和分離獲得。分離獲得的不同酵母株，以IMAR培養基進行降氨氮能力的初步篩選，從具有不同降氨氮能力的候選菌株中挑選出一株對氨氮降解能力最強的菌株，即為酵母ZDFY1801(又名酵母YLY01)。IMAR培養基配方：硫酸銨0.5-1.0g、葡萄糖4-8g、蔗糖4-8g、酵母提取物0.2-0.5g、NaH₂PO₄ 0.2-0.6g、海水1L，調pH至7.0，高壓蒸汽滅菌。若制固體培養基，加入1.5wt％瓊脂粉。

酵母ZDFY1801經18S rDNA擴增、測序、種系發生分析，確定為球紅冬孢酵母(Rhodosporidium sphaercarpum)，將其命名為：球紅冬孢酵母(Rhodosporidiumsphaercarpum)YLY01(ZDFY1801)，記為球紅冬孢酵母YLY01，又名球紅冬孢酵母ZDFY1801。經試驗證明，球紅冬孢酵母ZDFY1801在48小時內，對模擬養殖水體中的氨氮去除率達到86.7％；所述的球紅冬孢酵母ZDFY1801將氨氮以異養氮同化的方式去除，無亞硝酸鹽積累。球紅冬孢酵母ZDFY1801具有明顯的絮凝澄清水質的作用，并且在添加少量碳源的情況下，球紅冬孢酵母ZDFY1801可競爭性地顯著抑制養殖水體的弧菌增殖。以凡納濱對蝦為受試對象，顯示球紅冬孢酵母ZDFY1801具有高度的生物安全性。生化組成分析顯示，球紅冬孢酵母ZDFY1801具有豐富的營養成分。這些特征充分表明，球紅冬孢酵母ZDFY1801可應用于水體脫除氨氮，特別是可應用于水產養殖水體脫除氨氮。球紅冬孢酵母ZDFY1801可應用于絮凝澄清水體，特別是可應用于絮凝澄清水產養殖水體。球紅冬孢酵母ZDFY1801可應用于水產養殖細菌病害控制，特別是控制弧菌的生長。球紅冬孢酵母ZDFY1801可應用于制備水產養殖餌料或飼料劑。