[發明專利]葡萄糖6磷酸異構酶試劑盒的新用途

在審

• 申請號: 202010535546.2
• 申請日: 2020-06-12
• 公開（公告）號: CN111562374A
• 公開（公告）日: 2020-08-21
• 發明（設計）人: 朱梅珍;劉穎冰
• 申請（專利權）人: 上海怡玨生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/573
• 分類號: G01N33/573;G01N33/574;G01N33/58;G01N33/577
• 代理公司: 上海驍象知識產權代理有限公司 31315
• 代理人: 林煒

本發明屬于生物工程領域，提供了葡萄糖6磷酸異構酶抗體在制備檢測外周血清、全血和末梢血用于診斷心或腦血栓、心或腦梗、腦溢血、心或腦栓塞、腫瘤標志物、細菌感染或者病毒感染的試劑盒的新用途。本發明在GPI（G6PI）有單克隆抗體，GPI單克隆抗體和多克隆抗體包被膠體金結合多克隆抗體作用膠體金，可提高試劑盒的靈敏度，也可和多克隆抗體聯合使用，應用在免疫比濁法（免疫透射比濁法、免疫散射比濁法、免疫膠乳比濁法）、ELISA法、化學發光法、微流控芯片法、膠體金滲濾法及層析法，在同時擴展到GPI抗原?抗體（包含有單克隆抗體和多克隆抗體）結合反應的方法，可應用于心或腦血栓心或腦梗腦溢血心或腦栓塞、細菌感染或者病毒感染和腫瘤標志物的診斷。

技術領域

本發明生物工程領域，尤其涉及試劑盒，特別是采用葡萄糖6磷酸異構酶(GPI)試劑盒用于檢測外周血清、全血和末梢血診斷心或腦血栓、心或腦梗、腦溢血、心或腦栓塞、細菌感染、病毒感染、腫瘤標志物：甲狀腺癌、肝癌、胃癌、子宮癌、宮頸癌、肺癌、乳腺癌、食道癌、鼻咽癌、前列腺癌、結·直腸癌、腎癌、胰腺癌、膀胱癌的早期診斷。

背景技術

葡萄糖-6-磷酸異構酶(G6PI)是一種多功能的胞質酶，存在于細胞質和細胞外液中，尤其是關節腔內。其主要功能是催化D-葡萄糖-6-磷酸鹽和D-果糖-6-磷酸鹽之間的互換，是糖酵解和糖異生的重要的酶類，除了具有酶活性還有細胞和生長因子的活性。G6PI抗原是類風濕性關節炎(RA)的一種自身抗原，存在于64％的患者中。一般使用抗體夾心酶聯免疫吸附法檢測血清和關節液中的葡萄糖-6-磷酸異構酶。

葡萄糖6磷酸異構酶(GPI)試劑盒原來是用于診斷外周血關節腔炎液和類風濕關節炎，在篩選上百種抗體中偶然發現在心或腦血栓、心或腦梗、腦溢血、心或腦栓塞診斷有關聯，還與革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌、病毒感染指標和甲狀腺癌、肝癌、胃癌、子宮癌、宮頸癌、肺癌、乳腺癌、食道癌、鼻咽癌、前列腺癌、結·直腸癌、腎癌、胰腺癌、膀胱癌的診斷指標有關聯。

發明內容

本發明的目的在于提供葡萄糖6磷酸異構酶在制備用于檢測外周血清、全血和末梢血診斷心或腦血栓、心或腦梗、腦溢血、心或腦栓塞、細菌感染或者病毒感染的試劑盒的用途，所述的這種用途要解決現有技術中檢測心或腦血栓、心或腦梗、腦溢血、心或腦栓塞、細菌感染、甲狀腺癌、肝癌、胃癌、子宮癌、宮頸癌、肺癌、乳腺癌、食道癌、鼻咽癌、前列腺癌、結腸癌、直腸癌、腎癌、胰腺癌、膀胱癌的早期診斷或者病毒感染的手段有限、而且時間長的技術問題。要細菌感染至少3天，心或腦血栓、心或腦梗、腦溢血、心或腦栓塞、細菌感染還沒有快速的診斷方法，本發明可以快速診斷，只要2-4分鐘，即可出結果。

本發明提供了葡萄糖6磷酸異構酶在制備用于檢測外周血清、全血和末梢血診斷心或腦血栓、心或腦梗、腦溢血、心或腦栓塞、細菌感染或者病毒感染，也可用于甲狀腺癌、肝癌、胃癌、子宮癌、宮頸癌、肺癌、乳腺癌、食道癌、鼻咽癌、前列腺癌、結·直腸癌、腎癌、胰腺癌、膀胱癌的早期篩查的試劑盒的新用途。

進一步的，所述的試劑盒包括檢測板、兔抗GPI抗體、由膠體金標記的羊抗GPI抗體結合物、封閉液、洗滌液、陽性參考品和陰性參考品，所述的檢測板由一個塑料盒底盒組成，所述的塑料盒底盒中設置有一層吸水層，所述的吸水層上設置有一層硝酸纖維素膜，所述的硝酸纖維素膜上設置有一個塑料盒面蓋，所述的塑料盒面蓋中央設置有一個檢測反應孔，在檢測反應孔對應的硝酸纖維素膜上點加兔抗GPI抗體和膠體金標記的羊抗GPI抗體結合物，所述的封閉液是含有牛血清白蛋白的磷酸鹽溶液，磷酸鹽溶液的pH7.0～7.5之間，牛血清白蛋白在磷酸鹽溶液中的重量百分比為1.0％，所述的洗滌液是含有Tween-20的Tris-HCl溶液，Tris-HCl溶液的pH在7.0～7.5之間，Tween-20在Tris-HCl溶液中的重量百分比為0.05％，在每毫升膠體金結合物中，羊抗GPI抗體的質量為0.025毫克，所述的陽性參考品為濃度大于0.2mg/L的GPI抗原，所述的陰性參考品為濃度小于0.2mg/L的GPI抗原。