[發明專利]一種紅蔥的組培快繁方法

在審

• 申請號: 202010530671.4
• 申請日: 2020-06-11
• 公開（公告）號: CN111492981A
• 公開（公告）日: 2020-08-07
• 發明（設計）人: 姚慧靜;梁瑞萍;高振江;張仙保;李秀華;潘子旺;張冬梅;袁鶴;高娃;巴圖;王亮明
• 申請（專利權）人: 包頭市農牧業科學研究院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 西安匯恩知識產權代理事務所(普通合伙) 61244
• 代理人: 張偉花

1.一種紅蔥的組培快繁方法，其特征在于，該方法為：

S1、外植體的取材與消毒：4月下旬挖取紅蔥的完整植株，切去全部根毛和植株形態學上端全部蔥葉，剝去假莖外部幾層葉片，用清水沖洗30min以上，得到外植體初始材料；

S2、莖尖剝離與初代培養：在超凈工作臺中將S1中得到的外植體初始材料用體積分數為75％的乙醇溶液消毒，再用質量分數為0.1％的升汞溶液進行消毒，用無菌水沖洗后，置于實體解剖鏡下剝去外層葉片，當看到一個閃亮半球形組織時，自半球形組織的下端0.5mm處切取帶有2～3個葉原基的莖尖分生組織置于初代培養基中封口后培養20d～25d，得到轉綠變大的芽點；所述初代培養基由6-BA、NAA、卡拉膠和蔗糖加入至MS培養基并調節pH至5.8而制成，其中初代培養基中6-BA的質量濃度為0.2mg/L，NAA的質量濃度為0.1mg/L，卡拉膠的質量濃度為5g/L，蔗糖的質量濃度為30g/L；

S3、叢生芽誘導和增殖培養:在超凈工作臺中將S1中得到的轉綠變大的芽點置于叢生芽誘導培養基中培養至叢生芽長至約2cm～3cm時，以2個～3個叢生芽為一叢進行分割，轉接到增殖培養基中封口后培養20d～25d，得到幼苗；所述叢生芽誘導培養基由6-BA、NAA、卡拉膠和蔗糖加入至MS培養基并調節pH至5.8而制成，其中叢生芽誘導培養基的6-BA的質量濃度為1mg/L、NAA的質量濃度為0.2mg/L，卡拉膠的質量濃度為5g/L，蔗糖的質量濃度為30g/L；所述增殖培養基由6-BA、NAA、卡拉膠和蔗糖加入至MS培養基并調節pH至5.8而制成，其中增殖培養基的6-BA的質量濃度為0.5mg/L、NAA的質量濃度為0.1mg/L、卡拉膠的質量濃度為5g/L，蔗糖的質量濃度為30g/L；

S4、壯苗與生根：在超凈工作臺中將S3中得到的幼苗轉入生根培養基中封口后生根和壯苗培養20d～25d，得到生根苗；所述生根培養基由NAA、卡拉膠和蔗糖加入至1/2MS培養基并調節pH至5.8而制成，其中生根培養基的質量濃度為NAA 0.1mg/L，卡拉膠的質量濃度為5g/L，蔗糖的質量濃度為15g/L；

S5、馴化移栽：去掉封口膜，將S4中得到的叢生苗在散射光下放置2d后，用清水沖洗后，移栽于育苗缽中，培養得到紅蔥；

S2和S3中每升所述MS培養基中含有以下原料：NH₄NO₃ 1650mg/L、KNO₃ 1900mg/L、CaCl₂·2H₂O 440mg/L、MgSO₄·7H₂O 370mg/L、KH₂PO₄170mg/L、KI 0.83mg/L、H₃BO₃ 6.2mg/L、MnSO₄·4H₂O 22.3mg/L、ZnSO₄·7H₂O 8.6mg/L、Na₂·MoO₄·2H₂O 0.25mg/L、CuSO₄·5H₂O0.025mg/L、CoCl₂·6H₂O 0.025mg/L、FeSO₄·7H₂O 27.8mg/L、Na₂·EDTA·2H₂O 37.3mg/L、肌醇100mg/L、煙酸0.5mg/L、鹽酸吡哆醇0.5mg/L、鹽酸硫胺素0.1mg/L和甘氨酸2mg/L；

S4中每升所述1/2MS培養基中含有以下原料：NH₄NO₃ 825mg/L、KNO₃ 950mg/L、CaCl₂·2H₂O 220mg/L、MgSO₄·7H₂O 185mg/L、KH₂PO₄85mg/L、KI 0.83mg/L、H₃BO₃ 6.2mg/L、MnSO₄·4H₂O 22.3mg/L、ZnSO₄·7H₂O 8.6mg/L、Na₂·MoO₄·2H₂O0.25mg/L、CuSO₄·5H₂O 0.025mg/L、CoCl₂·6H₂O 0.025mg/L、FeSO₄·7H₂O 27.8mg/L、Na₂·EDTA·2H₂O 37.3mg/L、肌醇100mg/L、煙酸0.5mg/L、鹽酸吡哆醇0.5mg/L、鹽酸硫胺素0.1mg/L和甘氨酸2mg/L。