[發(fā)明專利]一種紅蔥的組培快繁方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010530671.4
• 申請(qǐng)日: 2020-06-11
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111492981A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-08-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 姚慧靜;梁瑞萍;高振江;張仙保;李秀華;潘子旺;張冬梅;袁鶴;高娃;巴圖;王亮明
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 包頭市農(nóng)牧業(yè)科學(xué)研究院
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 西安匯恩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 61244
• 代理人: 張偉花

1.一種紅蔥的組培快繁方法，其特征在于，該方法為：

S1、外植體的取材與消毒：4月下旬挖取紅蔥的完整植株，切去全部根毛和植株形態(tài)學(xué)上端全部蔥葉，剝?nèi)ゼ偾o外部幾層葉片，用清水沖洗30min以上，得到外植體初始材料；

S2、莖尖剝離與初代培養(yǎng)：在超凈工作臺(tái)中將S1中得到的外植體初始材料用體積分?jǐn)?shù)為75％的乙醇溶液消毒，再用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1％的升汞溶液進(jìn)行消毒，用無(wú)菌水沖洗后，置于實(shí)體解剖鏡下剝?nèi)ネ鈱尤~片，當(dāng)看到一個(gè)閃亮半球形組織時(shí)，自半球形組織的下端0.5mm處切取帶有2～3個(gè)葉原基的莖尖分生組織置于初代培養(yǎng)基中封口后培養(yǎng)20d～25d，得到轉(zhuǎn)綠變大的芽點(diǎn)；所述初代培養(yǎng)基由6-BA、NAA、卡拉膠和蔗糖加入至MS培養(yǎng)基并調(diào)節(jié)pH至5.8而制成，其中初代培養(yǎng)基中6-BA的質(zhì)量濃度為0.2mg/L，NAA的質(zhì)量濃度為0.1mg/L，卡拉膠的質(zhì)量濃度為5g/L，蔗糖的質(zhì)量濃度為30g/L；

S3、叢生芽誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng):在超凈工作臺(tái)中將S1中得到的轉(zhuǎn)綠變大的芽點(diǎn)置于叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)至叢生芽長(zhǎng)至約2cm～3cm時(shí)，以2個(gè)～3個(gè)叢生芽為一叢進(jìn)行分割，轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中封口后培養(yǎng)20d～25d，得到幼苗；所述叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基由6-BA、NAA、卡拉膠和蔗糖加入至MS培養(yǎng)基并調(diào)節(jié)pH至5.8而制成，其中叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的6-BA的質(zhì)量濃度為1mg/L、NAA的質(zhì)量濃度為0.2mg/L，卡拉膠的質(zhì)量濃度為5g/L，蔗糖的質(zhì)量濃度為30g/L；所述增殖培養(yǎng)基由6-BA、NAA、卡拉膠和蔗糖加入至MS培養(yǎng)基并調(diào)節(jié)pH至5.8而制成，其中增殖培養(yǎng)基的6-BA的質(zhì)量濃度為0.5mg/L、NAA的質(zhì)量濃度為0.1mg/L、卡拉膠的質(zhì)量濃度為5g/L，蔗糖的質(zhì)量濃度為30g/L；

S4、壯苗與生根：在超凈工作臺(tái)中將S3中得到的幼苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中封口后生根和壯苗培養(yǎng)20d～25d，得到生根苗；所述生根培養(yǎng)基由NAA、卡拉膠和蔗糖加入至1/2MS培養(yǎng)基并調(diào)節(jié)pH至5.8而制成，其中生根培養(yǎng)基的質(zhì)量濃度為NAA 0.1mg/L，卡拉膠的質(zhì)量濃度為5g/L，蔗糖的質(zhì)量濃度為15g/L；

S5、馴化移栽：去掉封口膜，將S4中得到的叢生苗在散射光下放置2d后，用清水沖洗后，移栽于育苗缽中，培養(yǎng)得到紅蔥；

S2和S3中每升所述MS培養(yǎng)基中含有以下原料：NH₄NO₃ 1650mg/L、KNO₃ 1900mg/L、CaCl₂·2H₂O 440mg/L、MgSO₄·7H₂O 370mg/L、KH₂PO₄170mg/L、KI 0.83mg/L、H₃BO₃ 6.2mg/L、MnSO₄·4H₂O 22.3mg/L、ZnSO₄·7H₂O 8.6mg/L、Na₂·MoO₄·2H₂O 0.25mg/L、CuSO₄·5H₂O0.025mg/L、CoCl₂·6H₂O 0.025mg/L、FeSO₄·7H₂O 27.8mg/L、Na₂·EDTA·2H₂O 37.3mg/L、肌醇100mg/L、煙酸0.5mg/L、鹽酸吡哆醇0.5mg/L、鹽酸硫胺素0.1mg/L和甘氨酸2mg/L；

S4中每升所述1/2MS培養(yǎng)基中含有以下原料：NH₄NO₃ 825mg/L、KNO₃ 950mg/L、CaCl₂·2H₂O 220mg/L、MgSO₄·7H₂O 185mg/L、KH₂PO₄85mg/L、KI 0.83mg/L、H₃BO₃ 6.2mg/L、MnSO₄·4H₂O 22.3mg/L、ZnSO₄·7H₂O 8.6mg/L、Na₂·MoO₄·2H₂O0.25mg/L、CuSO₄·5H₂O 0.025mg/L、CoCl₂·6H₂O 0.025mg/L、FeSO₄·7H₂O 27.8mg/L、Na₂·EDTA·2H₂O 37.3mg/L、肌醇100mg/L、煙酸0.5mg/L、鹽酸吡哆醇0.5mg/L、鹽酸硫胺素0.1mg/L和甘氨酸2mg/L。