[發明專利]一種利用卷式膜反應器培養干細胞的方法在審
| 申請號: | 202010527532.6 | 申請日: | 2020-06-06 |
| 公開(公告)號: | CN113755431A | 公開(公告)日: | 2021-12-07 |
| 發明(設計)人: | 華子昂;劉寶全;朱美瑛 | 申請(專利權)人: | 華子昂 |
| 主分類號: | C12N5/0775 | 分類號: | C12N5/0775 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 102300 *** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 利用 卷式膜 反應器 培養 干細胞 方法 | ||
本發明是一種利用卷式膜反應器培養干細胞的方法,屬于干細胞培養領域。本方法通過卷式膜反應器生產干細胞,利用透氣膜囊模擬人肺的氣體交換功能、利用半透膜膜囊模擬血管的輸送功能、利用干細胞培養支撐層模擬人體內干細胞巢,達到和人體干細胞巢內干細胞生長相同或相近的干細胞培養環境,更有利于干細胞培養。
技術領域
本實發明屬于干細胞培養領域,尤其是涉及一種利用卷式膜反應器培養干細胞的方法。
背景技術
干細胞種類很多,已經在疾病治療、醫美、抗衰、藥物篩選等眾多領域大量應用。干細胞培養已經成為整個干細胞產業鏈發展的制約瓶頸,干細胞培養器已經成為干細胞培養領域的開發熱點。
當前的干細胞培養裝置主要有兩類,一是2D培養裝置,通過減小液層高度來強化氣體交換;另一個是3D培養,通過攪拌來強化氣體交換。
無論2D培養,還是3D培養,都是被動的氣體擴散來完成氣體交換。由于氧氣在溶液中的溶解度差,被動擴散速度慢,氧氣供應會影響到干細胞的快速生長。同時,干細胞生長過程中要消耗營養與產生代謝廢物,不及時更新就會影響干細胞生長。2D培養裝置是通過一次過量投入營養物,在培養一段時間營養不足或代謝廢物過多時,通過人工更換培養液來完成,效率低下。3D培養主要是采用發酵罐的模式完成,利用攪拌槳完成干細胞培養體系中氣體與營養的混合,無法避免機械攪拌對干細胞的損傷。
發明內容
針對上述不足,本發明提供一種利用卷式膜反應器培養干細胞的方法,該方法生產干細胞通過透氣膜囊模擬人肺的氣體交換功能、半透膜膜囊模擬血管的輸送功能、干細胞培養支撐層模擬人體內干細胞巢,來達到和人體干細胞巢內干細胞生長相同或相近的效果
本發明解決技術問題培養干細胞的步驟如下:
1.訂制可用于干細胞培養的卷式膜反應器,
2.處理卷式膜反應器達到預設參數;
3.接種干細胞;
4.監測干細胞的生長生理指標;
5.收集成熟的干細胞。
進一步的,步驟1中的卷式膜反應器,包括透氣膜囊、半透膜膜囊、干細胞培養支撐層,其中透氣膜囊模擬人肺的氣體交換功能,解決干細胞培養過程中氧氣的供給與二氧化碳的排出;半透膜膜囊模擬血管的輸送功能,解決干細胞培養過程中養分的供給與代謝廢物的排出;干細胞培養支撐層模擬人體內干細胞巢的組成并可降解,在培養過程中發揮干細胞巢的功能促進干細胞生長,在回收時能夠降解加速干細胞排出。
進一步的,步驟2將卷式膜反應器完成氣體管道連接、液體管道連接、電路連接,進行去熱源檢測和無菌檢測,測試合格后,使卷式膜反應器達到預設參數,準備干細胞培養。
進一步的,步驟3將適宜濃度的干細胞輸送到干細胞培養支撐層中完成干細胞接種。
進一步的,步驟4中用傳感器與控制系統監測干細胞的生長生理指標,包括溫度、酸堿度、溶氧、滲透壓、營養物質種類與濃度、代謝物的濃度。
進一步的,步驟S5中在干細胞培養成熟時,加入可降解干細胞培養支撐層的消解液,使干細胞培養支撐層被降解但不損傷干細胞,成熟的干細胞隨液體從卷式膜反應器中流出,離心收集并保存。
有益效果:
本發明設計了一種利用卷式膜反應器培養干細胞的方法,在模擬人體內干細胞巢中,達到和人體干細胞巢內干細胞生長相同或相近的效果,使干細胞能夠在一種更接近人體內干細胞生長條件下進行培養,提高了干細胞的生長速度與活細胞比例。
具體實施例
實施例1
利用卷式膜反應器培養MSC干細胞。
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