[發(fā)明專利]一種同時(shí)檢測(cè)血清中6種精神類藥物含量的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010526309.X
• 申請(qǐng)日: 2020-06-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111610277B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-02-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李偉;趙富榮;張欣;劉曉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 科諾美（北京）科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/46;G01N30/74;G01N30/86;G01N30/88
• 代理公司: 北京雙收知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11241
• 代理人: 解政文;王菲

本發(fā)明涉及一種同時(shí)檢測(cè)血清中6種精神類藥物含量的方法，采用二維液相色譜系統(tǒng)及柱切換技術(shù)，對(duì)去蛋白后的血清待測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)。本發(fā)明采用在線柱切換、多維在線固相萃取液相色譜法分析血清中6種精神類藥物的血藥濃度，大大提高了檢測(cè)靈敏度。簡(jiǎn)單的前處理(去蛋白)方法，減少了操作過(guò)程帶來(lái)的誤差，提高了檢測(cè)通量。相同的分析方法可以同時(shí)進(jìn)行6種精神類藥物的血藥濃度檢測(cè)，可同時(shí)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，且各藥物之間相互不產(chǎn)生干擾。大大減少了樣本分析時(shí)不同方法交替平衡系統(tǒng)的時(shí)間。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種同時(shí)檢測(cè)血清中6種精神類藥物含量的方法。

背景技術(shù)

氯丙嗪是20世紀(jì)50年代開(kāi)始用于臨床，是第1代抗精神病藥(典型抗精神病藥)。主要用于治療精神分裂癥、躁狂癥等。有文獻(xiàn)報(bào)道：不同個(gè)體口服相同劑量的氯丙嗪，血藥濃度可相差10倍以上。氯氮平是20世紀(jì)70年代開(kāi)始進(jìn)入臨床的新型非典型抗精神病藥，屬于第2代抗精神病藥。與典型抗精神病藥相比具有較少引起錐體外系反應(yīng)的特點(diǎn)，但卻會(huì)引起粒細(xì)胞缺乏等致命性不良反應(yīng)。阿立哌唑是二氫喹啉酮類抗精神病藥，屬于第3代抗精神病藥，在藥理作用機(jī)制上不同于其1、2代抗精神病藥，不僅可以治療謹(jǐn)慎分裂癥的各種癥狀及改善認(rèn)知功能，并且較少引起錐體外系癥狀、糖脂代謝障礙等不良反應(yīng)。

丙咪嗪、氯米帕明、阿米替林都屬于三環(huán)類抗抑郁藥，具有抗抑郁作用強(qiáng)、毒副作用小的特點(diǎn)，目前都是治療抑郁癥的主要藥物。

以上這些藥物的有效濃度范圍窄，當(dāng)血藥濃度超過(guò)有效濃度范圍上限時(shí)，療效反而下降；當(dāng)血藥濃度過(guò)高時(shí)，可能會(huì)引起嚴(yán)重的毒副反應(yīng)，加上機(jī)體對(duì)這類藥物的代謝能力個(gè)體差異大，因此被公認(rèn)為是需要在血藥濃度檢測(cè)下使用的藥物。

目前常用于測(cè)定氯丙嗪、氯氮平、阿立哌唑、丙咪嗪、氯米帕明及阿米替林血藥濃度的測(cè)定方法主要是采用液相色譜法(HPLC)或液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)。樣品的前處理一般多采用液液萃取或者離線固相萃取的方式，耗費(fèi)試劑多、前處理時(shí)間長(zhǎng)，且人為影響因素較大，常常導(dǎo)致測(cè)試結(jié)果偏差大。普通液相色譜法對(duì)于血清中的某些藥物濃度檢測(cè)靈敏度不夠，而且通常都是對(duì)單一藥物進(jìn)行測(cè)定。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法雖然可以解決靈敏度問(wèn)題，但因?yàn)閮x器/耗材昂貴、需要專業(yè)人員操作、需要內(nèi)標(biāo)等因素，不容易普及?；虿煌繕?biāo)藥物采用不同的前處理方式、不同的色譜條件和/或質(zhì)譜條件，不同類型的檢測(cè)儀器等，這都造成了檢測(cè)效率不高、成本增加、患者等待時(shí)間較長(zhǎng)等問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服上述技術(shù)缺陷，本發(fā)明的技術(shù)目的是提供一種同時(shí)檢測(cè)血清中6種精神類藥物含量的方法，采用二維液相色譜系統(tǒng)及柱切換技術(shù)相結(jié)合，血清樣品僅需要簡(jiǎn)單的蛋白沉淀后即可上機(jī)檢測(cè)；該方法快速、靈敏，可以滿足體外診斷對(duì)于血清中6種精神類藥物的含量測(cè)定要求；該方法成本較低，經(jīng)過(guò)專業(yè)培訓(xùn)后操作人員即可操作；可以高效率利用設(shè)備，減少儀器測(cè)試不同目標(biāo)藥物時(shí)進(jìn)行方法轉(zhuǎn)換、平衡的時(shí)間。

本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

一種同時(shí)檢測(cè)血清中6種精神類藥物含量的方法，采用二維液相色譜系統(tǒng)及柱切換技術(shù)，對(duì)去蛋白后的血清待測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)。

本發(fā)明的方法，所述二維液相色譜系統(tǒng)及柱切換技術(shù)具體是：采用4.0×20mm的一維色譜柱、3.0×100mm的二維色譜柱和4.6×10mm的中間柱，將去蛋白后的血清待測(cè)樣品上樣、洗脫、測(cè)定，得到色譜圖，根據(jù)色譜圖的峰面積，帶入已建立好的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，計(jì)算出待測(cè)樣品的目標(biāo)物含量。所述一維色譜柱、二維色譜柱和中間柱可以采用苯基柱或C18柱均可；優(yōu)選的是，一維色譜柱采用苯基柱、二維色譜柱和中間柱采用C18柱。

本發(fā)明的方法，所述二維液相色譜系統(tǒng)及柱切換技術(shù)中，一維色譜流動(dòng)相采用體積比為80:20的10～50mM醋酸銨(pH 5～7.5之間)和乙腈等度洗脫，流速1.2mL/min；二維色譜流動(dòng)相采用體積比為57:43的10～50mM醋酸銨(pH5～7.5之間)和乙腈等度洗脫，流速0.5mL/min。