[發明專利]一種快速誘導二穗短柄草組培苗不定根再生的方法

在審

• 申請號: 202010525793.4
• 申請日: 2020-06-10
• 公開（公告）號: CN111512808A
• 公開（公告）日: 2020-08-11
• 發明（設計）人: 王凱;余光潤;王建勇;苗麗
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: A01G2/10
• 分類號: A01G2/10;A01G22/00;A01G9/029
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

本發明公開了一種快速誘導二穗短柄草組培苗不定根再生的方法。該方法主要是選取無根的二穗短柄草組培苗，用生根粉溶液浸泡后，將組培苗種植于塑料盆中并放入人工氣候室培養，兩周后不定根長度可達12?15cm；本發明的二穗短柄草快速生根方法，整合傳統生根和煉苗程序，提高再生苗的存活率，縮短育苗周期，本發明可直接用于二穗短柄草再生和遺傳轉化體系的優化研究，也為加速植物轉基因育種奠定基礎。

技術領域

本發明涉及植物組織培養技術領域，具體涉及一種快速誘導二穗短柄草組培苗不定根再生的方法。

背景技術

通過植物組織培養技術研究植物基因功能的有效途徑。目前該技術在植物再生工作中得到廣泛的應用，但不定根的再生依然是其中重要的限速步驟，尤其是如何快速誘導不定根的形成。

二穗短柄草作為世界上分布最廣泛的C3植物，因其基因組小、生長周期短、體量小、適合遺傳轉化等優勢而被定義為新的模式植物。傳統的二穗短柄草再生通過控制外界溫度和光照，但是這樣培養出來的二穗短柄草小苗氣孔和角質層發育不完善，葉綠素水平偏低，根部與莖部連接部分的水傳導能力差，容易造成植株失水死亡。因此，快速促進二穗短柄草不定根的再生，同時改善再生苗的生理狀態，是解決這一難題的有效途徑。

瓶外生根技術可以將生根和馴化整合起來，改善了傳統生根程序的諸多弊端，提高成活率，縮短育苗周期。

發明內容

本發明的目的是提供一種快速誘導二穗短柄草組培苗不定根再生的方法，可以提高成活率，縮短育苗周期，并可用于植物再生和遺傳轉化研究。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：一種快速誘導二穗短柄草組培苗不定根再生的方法，包括如下步驟：

(1)選取無根二穗短柄草組培苗，組培苗高度2-3cm，用鑷子將二穗短柄草組培苗從培養瓶中取出，清洗3-5次；

(2)清洗后的組培苗用1mg/L生根粉溶液浸泡處理3-5分鐘；

(3)將浸泡過生根粉的組培苗移栽到裝有混合土壤的塑料種植盆中，種植完成后，保鮮膜覆蓋塑料種植盆盆口，放置人工氣候室培養；

(4)每天用1mg/L生根粉溶液掀開保鮮膜噴灑2-3次，兩周后測量不定根長度，為12-15cm。

步驟(1)中，所述無根二穗短柄草組培苗為二穗短柄草愈傷組織誘導出的不定芽。

步驟(2)中，所述生根粉溶液的配制方法為1mg生根粉溶解于1L蒸餾水中。

步驟(3)中，所述混合土壤為營養土、珍珠巖、蛭石以2：

1：2比例混合后，加入清水至土壤濕潤。

步驟(3)中，所述人工氣候室培養條件為：溫度22±2℃，濕度60±10％，光照16h/黑暗8h。

本發明的優點在于：本發明利用瓶外再生的策略，改變組培苗的生長狀態，并通過生根粉的協同作用，快速誘導二穗短柄草組培苗不定根的再生，提高組培苗的成活率和側根數量，表明本發明可真實且可靠地誘導二穗短柄草組培苗不定根的形成，本發明為不定根誘導的研究積累了寶貴材料，縮短植物再生時間，有利于二穗短柄草轉基因育種工作的研究。

附圖說明

圖1為二穗短柄草移栽于塑料種植盆的初始狀態圖；

圖2為二穗短柄草移栽于塑料種植盆2周后的狀態圖。

具體實施方式

下面將結合本發明中的附圖，對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述。

實施例1

一種快速誘導二穗短柄草組培苗不定根再生的方法，包括如下步驟：