[發明專利]一株高產γ-氨基丁酸的德氏乳桿菌保加利亞亞種

有效

• 申請號: 202010522485.6
• 申請日: 2020-06-10
• 公開（公告）號: CN111733095B
• 公開（公告）日: 2022-05-24
• 發明（設計）人: 楊飛;趙世偉;茍學磊;馬萬平;李智星;李瓊瑩;劉雪英;杜永新;尹柯茹;王永芳
• 申請（專利權）人: 云南皇氏來思爾乳業有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;C12P13/00;C12R1/225
• 代理公司: 北京市盈科律師事務所 11344
• 代理人: 荔恒輝

本發明公開了一株高產γ?氨基丁酸的德氏乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillus delbrueckii subsp.Bulgaricus)LSR?L?L4，屬于微生物發酵工程技術領域。該菌株保藏編號為CGMCC NO.14752。該菌株從大理特產乳扇中分離篩選獲得，經16SrDNA鑒定為可食用菌株,具有產酸快、后酸低、對數生長快、穩定周期長、活菌數高等優勢，且雙乙酰含量11.45mg/L，具有優質發酵菌株特性。在脫脂乳中，LSR?L?L4作為單一發酵劑，在不添加其它外源物質發酵條件下，利用高效液相色譜儀檢測，3?6代該菌株γ?氨基丁酸產量達473.200?490.594mg/L。

技術領域

本發明屬于微生物發酵工程技術領域，具體涉及一株高產γ-氨基丁酸的德氏乳桿菌保加利亞亞種。

背景技術

γ-氨基丁酸(Gamma-aminobutyric acid，簡稱GABA)，是一種非蛋白氨基酸，廣泛分布于自然界、動植物及微生物中。在生物體內由L-谷氨酸(L-Glu)或者L-谷氨酸鈉(L-MSG)經過谷氨酸脫羧酶的作用，脫去一分子羧基而形成。在上世紀八十年代，Robert小組首先在動物腦部浸提液中發現γ-氨基丁酸的存在。而后日本厚生省、歐洲食品安全局(EFSA)和美國食品藥品管理局(FDA)承認乳酸菌發酵生產的GABA為天然食品添加劑。2009年9月，我國衛生部批準γ-氨基丁酸為新資源食品。

GABA因較好的生理功能和應用前景受到廣泛關注,γ-氨基丁酸是一種抑制性神經遞質，能夠有效地緩解抑郁，還能夠刺激β細胞再生。據目前的研究發現GABA的生理活性主要表現在一下幾個方面：治療糖尿病；健腦安神；改善睡眠；調節血壓；抵抗疲勞；緩壓美容；促進腦活性化；防止皮膚老化、高效減肥；哺乳動物中樞神經系統重要的抑制性神經遞質，提高精子活力，治療癲癇等生理功能。

當人體缺乏GABA時會焦慮不安、疲倦、憂慮等，自然人每日攝取γ-氨基丁酸量應≤500mg。GABA的天然含量很低，單純依靠天然物質的提取遠遠滿足不了市場的需求。目前合成γ-氨基丁酸的方法分為兩大類：化學法和生物法。化學法，流程復雜且使用較多的非環境友好型試劑，最后產物存在有機試劑殘留的問題而不能在食品中添加。生物法包括植物法和微生物法，生物法主要是發芽的糙米和豆類，含有大量的γ-氨基丁酸；微生物法，微生物由于生長周期短，繁殖速度快，近些年廣泛被應用于生產γ-氨基丁酸。目前發酵法生產的GA BA產品多成黃色，有氣味，純度不高于90％，天然菌株在發酵乳中產γ-氨基丁酸少，發酵性能差。現有技術公開了一株高產γ-氨基丁酸的乳酸菌及其應用(授權公告號：CN107475151 B)，其篩選出的一株副短乳桿菌(Lactobacillus parabrevis)HX12-19(保藏編號為：CCTCCM2017307),該菌株產γ-氨基丁酸的最大能力為235.6mg/L。

隨著GABA逐漸被國內消費者認知，應用安全菌株生產天然原料GABA，提高天然菌株生產γ-氨基丁酸的能力，是開發GABA功能性食品必須解決的一個技術問題。

發明內容

為解決天然菌株在發酵乳中產出γ-氨基丁酸少、發酵性能差的問題；本發明提供了一株從大理特產乳扇中篩選的德氏乳桿菌保加利亞亞種LSR-L-L4；在發酵液中LSR-L-L4作為唯一發酵劑，γ-氨基丁酸產量達473.200-490.594mg/，為已報道天然菌單株菌最高產率。

本發明同時提供了一種德氏乳桿菌保加利亞亞種LSR-L-L4的篩選方法。

為實現上述發明目的，本發明采用下述技術方案：一株高產γ-氨基丁酸的德氏乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillus delbrueckii su bsp.Bulgaricus)LSR-L-L4，其特征在于：它的保藏編號為：CGMC C NO.14752，于2017年9月26日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)。