[發明專利]一種單細胞基因檢測芯片及其制作方法與檢測方法

有效

• 申請號: 202010521972.0
• 申請日: 2020-06-10
• 公開（公告）號: CN111763612B
• 公開（公告）日: 2022-10-18
• 發明（設計）人: 郜晚蕾;賈治森;金慶輝;簡家文
• 申請（專利權）人: 寧波大學
• 主分類號: C12M1/34
• 分類號: C12M1/34;C12M1/00;C12Q1/6844;C12Q1/6886;B01L3/00
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理有限公司 33226
• 代理人: 陳其明

1.一種單細胞基因檢測芯片，包括由下而上依次貼合的玻璃基片(3)、PDMS主芯層(2)、聚丙烯雙面膠膜(1)，聚丙烯雙面膠膜(1)上開設有進樣孔(11)，所述PDMS主芯層(2)上面為開槽結構面，其特征在于，所述PDMS主芯層(2)開槽結構面上從同一水平面上向下開設檢測槽和負壓槽，檢測槽在聚丙烯雙面膠膜(1)下面形成供待測細胞溶液流入的檢測流道，負壓槽在聚丙烯雙面膠膜(1)下面形成負壓空腔，所述負壓空腔相對檢測流道形成負壓；檢測流道按試樣流向依次包括進樣口(21)、主流道(24)、微道腔陣列和廢液腔(22)，沿所述主流道(24)兩側依次開設側流道(28)，每個側流道(28)終端開設微腔(26)，沿所述主流道(24)兩側所開設的側流道(28)與微腔(26)，形成微道腔陣列，所述主流道(24)經過微道腔陣列分流后其終端通入廢液腔(22)；所述主流道(24)在PDMS主芯層(2)開槽結構面反復迂回前行布置，形成多條長直槽(4)，在每2條縱向長直槽(4)之間的迂回端形成短橫槽(5)，沿所述長直槽(4)兩側依次開設側流道(28)與微腔(26)，形成所述微道腔陣列，所述多條長直槽(4)、短橫槽(5)與微道腔陣列共同在PDMS主芯層(2)開槽結構面上形成檢測區域(6)，所述檢測區域(6)右旁設置空余區域，所述廢液腔(22)開設在空余區域；所述負壓空腔包括圍繞在檢測區域(6)外圍的外腔道與伸入檢測區域(6)每2條長直槽(4)之間的內腔道(8)，外腔道包括位于檢測區域(6)上端的外腔道上段(12)，隔著廢液腔(22)位于檢測區域(6)右邊的外腔道右段(13)，位于檢測區域(6)下端的外腔道下段(14)；從外腔道上段(12)引入的各內腔道(8)在長直槽(4)下側迂回端內形成盲端(9)，從外腔道下段(14)引入的各內腔道(8)在長直槽(4)上側迂回端內形成盲端(9)；所述負壓空腔各內腔道(8)的槽寬度大于外腔道的槽寬度，在每個微腔(26)位置相對應處保留半圓柱凸出槽壁(10)，形成半圓柱凸出槽壁(10)陣列，半圓柱凸出槽壁(10)與對應的微腔(26)為同心圓；所述負壓空腔包括開設在于檢測區域(6)右邊空余區域的圓孔腔(23)，從圓孔腔(23)開設至少1條通道與外腔道右段(13)相通。

2.如權利要求1所述的單細胞基因檢測芯片，其特征在于，所述主流道(24)寬度為80μm至100μm，主流道(24)槽深度為20μm至25μm，側流道(28)寬度為20μm至25μm，側流道(28)槽深度為20μm至25μm，微腔(26)直徑為50μm至80μm，微腔(26)槽深度為50μm至60μm，同一列中微腔(26)之間的間距為150μm至200μm；微腔(26)個數為2000至2500個。

3.如權利要求1所述的單細胞基因檢測芯片，其特征在于，所述廢液腔(22)中設置有支撐柱(7)陣列；所述廢液腔(22)呈正方形，邊長為2mm，槽深度為50μm至60μm；或者，所述廢液腔(22)呈圓形，直徑為2mm。

4.如權利要求1所述的單細胞基因檢測芯片，其特征在于，所述外腔道寬度為80μm至100μm，槽深度為50μm至60μm，側流道寬度為80μm至100μm，槽深度為50μm至60μm，各內腔道(8)的半圓柱凸出槽壁(10)的半徑為60μm至75μm，各內腔道(8)的兩側半圓柱凸出槽壁(10)相對處為其槽寬度最小處，內腔道(8)槽寬度最小處的槽寬度為80μm至100μm，各內腔道(8)槽深度為50μm至60μm；圓孔腔(23)是通過打孔器制作的通孔，直徑為2mm至3mm；所述PDMS主芯層(2)厚度為2mm至3mm。