[發明專利]一種用于水環境DNA富集的濾膜組件、收集器及應用方法

有效

• 申請號: 202010521830.4
• 申請日: 2020-06-10
• 公開（公告）號: CN111647594B
• 公開（公告）日: 2022-08-26
• 發明（設計）人: 楊江華;張效偉
• 申請（專利權）人: 南京易基諾環保科技有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10;B01D63/08;C02F1/44
• 代理公司: 江蘇瑞途律師事務所 32346
• 代理人: 陳彬

1.一種用于水環境DNA富集的濾膜組件，其特征在于：所述濾膜組件包括：

至少三層由上到下依次層疊設置的上層、中層、下層濾膜（100），按照由上到下的次序，各層濾膜（100）的濾孔孔徑呈線性減小或階梯式減小，所述上層濾膜（100）的濾孔孔徑為20~100 μm；中層濾膜（100）的濾孔孔徑為5~20 μm；下層濾膜（100）的濾孔孔徑為0.2~1 μm；上下相鄰的兩層濾膜（100）之間保持一定空隙；

所述上下相鄰的兩層濾膜（100）之間的空隙內填充有若干數量的微球（200），所述微球（200）的填充體積為15~30%，所述微球（200）包括二氧化硅或氧化鋯微珠，所述微球（200）的粒徑為2~5mm，所述微球（200）可在空隙內自由移動。

2.根據權利要求1所述的用于水環境DNA富集的濾膜組件，其特征在于：所述上下相鄰的兩層濾膜（100）之間的濾孔呈交錯狀設置。

3.根據權利要求2所述的用于水環境DNA富集的濾膜組件，其特征在于：所述上下相鄰兩層濾膜（100）之間的邊緣通過黏膠劑進行黏合，形成濾膜黏合邊緣（300）。

4.根據權利要求3所述的用于水環境DNA富集的濾膜組件，其特征在于：所述上下相鄰的兩層濾膜（100）之間的空隙內至少填充有兩種不同粒徑的微球（200）。

5.根據權利要求4所述的用于水環境DNA富集的濾膜組件，其特征在于：所述上下相鄰的兩層濾膜（100），位于上層濾膜（100）的濾孔孔徑大于位于下層濾膜（100）的濾孔孔徑；和/或所述黏膠劑為壓力敏感型膠粘劑。

6.一種用于水環境DNA富集的收集器，其特征在于：所述收集器包括上座體（410）、中座體（420）以及下座體（430）；所述的上座體（410）與中座體（420）卡合連接形成上腔室，所述的中座體（420）與下座體（430）卡合連接形成下腔室，所述的上下腔室之間安裝有權利要求1~5中任意一項所述的用于水環境DNA富集的濾膜組件。

7.一種利用權利要求1~5任意一項所述的濾膜組件進行水環境DNA富集和提取方法，具體步驟如下：

1）在負壓條件下，進行水樣的收集，收集的水樣由濾膜組件（440）的上層進入，下層流出進行過濾，所述微球（200）支撐上、下相鄰的兩層濾膜（100），同時對流經的水體形成導流，過濾過程中所述水環境中的DNA富集至濾膜組件（440）上；

2）過濾完成后，將濾膜組件（440）取出，進行水環境DNA的提取：將濾膜組件（440）置于裝有裂解液的無菌管中，進行振蕩、破碎，過程中濾膜空隙中的微球（200）之間、微球（200）與濾膜（100）之間相互碰撞、摩擦，使生物DNA充分釋放，進行DNA提取。