[發明專利]新布尼亞病毒IgG、IgM聯合檢測試劑卡及其制備方法

在審

• 申請號: 202010521590.8
• 申請日: 2020-06-10
• 公開（公告）號: CN111521787A
• 公開（公告）日: 2020-08-11
• 發明（設計）人: 何愛民;陸一泓;于利平
• 申請（專利權）人: 光景生物科技（蘇州）有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558
• 代理公司: 蘇州創元專利商標事務所有限公司 32103
• 代理人: 汪青;周敏

本發明涉及一種新布尼亞病毒IgG、IgM聯合檢測試劑卡，包括樣品墊、結合墊、分析膜以及吸收墊；所述的結合墊上包被有標記物標記的新布尼亞病毒重組抗原；所述的分析膜上設置有第一檢測線和第二檢測線，其中，所述的第一檢測線上包被有抗人IgG，所述的第二檢測線上包被有抗人IgM。本發明采用免疫層析技術，可以實現新布尼亞病毒IgG和IgM的同時快速免疫分析。

技術領域

本發明涉及一種新布尼亞病毒IgG、IgM聯合檢測試劑卡及其制備方法。

背景技術

布尼亞病毒(Bunya virus)是具球形、有包膜和分節段負鏈RNA的1目病毒。因首先從烏干達西部的布尼亞韋拉分離到本目而得名。代表種-布尼亞韋拉病毒。直徑90～100納米，從包膜伸出許多糖蛋白突起，內有3個螺旋對稱的核殼，分別含大(L)、中(M)、小(S)3個RNA節段，其總分子量為(6～7)×10⁶。多數具有3種主要的病毒粒蛋白質。，病毒粒成熟時芽生細胞高爾基區表面光滑的小泡內或其附近。其中S片段屬于雙義RNA，分別編碼核蛋白(nucleocapsid protein，NP)和非結構蛋白。在布尼亞病毒感染的臨床病例中，病毒NP是主要的免疫原，患者體內相應的抗體水平較高。

發熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒(SFTSV)是布尼亞病毒的一個新發現病毒種類，簡稱新布尼亞病毒。該病毒感染人體引起的發熱伴血小板減少綜合征(SFTS)以發熱、血小板和白細胞減少為主要臨床表現，多數病例有乏力，消化道癥狀，肌肉酸痛和淋巴結腫大等臨床癥狀。病情危重者可發生休克、呼吸衰竭、彌漫性血管內凝血等多臟器功能衰竭而死亡。SFTS是一種新發出血熱，為急性傳染性疾病，SFTS感染的全國平均死亡率為5.3％在部分流行地區該病的病死率高達30％。

當人體受病毒侵害時，人體免疫系統啟動應答機制，血液漿細胞產生抗體，根據結構的不同將免疫球蛋白分為五種，IgM、IgA、IgG、IgD和IgE。其中，IgM是胎兒合成的第一種Ig，主要存在于生物體血液中，對防止菌血癥起主要作用，IgM抗體是免疫應答中首先分泌的抗體，一經感染快速產生，經過一段時間，IgM抗體量逐漸減少而消失，IgM占血清免疫球蛋白總量的5％～10％，IgM陽性可作為病毒早期感染的診斷指標。因此，新布尼亞病毒IgG、IgM聯合檢測有助于新布尼亞病毒感染的診斷。

目前新布尼亞病毒檢測方法主要采用膠體金法、酶聯免疫法和PCR-熒光探針法。申請號201711468267.3公開了用膠體金法測試新布尼亞病毒IgG、IgM，該專利可以同時測定新布尼亞病毒IgG、IgM，但是僅是定性，且膠體金檢測靈敏度仍有待提高。申請號201210121489.9公開了用酶聯免疫法測試新布尼亞病毒IgM，該專利僅測試新布尼亞病毒IgM，因此其檢測結果僅針對新布尼病毒的早期感染情況進行評估，且酶聯免疫法操作繁瑣，特異性和靈敏性也有待提高。PCR-熒光探針法靈敏度和特異性都比較好，但檢測物為病毒RNA，使用PCR-熒光探針法無法得到新布尼亞病毒IgG、IgM半定量結果，而且一般耗時較長，雖可同時檢測較多樣本，但需要大型儀器，檢測過程復雜步驟多。

發明內容

本發明的目的是提供一種新布尼亞病毒IgG、IgM聯合檢測試劑卡及其制備方法，該試劑卡可以同時對新布尼亞病毒IgG、IgM含量進行半定量檢測，檢測靈敏度高，特異性好，并且操作簡單、快捷。

為了達到上述目的，本發明采用如下技術方案：

本發明一方面提供一種新布尼亞病毒IgG、IgM聯合檢測試劑卡，包括樣品墊、結合墊、分析膜以及吸收墊；其中，所述的結合墊上包被有標記物標記的新布尼亞病毒重組抗原；所述的分析膜上設置有第一檢測線和第二檢測線，其中，所述的第一檢測線上包被有抗人IgG，所述的第二檢測線上包被有抗人IgM。

本發明中的標記物為易測定且具有高度敏感性的物質，優選地，所述的標記物為熒光素、磷光素、熒光微球、磷光微球、磁性微球、發光底物、量子點中的一種或多種。優選地，所述的標記物的粒徑為納米級。