[發明專利]一種ACE2細胞人源化的小鼠模型及其構建方法和應用在審
| 申請號： | 202010519840.4 | 申請日： | 2020-06-09 |
| 公開（公告）號： | CN111621523A | 公開（公告）日： | 2020-09-04 |
| 發明（設計）人： | 不公告發明人 | 申請（專利權）人： | 湖南昭泰生物醫藥有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/85 | 分類號： | C12N15/85;C12N15/867;C12N5/10;C12N15/65;A01K67/027 |
| 代理公司： | 北京品源專利代理有限公司 11332 | 代理人： | 鞏克棟 |
| 地址： | 410116 湖南省長沙市雨花區*** | 國省代碼： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 ace2 細胞 人源化 小鼠 模型 及其 構建 方法 應用 | ||
1.一種ACE2細胞人源化的小鼠模型，其特征在于，所述小鼠模型以免疫缺陷小鼠為母體，且體內含有過表達ACE2受體的人源細胞。
2.根據權利要求1所述的小鼠模型，其特征在于，所述免疫缺陷小鼠包括NSI和/或NSIN型免疫缺陷小鼠；
優選地，所述免疫缺陷小鼠包括NOD/SCID IL2rg-/-Foxn1-/-型和/或NOD/SCIDIL2rg-/-型小鼠。
3.根據權利要求1或2所述的小鼠模型，其特征在于，所述過表達ACE2受體的人源細胞以BCG823、A549、Huh7、Jurkat、Nalm6、293T或H1299中的任意一種為母細胞，優選為BCG823。
4.根據權利要求1～3任一項所述的小鼠模型，其特征在于，所述過表達ACE2受體的人源細胞采用如下方法制備：
將攜帶ACE2基因的慢病毒載體與包裝細胞混合，制成慢病毒懸液，再將所述慢病毒懸液與母細胞混合，得到所述過表達ACE2受體的人源細胞；
優選地，所述ACE2基因偶聯熒光素酶基因；
優選地，所述ACE2基因偶聯綠色熒光蛋白基因。
5.根據權利要求1～4任一項所述的小鼠模型，其特征在于，所述小鼠模型體內還包括人免疫細胞。
6.一種如權利要求1～5任一項所述的ACE2細胞人源化的小鼠模型的構建方法，其特征在于，所述構建方法以免疫缺陷小鼠為母體，將過表達ACE2受體的人源細胞轉移至所述免疫缺陷小鼠體內，得到所述ACE2細胞人源化的小鼠模型。
7.根據權利要求6所述的構建方法，其特征在于，所述構建方法包括如下步驟：
(1)將攜帶ACE2基因的慢病毒載體與包裝細胞混合，制成慢病毒懸液，再將所述慢病毒懸液與母細胞混合，得到所述過表達ACE2受體的人源細胞；
(2)通過尾靜脈注射將所述過表達ACE2受體的人源細胞轉移至免疫缺陷小鼠體內，培養后得到所述ACE2細胞人源化的小鼠模型。
8.根據權利要求6或7所述的構建方法，其特征在于，步驟(1)所述母細胞與慢病毒的使用量比值為1個:(8～12)TU；
優選地，步驟(2)所述過表達ACE2受體的人源細胞的注射濃度為(1×103～1×104)個/μL。
9.根據權利要求6～8任一項所述的構建方法，其特征在于，所述構建方法還包括將人免疫細胞轉移至所述免疫缺陷小鼠體內的步驟。
10.如權利要求1～5任一項所述的ACE2細胞人源化的小鼠模型在研究新型冠狀病毒致病機理、篩選免疫治療方法或評估免疫治療有效性中的應用。
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