[發明專利]一種固相萃取-高效液相色譜法同時檢測奶牛糞污中5種磺胺類藥物的方法

在審

• 申請號: 202010517665.5
• 申請日: 2020-06-09
• 公開（公告）號: CN111650298A
• 公開（公告）日: 2020-09-11
• 發明（設計）人: 吳利軍;何斌;金爾光;陳夏冰;邵志勇;楊文海;陳潔;王肆玖;萬平民;劉武;涂亞平;周源;龔萍;胡修忠;譚珺雋;童偉文;華娟
• 申請（專利權）人: 武漢市農業科學院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所 42001
• 代理人: 余曉雪

1.一種固相萃取-高效液相色譜法同時檢測奶牛糞污中5種磺胺類藥物的方法，所述5種磺胺類藥物為磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺甲噁唑和磺胺喹噁啉；

所述方法依次包括如下步驟：

（1）樣品前處理；（2）固相萃取；（3）進高效液相色譜儀分析；

所述步驟（3）的色譜條件如下：

AgiLent SB-C18色譜柱(500 mm×4.6 nm, 5 μm)；檢測波長為270 nm；流動相為0.3v/v %乙酸(A)和乙腈(B)，流速為1.0 mL/min；柱溫 30 ℃；梯度洗脫程序：0~15 min，85%A；15~20 min，60% A，20~20.1 min，85% A；20.1~25 min，85% A。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（1）樣品前處理的步驟如下：將奶牛糞污冷凍干燥后粉碎、過篩，然后稱取經過篩后的樣品x g，加入y mL水和y mL乙腈，漩渦混勻，超聲至少10min，加入z g氯化鈉，漩渦混勻后，離心，將上層提取液轉移至離心管中，向殘渣中每次加入y mL乙腈，提取2次，合并提取液，旋轉蒸發近干，用a mL 0.1 mol/L鹽酸溶解殘渣，然后每次加入b mL正己烷去脂，處理2次，取水層備用；

其中， x：y：z：a：b = （0.125-10）：10：3：20：6。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述步驟（2）固相萃取的步驟如下：

首先，依次用6 mL超純水和6 mL甲醇對60 mg/3mL的 MCX固相萃取小柱進行活化，然后將步驟（1）所得水層以2 mL/min流速過柱，依次用6 mL 0.1 mol/L鹽酸、6 mL超純水和6 mL甲醇沖洗MCX固相萃取小柱，吹干柱中殘留液體，加入6 mL 氨水-甲醇（V:V，2:98）洗脫，收集洗脫液，氮吹近干后，用0.3 v/v %乙酸-乙腈混合溶液(0.3 v/v %乙酸和乙腈體積比為85:15)定容。

4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，x：y：z：a：b = 5：10：3：20：6。

5.根據權利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于，采用外標法定量。