[發明專利]化學發光清洗液及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202010517044.7
• 申請日: 2020-06-08
• 公開（公告）號: CN111607465B
• 公開（公告）日: 2021-09-21
• 發明（設計）人: 張曉紅;張玉潔;朱越譚;曾敏霞
• 申請（專利權）人: 珠海麗珠試劑股份有限公司
• 主分類號: C11D1/94
• 分類號: C11D1/94;C11D3/04;C11D3/16;C11D3/34;C11D3/20;C11D3/60
• 代理公司: 北京超成律師事務所 11646
• 代理人: 高玉光

本發明提供了一種化學發光清洗液及其制備方法和應用，涉及醫療器械體外診斷試劑技術領域，本發明提供的化學發光清洗液，主要由緩沖液、表面活性劑、金屬離子和防腐劑組成。其中，非離子表面活性劑與兩性表面活性劑聯合使用，使得清洗液穩定性好、準確度高；不同種類防腐劑聯用，防腐效果好。本發明提供的化學發光清洗液，通過特定組分的選擇，解決了進口清洗液價格高昂、檢測成本高的問題，成本低廉，并降低了國內對進口清洗液的依賴。同時，該化學發光清洗液適用于堿性磷酸酶體系的化學發光免疫反應，并且經過項目驗證，該種化學發光清洗液可適用于堿性磷酸酶體系PCT、AMH、dsDNA、CCP等的多種化學發光檢測項目中。

技術領域

本發明涉及醫療器械體外診斷試劑技術領域，尤其是涉及一種化學發光清洗液及其制備方法和應用。

背景技術

化學發光免疫反應的步驟為：加樣、溫育、洗滌、判讀。其中洗滌是決定試驗結果的一個重要步驟。洗滌的主要目的是去除未結合的免疫反應物及游離的結合物，終止抗原抗體的繼續結合，減少非特異性干擾物質對檢測結果的影響。清洗液不僅為免疫反應提供適宜的酸堿環境及電解質，更重要的是除掉反應過程中未結合免疫反應物，終止抗原抗體繼續結合，清洗液中的表面活性劑，可有效分離結合的免疫反應物及非特異性干擾物質，保證化學發光免疫檢驗能正常進行。

其次，全自動化學發光免疫分析儀采用管路、加樣針、廢液針重復利用，易導致樣品交叉污染，進而影響測定結果。因此有效的化學發光清洗液對全自動化學發光免疫分析儀管路、加樣針和廢液針的維護以及保證樣本測試準確具有重要意義。

化學發光按照反應類型可分為酶促化學發光和非酶促化學發光兩類，在酶促化學發光中，堿性磷酸酶體系是較為常用的體系之一，其與發光底物反應速度快，在很短時間內可提供正確可靠的結果，且發射光為輝光，光強度在60min內相對穩定，易于測量且穩定性高，應用較為廣泛。

CN110862881A公開了一種全自動化學發光測定儀專用的清洗液或其稀釋液及其制備方法，主要包含無機鹽、磷酸鹽緩沖體系、表面活性劑1(吐溫-20、吐溫80中的一種)、表面活性劑2(十二烷基硫酸鈉、月硅酸鈉中的一種)、防腐劑(Proclin300和Bronidox)及水構成。該清洗液采用較高濃度的磷酸鹽，經驗證其會抑制堿性磷酸酶的活性。這是由于堿性磷酸酶體系的化學發光試劑，發光原理為堿性磷酸酶催化底物金剛烷類似物AMPPD，釋放磷酸根，形成不穩定的中間體AMP-D，這個中間體隨即自行分解，同時發射光子，如果檢測試劑的體系中存在較高濃度的磷酸根，則會抑制堿性磷酸酶對底物的催化作用，影響檢測反應。該洗液使用的表面活性劑2中的十二烷基硫酸鈉即SDS，由于其為粉末狀，在稱量時操作者容易吸入，對粘膜和上呼吸道有刺激作用，對眼和皮膚有刺激作用，對人體有害；SDS在高濃度時會破壞蛋白結構，使用不當會造成免疫反應中抗原或抗體結構破壞，影響檢測反應；SDS溶液在低溫時容易產生沉淀，影響洗液洗滌效果。

CN107118865A公開了一種清洗液，包含磷酸緩沖體系、無機鹽、表面活性劑A(Triton X-100或吐溫-20)、表面活性劑B(膽酸鈉)以及防腐劑(Proclin300或Proclin950)，同樣該種清洗液采用了較高濃度的磷酸鹽，不適用于堿性磷酸酶化學發光體系。該清洗液使用的表面活性劑膽酸鈉，可溶解細胞膜，洗滌能力較強，檢測過程中已發生特異性結合的抗原或抗體容易被清洗掉，造成檢測結果不準確，并且膽酸鈉分子結構中含有具有反應活性的氮氫鍵，在免疫檢測時易發生非特異性反應。另外，該清洗液使用的防腐劑Proclin300或Proclin950，為同系列防腐劑，不能達到較好的防腐效果。

CN108546602A公開了一種化學發光免疫分析用清洗液，包括表面活性劑、非蛋白類蛋白保護劑和緩沖劑，該清洗液成分復雜，使用成本較高。該清洗液使用的酰胺類非離子表面活性劑，在洗滌震蕩過程中，容易產生氣泡，使得儀器液面高度探測不準，造成跳值現象。該清洗液pH為5.32，偏酸性，對堿性磷酸酶體系不適用。另外，該清洗液使用的防腐劑Proclin300，為單一防腐劑，不能達到較好的防腐效果。

有鑒于此，特提出本發明。