[發(fā)明專利]肝癌患者是否復(fù)發(fā)的預(yù)測標(biāo)志物及試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010513220.X
• 申請日: 2020-06-08
• 公開（公告）號: CN111748623B
• 公開（公告）日: 2022-11-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 時程程;王智慧;張華鵬;閻冰
• 申請（專利權(quán)）人: 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;G01N33/68;G01N30/88
• 代理公司: 鄭州豫開專利代理事務(wù)所(普通合伙) 41131
• 代理人: 朱俊峰

本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)分子診斷領(lǐng)域，具體涉及蛋白分子在肝癌診斷中的預(yù)后方法及其應(yīng)用；MRPL49蛋白，CUTA蛋白，TIAL1蛋白和CFL1蛋白中至少一種蛋白作為肝癌是否復(fù)發(fā)的標(biāo)志物在制備肝癌復(fù)發(fā)判斷試劑中的應(yīng)用。本發(fā)明采用LC?MS/MS質(zhì)譜分析法，將大量臨床樣本進(jìn)行質(zhì)譜分析后，通過未復(fù)發(fā)肝癌患者癌組織與復(fù)發(fā)肝癌患者癌組織相應(yīng)分子含量的差異倍數(shù)（大于2或小于0.5）可以確定4個蛋白分子具有良好的檢驗(yàn)效益；將蛋白作為生物標(biāo)志物對被試者的肝癌預(yù)后情況進(jìn)行診斷，簡單易行、診斷過程安全有效易為病人所接受、診斷標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)一受且主觀因素影響較小。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)分子診斷領(lǐng)域，具體涉及一種肝癌患者是否復(fù)發(fā)的預(yù)測標(biāo)志物及試劑盒。

背景技術(shù)

癌癥是一種對人類危害極大的疾病，根據(jù)相關(guān)流行病學(xué)資料顯示，每年大約會有1100萬新發(fā)癌癥。而在諸多癌癥之中，肝癌尤其兇險(xiǎn)，其發(fā)病率和病死率均較高，分別居世界第五位和第二位。

肝癌為發(fā)生于肝臟的惡性腫瘤，根據(jù)成因可分為原發(fā)性肝癌、轉(zhuǎn)移性肝癌兩大類，其中尤以原發(fā)性肝癌常見。根據(jù)肝炎-肝硬化-肝癌的進(jìn)程，加之我國又是一個乙肝大國，我國每年約有11萬人死于該病癥，而每年新增病例則占到全世界肝癌患者的54%，無論是發(fā)病率還是死亡率均呈現(xiàn)出快速增加態(tài)勢。

近年來，肝癌的診斷和治療都取得了相當(dāng)大的進(jìn)展，但是目前仍舊有很大一部分患者由于診斷不及時而導(dǎo)致預(yù)后不良。有相關(guān)的研究顯示：在亞洲人群中，能夠做到早期診斷（肝癌病灶小于2cm），手術(shù)后的5年生存率可以提高到近70%，而如果到了肝癌的中晚期，以目前的診療水平其預(yù)后僅比胰腺癌略好，5年生存率僅能達(dá)到16%。

肝細(xì)胞癌（簡稱肝癌）是我國高發(fā)腫瘤之一，其發(fā)病率、病死率高，嚴(yán)重威脅人類的生命健康。根治性手術(shù)切除治療是目前最主要的治療方式，但術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率仍達(dá)到40%～80%，是肝癌預(yù)后差的主要原因。肝癌的發(fā)生發(fā)展與相當(dāng)多的基因表達(dá)先關(guān)，這就涉及到許許多多的蛋白質(zhì)，這些蛋白在肝復(fù)發(fā)組織微血管形成，基質(zhì)破壞中起著重要作用。利用這些蛋白可以很好地掌握一些肝癌為何會發(fā)生復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。因此，我們應(yīng)當(dāng)尋找相應(yīng)的與肝癌復(fù)發(fā)有關(guān)的基因表達(dá)譜來確定肝癌的預(yù)后，以便及時對肝癌進(jìn)行術(shù)后干預(yù)。如果在手術(shù)切除的標(biāo)本中加以分析，并且能夠準(zhǔn)確地預(yù)測患者復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)，那么就可以讓高危復(fù)發(fā)人群加以重視，提高肝癌生存期。

因此，開發(fā)出診斷肝癌患者是否復(fù)發(fā)對于降低肝癌發(fā)病率和死亡率具有非常重要的現(xiàn)實(shí)意義。

發(fā)明內(nèi)容

（一）解決的技術(shù)問題

針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了肝癌患者是否復(fù)發(fā)的預(yù)測標(biāo)志物及試劑盒，采用質(zhì)譜分析的方法檢測標(biāo)志物的含量來判斷肝癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)；該方法簡單，實(shí)用，且通過多種小分子的檢測可以更好地提高檢測方法的靈敏度與特異性。

（二）技術(shù)方案

為實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明通過以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：

MRPL49蛋白，CUTA蛋白，TIAL1蛋白和CFL1蛋白中至少一種蛋白作為肝癌是否復(fù)發(fā)的標(biāo)志物在制備肝癌復(fù)發(fā)判斷試劑中的應(yīng)用。

MRPL49特異性核酸探針，CUTA特異性核酸探針，TIAL1特異性核酸探針和CFL1特異性核酸探針中至少一種特異性核酸探針在制備肝癌復(fù)發(fā)診斷試劑盒中的應(yīng)用。

一種用于肝癌復(fù)發(fā)診斷的試劑盒，包括特異性檢測MRPL49蛋白的試劑、特異性檢測CUTA蛋白的試劑、特異性檢測TIAL1蛋白的試劑和特異性檢測CFL1蛋白的試劑中至少一種試劑。

優(yōu)選地，特異性檢測MRPL49蛋白的試劑是特異性識別MRPL49蛋白核酸的引物或探針；特異性檢測CUTA蛋白的試劑是特異性識別CUTA蛋白核酸的引物或探針；特異性檢測TIAL1蛋白的試劑是特異性識別TIAL1蛋白核酸的引物或探針；特異性檢測CFL1蛋白的試劑是特異性識別CFL1蛋白核酸的引物或探針。