[發明專利]一種GSH響應型納米鉆石靶向藥物及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202010512739.6
• 申請日: 2020-06-08
• 公開（公告）號: CN111544596B
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發明（設計）人: 李英奇;武江濤;杜祥斌
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: A61K47/52
• 分類號: A61K47/52;A61K47/54;A61K47/60;A61K31/704;A61P35/00;B82Y5/00
• 代理公司: 山西五維專利事務所(有限公司) 14105
• 代理人: 張福增

1.一種GSH響應釋藥的納米鉆石靶向藥物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)精密稱取1.0mg真空干燥的羧基化納米鉆石(ND-COOH)，加入1-1.5mL的濃度0.1M、pH 5.8的MES緩沖溶液，并超聲分散30min形成懸濁液，隨后加入0.2mg EDC、0.25mg NHS，室溫攪拌反應6h，反應完畢后以15000rpm高速離心8min棄除上清液，得到活化羧基的納米鉆石沉淀物；接著將活化羧基的納米鉆石沉淀物迅速分散到1-1.5mL的濃度0.1M、pH 8.4的硼酸緩沖溶液中，經過短暫超聲分散形成懸濁液，快速加入0.3mg Boc-NH-PEG-NH₂，繼續室溫攪拌反應12h，待反應結束，以15000rpm高速離心8min移除上清液，并用去離子水高速離心洗滌3次，獲得ND-PEG-NH-Boc沉淀物；將制備的ND-PEG-NH-Boc超聲分散于1-1.5mL二氯甲烷中，滴入0.01mL三氟乙酸(TFA)，室溫攪拌1h，反應結束后以15000rpm高速離心8min除去上清液，用二氯甲烷洗滌2-3次，真空干燥得到ND-PEG-NH₂，簡寫為 NP ；

(2)稱取1.0mg上述制備好的ND-PEG-NH₂，加入1-1.5mL的濃度0.1M、pH 8.4的硼酸緩沖溶液并超聲分散30min，隨后移取0.05mg葉酸活性酯FA-NHS緩慢加入ND-PEG-NH₂反應液中，常溫下避光快速攪拌24h；等到反應結束，以15000rpm高速離心8min移除上清液，并用去離子水洗滌2-3次，真空干燥得到ND-PEG-FA沉淀物，簡寫為 NPF ；

(3)稱取1.0mg干燥的ND-PEG-FA沉淀物，加入1-1.5mL的濃度0.1M、pH 5.8的硼酸緩沖溶液并超聲分散30min形成懸濁液；精密稱取0.05mg 3,3'-二硫代二丙酸酐(DTDPA)溶解到0.8-1.0mL DMF中，隨后逐滴加入到ND-PEG-FA懸濁液中，并用三乙胺(TEA)調節pH至8.4，避光室溫攪拌反應12h；待反應結束，以15000rpm高速離心8min移除上清液，并用去離子水高速離心洗滌3次，真空干燥得到ND-PEG-FA/-SS-COOH，簡寫為 NPFSS ；

(4)稱取1.0mg干燥的ND-PEG-FA/-SS-COOH，加入1-1.5mL的濃度0.1M、pH 5.8的MES緩沖溶液并超聲分散30min，隨后依次加入0.2mg EDC和0.25mg NHS，室溫下攪拌反應6h；待反應完畢，以15000rpm高速離心8min移除上清液，并用去離子水高速離心洗滌3次，接著加入1-1.5mL濃度0.1M、pH 8.4的硼酸緩沖溶液超聲分散30min，隨后逐滴加入0.12mg濃度為1.0mg/mL的鹽酸阿霉素的DMSO溶液，滴入0.001mL TEA，繼續反應24h；待反應結束，以15000rpm高速離心8min，并依次用去離子水和無水乙醇洗滌至上清液無色，真空干燥得到ND-PEG-FA/-SS-DOX，簡寫為 NPFSSD 。

2.如權利要求1所述方法制備得到的GSH響應型靶向納米鉆石藥物。

3.如權利要求2所述的GSH響應型靶向納米鉆石藥物在制備抗腫瘤藥物中的應用。