[發明專利]核糖激酶突變體及其應用有效
| 申請號: | 202010512230.1 | 申請日: | 2020-06-08 |
| 公開(公告)號: | CN111549012B | 公開(公告)日: | 2022-05-13 |
| 發明(設計)人: | 周志輝;劉德俊;張曉紅 | 申請(專利權)人: | 石家莊創組生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N9/12 | 分類號: | C12N9/12;C12N15/54;C12P19/30 |
| 代理公司: | 石家莊國域專利商標事務所有限公司 13112 | 代理人: | 張莉靜 |
| 地址: | 050000 河北省石家莊市裕*** | 國省代碼: | 河北;13 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 核糖 激酶 突變體 及其 應用 | ||
1.一種核糖激酶突變體,其特征是,其氨基酸序列如序列表中的序列1所示。
2.編碼權利要求1所述核糖激酶突變體的基因。
3.權利要求1所述的核糖激酶突變體在制備煙酰胺單核苷酸中的應用。
4.根據權利要求3所述的應用,其特征是,以D-核糖為出發原料,應用核糖激酶突變體、核糖磷酸焦磷酸激酶以及煙酰胺單核苷酸腺苷轉移酶進行級聯反應制備得到煙酰胺單核苷酸。
5.根據權利要求3所述的應用,其特征是,以D-核糖為出發原料,應用固定化核糖激酶突變體、固定化核糖磷酸焦磷酸激酶以及固定化煙酰胺單核苷酸腺苷轉移酶進行級聯反應制備得到煙酰胺單核苷酸。
6.根據權利要求5所述的應用,其特征是,包括以下步驟:
(a)分別制備固定化核糖激酶突變體、固定化核糖磷酸焦磷酸激酶以及固定化煙酰胺單核苷酸腺苷轉移酶;
(b)配制反應體系,所述反應體系包含:40mM D-核糖、40mM ATP、10mM 氯化鎂、5mM 氯化錳、10g/L固定化核糖激酶、10g/L固定化核糖磷酸焦磷酸激酶、15g/L固定化煙酰胺磷酸核糖轉移酶;反應體系pH控制在8.0,溫度控制在37℃,進行攪拌反應;
(c)反應完成后,將反應物過濾,濾除的三種固定化酶進行循環使用,濾液經純化、凍干后即為煙酰胺單核苷酸固體。
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