[發明專利]九項呼吸道病原體核酸標記試劑盒及使用方法

在審

• 申請號: 202010501987.0
• 申請日: 2020-06-04
• 公開（公告）號: CN111560481A
• 公開（公告）日: 2020-08-21
• 發明（設計）人: 馬明星;魏其林;文娟
• 申請（專利權）人: 昆明寰基生物芯片產業有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/689;C12Q1/6837;C12Q1/14;C12Q1/04;C12N15/11
• 代理公司: 昆明盛鼎宏圖知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 53203
• 代理人: 王輝

1.九項呼吸道病原體核酸標記試劑盒，其特征在于，所述的核酸標記試劑盒包括用于標記US-CDC2019-nCoV-N2的引物對：US CDC2019-nCoV_N2-FP、US

CDC2019-nCoV_N2-RP-CY3與探針：NH2-Oligo(15T)-ACAATTTGCCCCCAGCGCTTCAG；或用于標記2019-nCoV nsp14的引物對：2019-nCoV nsp14FP、2019-nCoV nsp14RP-CY3與探針：NH2-Oligo(15T)-TAGTTGTGATGCAATCATGACTAG；

和用于標記H1N1的引物對：H1N1-FP、H1N1-RP-CY3與探針：

NH2-Oligo(15T)-GCAATACAACTTGTCAGACA；

和用于標記H3N2的引物對：H3N2-FP、H3N2-RP-CY3與探針：

NH2-Oligo(15T)-ATGATGTGCCGGATTATGCCT；

和用于標記IFV-B的引物對：IFV-B-FP、IFV-B-RP-cy3與探針：

NH2-Oligo(15T)-ACTCACTCTTCGAGCGTCTTAA；

和用于標記RSV-A的引物對：RSV-A-FP、RSV-A-RP-cy3與探針：

NH2-Oligo(15T)-TGAAACTATTGCACAAAGTGGG；

和用于標記RSV-B的引物對：RSV-B-FP、RSV-B-RP-cy3與探針：

NH2-Oligo(15T)-ACAAGAAATACACTGAATATA；

和用于標記HI的引物對：HI-FP、HI-RP-cy3與探針：NH2-Oligo(15T)-ACGGTGCATTACGCAATC；

和用于標記SP的引物對：SP-FP、SP-RP-cy3與探針：NH2-Oligo(15T)-AATGCCTTTATCCAGTC；

和用于標記MP的引物對：MP-FP、MP-RP-cy3與探針：

NH2-Oligo(15T)-TTGCTGGTCACGATTGTTG。

2.根據權利要求1所述的九項呼吸道病原體核酸標記試劑盒，其特征在于，所述的核酸標記試劑盒包括內參對照引物對：IC-FP、IC-RP-CY3與探針：NH2-Oligo(15T)-ATTGTAGAAGGTGTGGTG。

3.根據權利要求1所述的九項呼吸道病原體核酸標記試劑盒，其特征在于，所述的核酸標記試劑盒包括雜交對照探針HC：NH2-Oligo(15T)-TTACTTCAGGGTGAGGATG。

4.根據權利要求1所述的九項呼吸道病原體核酸標記試劑盒，其特征在于，所述的核酸標記試劑盒包括陰性質控探針NC：NH2-TTTTTTTTTTTTTTTT。

5.根據權利要求1所述的九項呼吸道病原體核酸標記試劑盒，其特征在于，所述的核酸標記試劑盒的RT-PCR擴增反應體系：臨床模板或陰陽性質控模板：4.0μL、RT-PCR擴增試劑混合物12.5μL、RT-PCR擴增引物混合物7.5μL、RT-PCR酶混合物1μL，總體積25.0μL。

6.根據權利要求1所述的九項呼吸道病原體核酸標記試劑盒，其特征在于，所述的核酸標記試劑盒的RT-PCR擴增反應參數：50℃20min×1cycle；95℃5min×1cycle；(94℃20s，55℃30s，65℃30s)×35cycles；72℃3min×1cycle；12℃保存。