[發明專利]一種用離子轉運蛋白促進谷氨酸棒桿菌合成氨基酸的方法有效
| 申請號: | 202010501734.3 | 申請日: | 2020-06-04 |
| 公開(公告)號: | CN111718882B | 公開(公告)日: | 2022-06-10 |
| 發明(設計)人: | 饒志明;徐美娟;劉晶;楊套偉;張顯 | 申請(專利權)人: | 江南大學 |
| 主分類號: | C12N1/21 | 分類號: | C12N1/21;C12P13/14;C12P13/10;C12R1/15 |
| 代理公司: | 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211 | 代理人: | 仇鈺瑩 |
| 地址: | 214000 江蘇*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 離子 轉運 蛋白 促進 谷氨酸 桿菌 合成 氨基酸 方法 | ||
1.一種重組菌,其特征在于,所述重組菌過表達功能性攝鉀蛋白CglK和陽離子轉運ATP酶CTAP;所述CglK的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示,所述CTAP的氨基酸序列如SEQ IDNO.4所示,所述重組菌以保藏編號為CCTCC NO:M 2013418的谷氨酸棒桿菌(Corynebacterium glutamicum)G01為宿主,所述重組菌以pDXW-10為表達載體。
2.一種提高棒桿菌氨基酸產量的方法,其特征在于,在保藏編號為CCTCC NO:M2013418的谷氨酸棒桿菌(Corynebacterium glutamicum)G01中過表達功能性攝鉀蛋白CglK和陽離子轉運ATP酶CTAP,生產L-谷氨酸;編碼所述功能性攝鉀蛋白CglK的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,編碼所述陽離子轉運ATP酶CTAP的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.如權利要求2所述的方法,其特征在于,將OD600為20~30的重組菌以5~15%的添加量接入發酵體系,發酵溫度為25~35℃,pH值為6.5~7.5。
4.如權利要求3所述的方法,其特征在于,所述發酵液中含有葡萄糖50~70g/L,酵母浸粉5~10g/L,K3PO4 3~4g/L,MgSO4·7H2O 0.1~1g/L,(NH4)2SO4 10~25g/L,FeSO4·7H2O0.01~0.05g/L,MnSO4·H2O 0.01~0.05g/L。
5.權利要求1所述重組菌,或權利要求2~4任一所述方法在生產L-谷氨酸的產品中的應用。
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