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[發明專利]一種用離子轉運蛋白促進谷氨酸棒桿菌合成氨基酸的方法有效

專利信息
申請號: 202010501734.3 申請日: 2020-06-04
公開(公告)號: CN111718882B 公開(公告)日: 2022-06-10
發明(設計)人: 饒志明;徐美娟;劉晶;楊套偉;張顯 申請(專利權)人: 江南大學
主分類號: C12N1/21 分類號: C12N1/21;C12P13/14;C12P13/10;C12R1/15
代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211 代理人: 仇鈺瑩
地址: 214000 江蘇*** 國省代碼: 江蘇;32
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摘要:
搜索關鍵詞: 一種 離子 轉運 蛋白 促進 谷氨酸 桿菌 合成 氨基酸 方法
【權利要求書】:

1.一種重組菌,其特征在于,所述重組菌過表達功能性攝鉀蛋白CglK和陽離子轉運ATP酶CTAP;所述CglK的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示,所述CTAP的氨基酸序列如SEQ IDNO.4所示,所述重組菌以保藏編號為CCTCC NO:M 2013418的谷氨酸棒桿菌(Corynebacterium glutamicum)G01為宿主,所述重組菌以pDXW-10為表達載體。

2.一種提高棒桿菌氨基酸產量的方法,其特征在于,在保藏編號為CCTCC NO:M2013418的谷氨酸棒桿菌(Corynebacterium glutamicum)G01中過表達功能性攝鉀蛋白CglK和陽離子轉運ATP酶CTAP,生產L-谷氨酸;編碼所述功能性攝鉀蛋白CglK的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,編碼所述陽離子轉運ATP酶CTAP的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.如權利要求2所述的方法,其特征在于,將OD600為20~30的重組菌以5~15%的添加量接入發酵體系,發酵溫度為25~35℃,pH值為6.5~7.5。

4.如權利要求3所述的方法,其特征在于,所述發酵液中含有葡萄糖50~70g/L,酵母浸粉5~10g/L,K3PO4 3~4g/L,MgSO4·7H2O 0.1~1g/L,(NH4)2SO4 10~25g/L,FeSO4·7H2O0.01~0.05g/L,MnSO4·H2O 0.01~0.05g/L。

5.權利要求1所述重組菌,或權利要求2~4任一所述方法在生產L-谷氨酸的產品中的應用。

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