[發(fā)明專利]一種提高桃金娘種子組培萌發(fā)和降低污染率的處理方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010500496.4
• 申請日: 2020-06-04
• 公開（公告）號: CN111557138B
• 公開（公告）日: 2022-02-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄧書林;楊玲;邱聲祥;林丹妮;李順
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院華南植物園
• 主分類號: A01C1/00
• 分類號: A01C1/00;A01C1/08;A01H4/00
• 代理公司: 廣州廣典知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44365
• 代理人: 萬志香

1.一種提高桃金娘種子組培萌發(fā)和降低污染率的處理方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）種子預(yù)處理：將剝離后的桃金娘種子用殺菌溶液消毒，水清洗后干燥；

（2）浸種：將步驟（1）預(yù)處理后的種子依次用CaCl₂水溶液和赤霉素水溶液浸泡，水清洗后干燥；

（3）濕沙處理：將步驟（2）所得浸種后的種子與濕潤河沙混合，于0~8℃下進(jìn)行堆積；

（4）種子無菌處理：將步驟（3）所得濕沙處理后的種子用水清洗，依次用乙醇水溶液、氯化汞水溶液和次氯酸鈉水溶液消毒，每次消毒后用水清洗；

（5）萌發(fā)培養(yǎng)：將步驟（4）所得無菌處理后的種子干燥，置于培養(yǎng)基中培養(yǎng)；所述桃金娘種子為從桃金娘干果中剝離所得種子；所述桃金娘干果為采摘后儲藏5~6個月后的桃金娘干果；

步驟（3）中，濕潤河沙的濕度為23~27%；

步驟（4）中，所述乙醇水溶液的體積分?jǐn)?shù)為73~77%，乙醇水溶液消毒的時長為8~12s；所述氯化汞水溶液的質(zhì)量濃度為0.08~0.1%，氯化汞水溶液消毒的時長為8~12min；所述次氯酸鈉水溶液的質(zhì)量濃度為2~4%，次氯酸鈉水溶液消毒的時長為8~12min。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述CaCl₂水溶液的濃度為300~500mg/L。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（4）中，所述乙醇水溶液的體積分?jǐn)?shù)為75%，乙醇水溶液消毒的時長為10s；所述氯化汞水溶液的質(zhì)量濃度為0.1%，氯化汞水溶液消毒的時長為10min；所述次氯酸鈉水溶液的質(zhì)量濃度為3%，次氯酸鈉水溶液消毒的時長為10min。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述濕潤河沙的粒徑為1~3mm。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（3）中，所述堆積的時長為35~45天，每8~12天翻動一次種子。

6.根據(jù)權(quán)利要求1~5任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，步驟（2）中，所述赤霉素水溶液的濃度為300~700mg/L。

7.根據(jù)權(quán)利要求1~5任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，步驟（5）中，所述培養(yǎng)基為MS復(fù)合培養(yǎng)基、1/2MS復(fù)合培養(yǎng)基或無菌水浸泡的無菌紗布；

所述MS復(fù)合培養(yǎng)基包括以下組分：MS培養(yǎng)基、0.8~1.2mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸、0.4~0.6mg/L激動素和30~50mg/L 赤霉素；

所述1/2MS復(fù)合培養(yǎng)基包括以下組分：1/2MS培養(yǎng)基、0.8~1.2mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、0.4~0.6mg/L激動素和30~50mg/L赤霉素。

8.根據(jù)權(quán)利要求1~5任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，步驟（1）中，所述殺菌溶液為4~6wt% CuSO₄水溶液，殺菌溶液消毒的時間為25~35min。

9.根據(jù)權(quán)利要求1~5任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，步驟（2）中所述浸泡為避光4~6℃浸泡；步驟（5）中所述培養(yǎng)的溫度為25~28℃。

10.根據(jù)權(quán)利要求1~5任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，步驟（1）所述剝離為人工徒手剝離；步驟（4）的無菌處理操作和步驟（5）的萌發(fā)培養(yǎng)操作均在無菌環(huán)境下進(jìn)行。