[發(fā)明專利]一種響應(yīng)面法優(yōu)化提取新鮮煙葉FI蛋白的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010499012.9 | 申請日： | 2020-06-04 |
| 公開（公告）號： | CN111606985A | 公開（公告）日： | 2020-09-01 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 李霓藝;吳擁軍 | 申請（專利權(quán)）人： | 貴州大學(xué) |
| 主分類號： | C07K14/415 | 分類號： | C07K14/415;C07K1/30;C07K1/14 |
| 代理公司： | 貴陽東圣專利商標(biāo)事務(wù)有限公司 52002 | 代理人： | 袁慶云 |
| 地址： | 550025 貴州省*** | 國省代碼： | 貴州;52 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 響應(yīng) 優(yōu)化 提取 新鮮 煙葉 fi 蛋白 方法 | ||
本發(fā)明公開了一種響應(yīng)面法優(yōu)化提取新鮮煙葉FI蛋白的方法，包括：以新鮮煙葉100g計(jì)，加入500?2000ml的0.05?0.1M磷酸緩沖液，用膠體磨勻漿5?9min；勻漿后低溫靜置20?60min，再用200目濾布壓榨過濾漿液，得到濾液；將濾液用堿性試劑調(diào)節(jié)pH為7.6?8.6；使用硅藻土對濾液進(jìn)行真空抽濾除雜；將除雜后的濾液置于30?70℃恒溫水浴鍋中，保溫提取時間為10?50min，保溫結(jié)束后降至室溫；將濾液置于3000?4000rpm離心機(jī)中離心5?20min，棄掉上清液，收集沉淀；將沉淀進(jìn)行冷凍干燥溶液至粉末狀，即可得新鮮煙葉FI蛋白產(chǎn)物。本發(fā)明提取蛋白純度高、操作簡單，試劑成本低。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于植物蛋白的提取領(lǐng)域，具體來說涉及一種響應(yīng)面法優(yōu)化提取新鮮煙葉FI蛋白的方法。
背景技術(shù)
隨著人口增長，世界對高質(zhì)量蛋白質(zhì)的需求與日俱增。煙葉中含有豐富的蛋白質(zhì)，新鮮煙葉FI蛋白含有硒元素，其特征為低毒高效，相較于非含硒蛋白，新鮮煙葉FI蛋白清除自由基、防護(hù)紅細(xì)胞溶血等方面都較為優(yōu)秀，所以開發(fā)利用煙葉FI蛋白資源變得尤為重要。
目前，已有研究報導(dǎo)大都以新鮮煙葉為原料提取其中的可溶性蛋白質(zhì)。傳統(tǒng)的提取新鮮煙葉FI蛋白的方法多采用超速冷凍離心、超濾等步驟，操作復(fù)雜且所需時間較長，耗費(fèi)試劑成本高。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述缺點(diǎn)而提供的一種提取蛋白純度高、操作簡單，試劑成本低的響應(yīng)面法優(yōu)化提取新鮮煙葉FI蛋白的方法。
本發(fā)明目的及解決其主要技術(shù)問題是采用以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的：
本發(fā)明的一種響應(yīng)面法優(yōu)化提取新鮮煙葉FI蛋白的方法，包括以下步驟：
(1)勻漿：以新鮮煙葉100g計(jì)，加入500-2000ml的0.05-0.1M磷酸緩沖液，用膠體磨勻漿5-9min；
(2)靜置：勻漿后低溫靜置20-60min，再用200目濾布壓榨過濾漿液，得到濾液；
(3)調(diào)pH：將濾液用堿性試劑調(diào)節(jié)pH為7.6-8.6；
(4)脫色除雜：使用硅藻土對濾液進(jìn)行真空抽濾除雜；
(5)熱沉提取：將除雜后的濾液置于30-70℃恒溫水浴鍋中，保溫提取時間為10-50min，保溫結(jié)束后降至室溫；
(6)分離：將濾液置于3000-4000rpm離心機(jī)中離心5-20min，棄掉上清液，收集沉淀；
(7)干燥：將沉淀進(jìn)行冷凍干燥溶液至粉末狀，即可得新鮮煙葉FI蛋白產(chǎn)物。
上述的一種響應(yīng)面法優(yōu)化提取新鮮煙葉FI蛋白的方法，其中：步驟(1)中優(yōu)選勻漿時間為7min。
上述的一種響應(yīng)面法優(yōu)化提取新鮮煙葉FI蛋白的方法，其中：步驟(4)中優(yōu)選調(diào)節(jié)pH值為8.4。
上述的一種響應(yīng)面法優(yōu)化提取新鮮煙葉FI蛋白的方法，其中：步驟(5)中優(yōu)選保溫提取時間為30min。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比,具有明顯的有益效果,從以上技術(shù)方案可知:本發(fā)明以新鮮煙葉為原料，利用熱沉法提取新鮮煙葉FI蛋白，在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)下，進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn)，響應(yīng)面法可以解決多變量問題，通過回歸方程的分析得到新鮮煙葉FI蛋白最佳的工藝條件范圍，使得本發(fā)明提取的蛋白純度高，操作簡單，試劑成本低。
具體實(shí)施方式
實(shí)驗(yàn)例：
1.影響新鮮煙葉FI蛋白提取的單因素實(shí)驗(yàn)
1.1勻漿時間對新鮮煙葉FI蛋白提取率的影響
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