[發明專利]一種抗CD19的納米抗體、編碼基因、重組納米抗體、重組載體、重組菌株和應用

有效

• 申請號: 202010492730.3
• 申請日: 2020-06-03
• 公開（公告）號: CN111574630B
• 公開（公告）日: 2021-12-14
• 發明（設計）人: 張愛君;徐廣賢;李光琪;楚元奎
• 申請（專利權）人: 寧夏醫科大學
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C07K16/46;C12N15/13;C12N15/70;C12N1/21;A61K39/395;A61P35/00;G01N33/574
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 代芳

本發明提供了一種抗CD19的納米抗體、編碼基因、重組納米抗體、重組載體、重組菌株和應用，屬于免疫學技術領域，本發明提供的所述納米抗體的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；本發明所述重組納米抗體的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。本發明提供的所述抗CD19的重組納米抗體由包括駝源的納米抗體基因和人IgG Fc段基因融合表達，能夠利用所述重組菌株進行穩定表達，并能夠特異性識別CD19抗原。

技術領域

本發明屬于免疫學技術領域，尤其涉及一種抗CD19的納米抗體、編碼基因、重組載體、重組菌株和應用。

背景技術

駱駝科動物體內存在一種天然缺失輕鏈的抗體，即重鏈抗體。該抗體只包含一個重鏈可變區(VHH)和兩個常規的重鏈恒定區CH2和CH3區，它不像人工改造的單鏈抗體片段容易相互沾粘，甚至聚集成塊。單獨克隆并表達出的VHH(variable domain ofheavy-chainantibody,VHH)結構具有與原重鏈抗體相當的結構穩定性以及與抗原的結合活性，是目前已知的可結合目標抗原的最小單位。其分子量只有15KD，結構直徑2.5nm，長4nm，是普通IgG的十幾分之一，所以稱為納米抗體(nanobody,Nb)。納米抗體由4個保守序列和3個互補決定區組成，且有較長的CDR1和CDR3區，使其有穩定的結構。較長的CDR3區凸出的環狀結構，使納米抗體與抗原有很高的結合力。納米抗體有高的親水性，并且由于VHH片段與人的VH序列具有高度同源性，具有較低的免疫原性，可以對其進行人源化改造和修飾。納米抗體可以在原核細胞和真核細胞中高效表達。納米抗體還具有獨特的理化性質，在部分高溫、酸性等極端條件下依然可以維持活性，納米抗體具有良好的組織穿透能力?；谝陨蟽烖c，納米抗體在一些疾病的診斷和治療中具有廣闊的應用前景。

人白細胞分化抗原19(CD19)分子是B淋巴細胞表面的跨膜蛋白，對 B細胞的活化、信號傳導和生長調節具有重要的作用，是一種功能受體分子。 CD19在B淋巴細胞系統的惡性腫瘤中廣泛表達。例如：多數急性淋巴細胞白血病、慢性淋巴細胞白血病和B細胞淋巴瘤。在對過敏性紫癜病因的研究中發現，檢測過敏性紫癜性腎炎患兒外周血淋巴細胞CD19發現，其表達率較高。同時，在肝硬化患者外周血中CD19的細胞表達水平能反應患者的肝臟損傷程度。