[發明專利]一種簡單高效的胚胎培養液滴的制作方法

在審

• 申請號: 202010471808.3
• 申請日: 2020-05-29
• 公開（公告）號: CN111548986A
• 公開（公告）日: 2020-08-18
• 發明（設計）人: 曹祖兵;張翔棟;李運生;張運海
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學
• 主分類號: C12N5/073
• 分類號: C12N5/073
• 代理公司: 合肥市道爾知識產權代理有限公司 34169
• 代理人: 石佩

本發明涉及一種簡單高效的胚胎培養液滴的制作方法，包括如下步驟：將培養皿、移液器、吸頭、和環形通道移液裝置置于超凈臺進行紫外線照射處理；將胚胎培養液預熱；將預熱后的胚胎培養液和石蠟油放置超凈臺中；調整移液器的量程至所需量程，將移液器與環形移液裝置相連接，安裝吸頭并吸取胚胎培養液；將移液器處于培養皿中間位置推出液體，添加石蠟油覆蓋培養液滴，蓋上培養皿蓋，拿入CO₂培養箱即可；所述的環形通道移液裝置包括移液器結合部、腔室和吸頭座，所述的吸頭座設置多個，每個吸頭座上套設一個吸頭。本發明胚胎培養液滴的制作方法不僅操作容易，而且簡單高效。

技術領域

本發明涉及生物領域，具體涉及一種簡單高效的胚胎培養液滴的制作方法。

背景技術

近年來隨著胚胎工程技術的不斷進步，促進了相關行業的蓬勃發展，如輔助生殖技術，輔助生殖技術就是用人工的方法幫助精子和卵子相互結合的技術，它主要包括人工授精、體外受精、體細胞核移植、胚胎移植等。輔助生殖技術早已在豬牛羊等一般家畜生產中得到了廣泛的應用。通過在畜牧業中使用輔助生殖技術可以加速優良家畜品種的遺傳改良進程，促進優良種群繁育；生產珍貴的醫用蛋白；保護瀕危動物等。例如通過體外受精和胚胎移植技術在家畜中的聯合應用可以使雌性優良個體的繁殖能力得到充分的發揮，縮短了優良個體的繁殖周期，增加了繁殖數量。通過體細胞核移植技術在家畜中的應用能夠生產珍貴的醫用蛋白；克隆動物的組織、器官做移植的供體；保護瀕危物種，增加物種的存活數量等。從首例試管嬰兒誕生之后，輔助生殖技術在人類生殖醫學中也得到了廣泛的應用，主要作為人類不孕癥治療的重要手段，其次也能夠通過制備人類疾病動物模型來更加深入的研究人類的疾病。對于輔助生殖技術來說，胚胎體外生產是不可缺少的環節，胚胎體外生產的主要內容包括卵母細胞的體外成熟、體外受精及早期胚胎的體外培養。由于胚胎體外培養是支持胚胎著床前發育的人工子宮，所以對離體后的胚胎進行體外培養作為一個關鍵環節越來越受到重視。

胚胎體外培養有微滴法、成組培養、微流體等方法，近年來，雖然胚胎培養體系已從靜態的微滴法逐漸發展為效果更好的動態微流體培養，但動態培養體系操作較為復雜，限制了其廣泛應用，而靜置培養體系隨著胚胎培養液的不斷改進和培養條件的逐步完善，其效率和質量有了很大的提高，而且培養效果穩定、易操作，其中微滴法是目前最常用的培養方法。常常使用移液器制作液滴。現在實驗室使用微滴法來制作液滴的方式都是用移液器一滴一滴地滴加，用這種方法制作液滴還是有些繁瑣，效率也有待提升，而且需要大量的練習才能保證做出的液滴不串滴，還存在液滴制作的時間差。本發明就是通過在傳統胚胎培養液滴的制作方法的基礎上進行改進來設計出一個更好的胚胎培養液滴的制作方法，從而能夠消除液滴制作的時間差、簡化繁瑣的操作過程、降低操作難度和提高效率。

發明內容

本發明的目的在于：提供一種簡單高效的胚胎培養液滴的制作方法，以解決上述背景技術中提出的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：

一種簡單高效的胚胎培養液滴的制作方法，包括如下步驟：

S1：將培養皿、移液器、吸頭、和環形通道移液裝置置于超凈臺進行紫外線照射處理；

S2：將胚胎培養液預熱；

S3：將預熱后的胚胎培養液和石蠟油放置超凈臺中；

S4：調整移液器的量程至所需量程，將移液器與環形移液裝置相連接，安裝吸頭并吸取胚胎培養液；將移液器處于培養皿中間位置推出液體，

S5：添加石蠟油覆蓋培養液滴，蓋上培養皿蓋，拿入CO₂培養箱即可；

其中，所述的環形通道移液裝置包括移液器結合部、腔室和吸頭座，所述的吸頭座設置多個，每個吸頭座上套設一個吸頭。

優選地，步驟S1中紫外線照射處理時間為25-35min。