[發明專利]一種驢用精子稀釋液及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202010471143.6
• 申請日: 2020-05-28
• 公開（公告）號: CN111493062A
• 公開（公告）日: 2020-08-07
• 發明（設計）人: 劉年
• 申請（專利權）人: 太東（鎮江）生物科技有限公司
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 南京禾易知識產權代理有限公司 32320
• 代理人: 張松云

一種驢用精子稀釋液，以所述驢用精子稀釋液的質量計，包括以下組分：Tris 30.4±0.5g，檸檬酸17.0±0.2g，葡萄糖7.5±0.1g，牛磺酸12.5±0.2mg，丙酮酸鈉36.3±0.5mg，果糖1.5±0.1g，改性卵磷脂2±0.1g，己酮可可堿1.5±0.1g，大豆異黃酮25.4±0.3mg，以注射用水溶解。本發明通過采用改性卵磷脂，規避了普通磷脂中不規則顆粒對于精子的傷害，同時起到調節滲透壓，保護精子細胞膜的作用，有利于提高精子存活率；采用己酮可可堿，使精子胞漿內的cAMP濃度增加，激活cAMP依賴性蛋白酶，使精子尾部磷酸化，增強其運動能力；采用大豆異黃酮，清除精子在體外環境中過多的自由氧，避免精子受到氧化損傷，維持精子活力，提高人工授精的成功率。

技術領域

本發明涉及一種驢用精子稀釋液及其制備方法和應用。

背景技術

驢是農役的重要資源，肉、藥、皮革的輔助性資源，但由于養殖效益差的原因，近年來存欄數量持續減少。采用人工授精技術，不僅能夠保留優秀公驢的遺傳信息資源，改良驢種，同時能夠在養殖少量公驢，降低飼養成本的情況下保證較高的繁育率。

在驢的人工授精技術中，取得種驢的鮮精后，需使用精子稀釋液將一份原精稀釋為若干份精液，向處于發情期的多頭母驢配種。

目前市面上已有的部分精子稀釋液添加了卵黃等物質，但是卵黃來源于雞蛋，存在潛在生物風險，卵黃的生物活性蛋白物質存在潛在過敏反應，在后期清洗中難以去除。現有的稀釋液不能有效地向鮮精提供營養物質，導致稀釋后的精液活力低，最終導致母驢的受孕率低。

發明內容

本發明克服現有技術存在的缺陷，提出了一種精子稀釋液及其制備方法，解決現有產品中添加卵黃物質帶來的生物安全問題，以及稀釋后精子活力不足的問題。

為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案是：以所述驢用精子稀釋液的質量計，所述驢用精子稀釋液包括以下組分：Tris 30.4±0.5g，檸檬酸17.0±0.2g，葡萄糖7.5±0.1g，牛磺酸12.5±0.2mg，丙酮酸鈉36.3±0.5mg，果糖1.5±0.1g，改性卵磷脂2±0.1g，己酮可可堿1.5±0.1g，大豆異黃酮25.4±0.3mg，以注射用水溶解。

進一步地，所述驢用精子稀釋液中還包括以下組分：谷氨酰胺146.1±0.5mg，甘氨酸7.5±0.1mg，慶大霉素1000000U。

一種驢用精子稀釋液的制備方法，包括如下步驟：

S1、按配方稱取30.4±0.5g Tris、17.0±0.2g檸檬酸、7.5±0.1g葡萄糖、12.5±0.2mg牛磺酸、36.3±0.5mg丙酮酸鈉和1.5±0.1g果糖，在800mL注射用水中溶解；

S2、向S1中混合液中加入2±0.1g改性卵磷脂、1.5±0.1g大豆異黃酮、25.4±0.3mg己酮可可堿定容至1L后采用0.22μm濾膜過濾；

S3、將S2中所得溶液按每瓶200mL無菌分裝，2-8℃避光保存。

進一步地，所述S1混合液中還加入有146.1±0.5mg谷氨酰胺、7.5±0.1mg甘氨酸和1000000U慶大霉素。

進一步地，所述S2中所得精子稀釋液滲透壓為295-305mOsm/Kg，pH為7.0～7.3。

進一步地，所述精子稀釋液用于人工授精中驢精液的稀釋。

與現有技術相比，本發明的有益效果包括：

1)通過采用改性卵磷脂，比普通卵磷脂可更好的分散于溶液中，規避了普通磷脂中不規則顆粒對于精子的傷害，同時起到調節滲透壓，降低精液中電解質濃度，保護精子膜的作用，有利于精子存活；