[發明專利]一種提高凝結芽孢桿菌BC99活性和耐受性的方法及其應用

有效

• 申請號: 202010469190.7
• 申請日: 2020-05-28
• 公開（公告）號: CN111621461B
• 公開（公告）日: 2022-10-11
• 發明（設計）人: 方曙光;皮杜娟;高奮
• 申請（專利權）人: 武漢微康益生菌研究院有限公司
• 主分類號: C12N1/38
• 分類號: C12N1/38;C12N1/20;C12R1/07
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 王士強

本發明公開了一種提高凝結芽孢桿菌BC99活性和耐受性的方法及其應用，通過將胞外多糖作為凝結芽孢桿菌的生長碳源，有效提高了其生物活性和耐受性。

技術領域

本發明涉及微生物技術領域，特別涉及一種提高凝結芽孢桿菌BC99活性和耐受性的方法及其應用。

背景技術

胞外多糖是細菌在生長以及代謝的過程中產生并且分泌到細胞壁的外部的一類化合物，其目的是幫助微生物適應環境。胞外多糖易溶于水，在有機溶劑中溶解度較小，酸性條件下穩定。胞外多糖具有抗氧化、抗突變、抗炎、抗過敏等生理功能，還可提高對腸道表面的非特異性粘附，調節免疫系統提高機體抗腫瘤作用。

凝結芽孢桿菌，可用于治療腸道菌群失調引起的疾病，在現有技術中多集中于其高密度發酵、干菌粉制備及抗逆性等方面，但是對提高其活性和耐受性的研究還較少。凝結芽孢桿菌BC99雖然抗逆性較強，但有研究表明在酸性條件下其熱耐受性下降，生長被抑制，且凝結芽孢桿菌BC99在腸道上皮細胞粘附性較弱，不易在腸道定植。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明提供一種提高凝結芽孢桿菌BC99活性和耐受性的方法及其應用，可有效提高凝結芽孢桿菌BC99的活性及其耐受性。

本發明采用的技術方案如下：

本發明提供一種提高凝結芽孢桿菌BC99活性和耐受性的方法，采用胞外多糖作為凝結芽孢桿菌的生長碳源。

上述方案的進一步方案為，所述胞外多糖由長雙歧桿菌BL21發酵制備。

上述方案的進一步方案為，所述胞外多糖的濃度為2g/L-10g/L。

上述方案的優選方案為，所述胞外多糖的濃度為4g/L。

另一方面，本發明還提供一種改良MRS培養基，所述改良MRS培養基含有胞外多糖。

上述方案的優選方案為，所述培養基含有胞外多糖的濃度為2g/L-10g/L。

上述方案的優選方案為，所述培養基含有胞外多糖的濃度為4g/L。

再一方面，本發明還提供一種固態菌劑，所述固態菌劑的制備方法如下：利用改良MRS培養基培養凝結芽孢桿菌BC99，培養至培養液OD600值為0.6 后，再培養6h，混勻，通過冷凍干燥工藝將培養液進行冷凍干燥制備固態菌劑，冷凍干燥條件為預凍至-50℃，保持5h，一次干燥溫度設置為-30℃，干燥30h，二次干燥設置25℃，干燥20h，即得固態菌劑。

與現有技術相比，本發明的技術方案具有如下優點和有益效果：

本發明提供的提高凝結芽孢桿菌BC99活性和耐受性的方法及其應用，通過將胞外多糖作為凝結芽孢桿菌的生長碳源，有效提高了其生物活性和耐受性。

具體實施方式

下面將結合本發明實施例，對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有作出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發明保護的范圍。

需要說明的是，本發明的說明書和權利要求書中的術語“包括”和“具有”以及他們的任何變形，意圖在于覆蓋不排他的包含，例如，包含了一系列步驟或單元的過程、方法、裝置、產品或設備不必限于清楚地列出的那些步驟或單元，而是可包括沒有清楚地列出的或對于這些過程、方法、產品或設備固有的其他步驟或單元。

以下實施例中使用的凝結芽孢桿菌(Bacillus coagulans)BC99保藏編號為CGMCC No.19487，保藏日期為2020年3月18日，保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3 號。