[發明專利]肉蓯蓉多糖在促進雌性生殖干細胞增殖分化方面的應用

有效

• 申請號: 202010467245.0
• 申請日: 2020-05-28
• 公開（公告）號: CN111575230B
• 公開（公告）日: 2022-08-12
• 發明（設計）人: 裴秀英;俞曉麗;邱意開;吳際;余建強;王燕蓉;劉心蕊;蒲靜
• 申請（專利權）人: 寧夏醫科大學
• 主分類號: C12N5/075
• 分類號: C12N5/075
• 代理公司: 北京正華智誠專利代理事務所(普通合伙) 11870
• 代理人: 呂春艷

本發明提供了一種肉蓯蓉多糖在促進雌性生殖干細胞增殖分化方面的應用，具體為在體外培養體系中加入肉蓯蓉多糖可以促進雌性生殖干細胞的增殖分化，尤其是提升雌性生殖干細胞體外定向分化為卵母細胞的能力，這為研究體內外卵母細胞發生能力提供了新的研究材料，同時為研究生理性不孕帶來了新的希望。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種肉蓯蓉多糖在促進雌性生殖干細胞增殖分化方面的應用。

背景技術

雌性生殖干細胞(female germline stem cell,FGSC),又稱為卵巢生殖干細胞(ovarian germline stem cell,OGSC),其由原始生殖細胞(primary germ cells，PGCs)轉化而來，具有能夠定向分化為卵母細胞的能力，可望補充不斷消耗的始基卵泡池，是生殖生物學的革命性發現。傳統觀點認為，哺乳動物出生后卵巢內卵子數目不會再生。女性一生有固定數目的卵子成熟排出，隨著卵泡耗竭及卵巢萎縮，女性漸漸由育齡期轉入絕經期從而失去生育能力。研究發現，新生小鼠及成年小鼠體內含有可再生卵子的雌性生殖干細胞，隨后其存在在女性育齡期、絕經期以及卵巢早衰患者體內也得到驗證。雌性生殖干細胞來源于卵巢組織，是表達生殖系標志物，并能夠進行有絲分裂，且具有增殖能力的生殖細胞。若能夠對其進行具有增殖和分化作用的穩定的體外培養，將對生殖細胞發生發展的基礎研究及臨床的不孕治療帶來深遠影響。但現有技術中并未見有關肉蓯蓉多糖在促進雌性生殖干細胞增殖分化方面的報道。

發明內容

針對現有技術中存在的上述問題，本發明提供一種肉蓯蓉多糖在促進雌性生殖干細胞增殖分化方面的應用，可以促進雌性生殖干細胞的增殖分化，尤其是可以提升雌性生殖干細胞體外定向分化為卵母細胞的能力。

為實現上述目的，本發明解決其技術問題所采用的技術方案是：

一種肉蓯蓉多糖在促進雌性生殖干細胞增殖分化方面的應用，具體為在體外培養體系中加入肉蓯蓉多糖可以促進雌性生殖干細胞的增殖分化，尤其是提升雌性生殖干細胞體外定向分化為卵母細胞的能力。

上述培養體系為常規的雌性生殖干細胞培養體系，如培養體系包括α-MEM培養基+1mM非必需氨基酸+2mM L-谷氨酰胺+1mM丙酮酸鈉+0.1mMβ-ME+10ng/ml LIF+10ng/ml EGF+40ng/ml GDNF+1ng/ml bFGF+10％FBS+15mg/ml青/鏈霉素。

當向上述培養體系中加入0.25～0.75μg/ml的肉蓯蓉多糖，培養12～48h時，對雌性生殖干細胞的增殖分化均有促進作用，尤其是當加入的肉蓯蓉多糖濃度為0.5μg/ml，培養時間為24h時，生殖干細胞多能性及生殖性標志基因顯著增加，當培養至48h時，顯著誘導FGSC的分化。

本發明提供的肉蓯蓉多糖在促進雌性生殖干細胞增殖分化方面的應用，具有以下有益效果：

肉蓯蓉多糖(Cistanche Deserticol Polysaccharides,CDPs)為植物肉蓯蓉主要活性成分之一，是一種包含葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖等單糖縮聚而成的多糖類化合物。肉蓯蓉多糖能夠促進體外雌性生殖干細胞的增殖分化，即在體外培養體系中添加肉蓯蓉多糖可以促進雌性生殖干細胞的增殖分化，尤其是可以提升雌性生殖干細胞體外定向分化為卵母細胞的能力。

本發明通過對肉蓯蓉多糖處理后雌性生殖干細胞的轉錄組測序，發現與細胞增殖與分化相關的信號通路有所變化，并且干細胞生長發育的相關基因功能差異顯著。同時在干細胞增殖與分化的功能中，關鍵基因下調顯示細胞自我更新能力下降，分化能力增強。這為研究體內外卵母細胞發生能力提供了新的研究材料，同時為研究生理性不孕帶來了新的希望。

附圖說明

圖1為小鼠雌性生殖干細胞體外培養的細胞狀態圖。

圖2為小鼠雌性生殖干細胞體外增殖活力檢測圖。

圖3為瓊脂糖凝膠電泳檢測結果圖。