[發明專利]阿莫西林完全抗原及其制備方法和試劑條及其制備方法

在審

• 申請號: 202010467015.4
• 申請日: 2020-05-28
• 公開（公告）號: CN111961128A
• 公開（公告）日: 2020-11-20
• 發明（設計）人: 張偉濤;蔣永青;黃斌;劉明如
• 申請（專利權）人: 深圳市金閱科技有限責任公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;C07K14/47;C07K14/75;G01N33/558;G01N33/532;G01N33/53
• 代理公司: 深圳市中融創智專利代理事務所(普通合伙) 44589
• 代理人: 葉垚平;李立

本發明公開了一種阿莫西林完全抗原及其制備方法和試劑條及其制備方法。該阿莫西林完全抗原中，其阿莫西林分子的抗原決定簇能充分暴露，且具有較完整的空間構象，因此，本發明提供的阿莫西林完全抗原具有較好的免疫原性,可用于免疫分析。本發明的檢測阿莫西林的膠體金免疫層析試劑條及其制備方法，該試劑條具有較高的阿莫西林檢測靈敏度，且檢測所需時間短，該檢測試劑條使用簡單、經濟、便捷。

技術領域

本發明涉及生物醫藥材料領域，具體涉及一種阿莫西林完全抗原及其制備 方法，以及檢測阿莫西林的試劑條及其制備方法。

背景技術

免疫分析是以抗原與抗體之間特異性識別和可逆性結合反應為基礎的痕量 分析方法，其不僅適用于大分子化合物(如蛋白質、核酸、細菌)的檢測，也 適用于小分子化合物(如激素、藥物)的測定。建立小分子化合物的免疫分析 方法的關鍵是能夠制備出對小分子化合物具有高親和力和高選擇性的抗體。由 于大多數小分子化合物的分子量小于1000，不具有免疫原性，即缺乏T細胞表 位而無法直接誘導動物機體等產生特異性抗體。然而，小分子化合物可以通過 適當的化學修飾方法，與大分子載體結合，生成小分子化合物-大分子載體的偶 聯物，此偶聯物即為完全抗原，它可以借助T細胞表位來間接誘導B細胞的增 殖及分化，產生特異性抗體。

阿莫西林(Melatonin,MLT)是一種小分子物質，化學名為N-乙酰-5-甲 氧基色胺，分子量僅為232.28D，不具有免疫原性，用于免疫，必須先與蛋白質 大分子載體結合，形成阿莫西林-蛋白質載體偶聯的完全抗原后才具免疫原性。 然而，制備阿莫西林-蛋白質載體偶聯的完全抗原不能影響阿莫西林的空間構 象，而且需要保持阿莫西林抗原決定簇(如5-甲氧基、N-烷基側鏈)的有效性， 才能獲得效價高、特異性強的阿莫西林抗體。因此，如何制備具有良好免疫原 性的完全抗原是建立測定阿莫西林的免疫分析方法的難點。

發明內容

本發明提供了一種阿莫西林完全抗原及其制備方法和試劑條及其制備方 法，旨在解決上述問題。

根據本申請實施例的第一方面，提供了一種阿莫西林完全抗原，其結構式為：

式中，R為載體蛋白，n為5_～20的自然數。

根據本申請實施例的第二方面，提供了一種阿莫西林完全抗原的制備方法， 包括以下步驟：

提供阿莫西林，其結構式為：

將阿莫西林溶解在N,N-二甲基甲酰胺溶液中，然后加入1-乙基-(3-二甲基 氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽和N-羥基丁二酰亞胺，得到第一反應液，放入磁力 攪拌子，密封燒杯，外層采用錫箔紙包裹避光，在室溫下攪拌反應10～16小時 后，得到第二反應液，其中，在所述第一反應液中，所述阿莫西林半抗原的濃 度為0.05mol/L，所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽和N-羥 基丁二酰亞胺的摩爾濃度分別為所述阿莫西林半抗原摩爾濃度的1～2倍；

配置載體蛋白的磷酸鹽緩沖液；

將所述第二反應液逐滴加入到所述載體蛋白的磷酸鹽緩沖液中，在0～4℃下 避光攪拌反應10～16小時后，得到含阿莫西林完全抗原的混合溶液，將所述含 阿莫西林完全抗原的混合溶液進行透析后離心，得到含阿莫西林完全抗原的上 清溶液，所述阿莫西林完全抗原的結構式為

式中，R為載體蛋白，n為5～20的自然數。

根據本申請實施例的第三方面，提供了一種檢測阿莫西林的膠體金免疫層 析試劑條，包括背板、樣品墊、金標墊、反應墊和吸水墊，其中所述樣品墊、 金標墊、反應墊和吸水墊依次設置于所述背板上；所述反應墊上具有檢測線和 質控線，檢測線包被有阿莫西林完全抗原，所述質控線包被有羊抗鼠IgG的抗 體，所述金標墊上噴有阿莫西林抗體金標復合物。