[發(fā)明專利]飼料中脂溶性維生素的檢測方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202010466776.8
• 申請日: 2020-05-28
• 公開（公告）號: CN111579675A
• 公開（公告）日: 2020-08-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 石林;苗佩佩;劉敬婉;張宗蕊;杜倩潔;郭巧杰;王瓊;劉維維
• 申請（專利權(quán)）人: 河南三方元泰檢測技術(shù)有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 鄭州知己知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 41132
• 代理人: 楊小燕

本發(fā)明提供了一種飼料中脂溶性維生素的檢測方法，屬于維生素檢測技術(shù)領(lǐng)域。其包括以下步驟：將待測飼料與抗氧劑混合均勻，加入氫氧化鉀乙醇溶液中，暗處靜置反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，加入正己烷溶液，超聲處理，離心取上清液，將所述上清液過濾，過凝膠色譜柱，流出液經(jīng)減壓濃縮揮發(fā)正己烷后，甲醇稀釋，得到待測液；將上述步驟中的待測飼料替換為脂溶性維生素標準品，重復上述步驟的方法，得到標準溶液；采用高效液相色譜法分別對所述待測液和標準溶液進行檢測，根據(jù)所得高效液相圖譜計算所述待測飼料中脂溶性維生素的含量；所述脂溶性維生素包括維生素A、維生素D₃和維生素E。本發(fā)明一種飼料中脂溶性維生素的檢測方法，回收率高，精確度好。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于維生素檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及飼料中脂溶性維生素的檢測方法。

背景技術(shù)

脂溶性維生素A、D₃、E主要存在于脂溶性溶劑中，分子結(jié)構(gòu)只含有碳、氫、氧三種元素，在飼料中常與脂質(zhì)共存，在消化道內(nèi)也隨脂肪一同吸收。當維生素吸收不足時，會引起相應(yīng)的缺乏癥狀；當吸收過量時，又會對機體產(chǎn)生毒害作用。

現(xiàn)有的飼料檢測中對濃縮飼料的維生素A、維生素D₃和維生素E的檢測方法是將待測樣品經(jīng)過皂化處理后，分別按照下列的國家標準進行檢測：標準GBT 17817-2010《飼料中維生素A的測定高效液相色譜法》、標準GBT 17818-2010《飼料中維生素D₃的測定高效液相色譜法》、GBT 17812-2008《飼料中維生素E的測定高效液相色譜法》。公開(公告)號：CN105891384A涉及一種脂溶性維生素含量的檢測方法，該檢測方法采用經(jīng)典的皂化反應(yīng)的前處理方式，但用超聲萃取替代傳統(tǒng)的液液萃取，通過前處理得到待測溶液和標準溶液，然后將標準溶液和待測夜利用液相色譜進行檢測，得到脂溶性維生素標準品及待測飼料中各組分的保留時間及峰面積，并繪制脂溶性維生素標準品的濃度為峰面積的對應(yīng)曲線，將待測飼料各組分的保留時間及峰面積與標準曲線進行比較，計算得到待測飼料中脂溶性維生素的含量。與現(xiàn)有技術(shù)相比，該發(fā)明前處理過程簡單，減少了有毒有害的石油醚的使用量，更加環(huán)保安全，并且其檢測結(jié)果的精度高，效果好，實現(xiàn)了在短時間內(nèi)對維生素A、維生素D₃、維生素E的同時分離和檢測。

但這些方法主要是將樣品皂化后，直接用液相色譜分析，方法復雜、干擾大、且回收率低。

畜牧業(yè)使用的配合飼料/原料多具有成分復配、組方復雜的特點，及包括了基礎(chǔ)原料中所含有的分散于原料內(nèi)的維生素成分，又包括了人為主動添加的混合維生素成分。加之復合飼料中各種成分之間的相互作用影響，使得配合飼料中的脂溶性維生素成分的精確檢測分析變得十分困難。現(xiàn)有的針對于食品、肉類中所含有的多種脂溶性維生素檢測方法難以適用于這類復雜的情況，因而不得不采用一一檢測、單獨分析的方法對配合飼料進行檢測分析，導致配合飼料的檢測分析工作十分繁瑣復雜，耗時長，工作效率較低，不利于飼料生產(chǎn)企業(yè)以及飼料應(yīng)用企業(yè)對于飼料的品質(zhì)控制。

公開(公告)號：CN106770769A公開了一種檢測飼料中多種脂溶性維生素的方法，包括以下步驟：（1）根據(jù)檢測需要，制備多種維生素標準溶液，包括以下維生素中的至少兩種以上：維生素A醋酸酯、維生素D₃、維生素E乙酸酯；采用HPLC-MS/MS檢測標準溶液，得到標準曲線方程；（2）稱取樣品，到棕色容量瓶中，加入提取溶液超聲提取10-30min，冷卻定容，離心，用0.22μm有機相濾膜，過濾上機，采用與步驟1相同的色譜參數(shù)和質(zhì)譜檢測參數(shù)進行分析測試；（3）根據(jù)步驟1和步驟2的檢測結(jié)果計算得出樣品中的多種維生素的含量。該發(fā)明的同時檢測配合飼料中的多種脂溶性維生素的方法，在一次檢測分析過程中完成多種不同的維生素的檢測分析。