[發明專利]前列腺特異性抗原紙基傳感器的制備方法及PSA檢測裝置

在審

• 申請號: 202010465681.4
• 申請日: 2020-05-25
• 公開（公告）號: CN111562388A
• 公開（公告）日: 2020-08-21
• 發明（設計）人: 佟延秋
• 申請（專利權）人: 重慶交通大學
• 主分類號: G01N33/58
• 分類號: G01N33/58;G01N33/574;G01N21/64;G01N21/75;G01N21/33
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本發明公開了前列腺特異性抗原紙基傳感器的制備方法及PSA檢測裝置，本發明的前列腺特異性抗原紙基傳感器的制備方法，包括以下步驟：S1)紙基的合成；S2)將碳量子點與鏈霉親和素結合形成碳量子點?鏈霉親和素結合體；碳量子點?鏈霉親和素結合體與生物素化PSA抗體2結合形成熒光探針；本發明利用碳量子點的熒光特性，構建了基于紙基的碳量子點熒光免疫傳感器，實現了將化學反應從溶液中轉移到紙上進行，從而實現了床旁檢測、即時檢測的目的。與液相熒光相比，基于紙基的熒光傳感器具有便攜、快速、可視化、即時檢測等特點。與此同時，紙基傳感器一方面可以適當延長保存時間，具有廣闊的市場及應用前景。

技術領域

本發明涉及一種基于紙基的碳量子點PSA免疫傳感器及PSA檢測裝置，主要應用于醫學檢驗領域。

背景技術

前列腺癌(Prostate Cancer，PCa)是多發于男性當中，最為常見的惡性腫瘤之一。根據世界衛生組織國際癌癥研究機構的數據：截至2012年，全世界有110萬男性被診斷患有前列腺癌，占男性癌癥診斷總數的15％，且近年來有不斷上升的趨勢。

在全世界范圍內，老年男性在癌癥相關的死亡中，前列腺癌占最主要的比重。因此，若能在早期發現潛在的前列腺癌風險，則可以大大降低死亡率。

目前，針對PCa早期診斷的標志物是前列腺特異性抗原(Prostate SpecificAntigen，PSA)，PSA是前列腺腺泡和導管的上皮細胞分泌的單鏈糖蛋白，它被認為是早期前列腺癌或其他前列腺疾病的特異性標志物。當人體患有前列腺癌疾病時，血液中的PSA水平會升高。因此，PSA的早期識別對于PCa的早期診斷和頂后診斷具有重要意義。

目前，針對PSA的檢測方法有：光電化學分析法、比色法、熒光光譜分析法(FL)化學發光分析法(CL)和電化學發光分析(ECL)等。其中熒光光譜分析法具有靈敏度高、線性范圍寬、分析儀器簡單、分析快速和易于實現自動化等優點。然而與上述檢測方法配合使用的試劑盒制造成本高、靈敏度較低。

發明內容

本發明的目的之一是提供一種前列腺特異性抗原紙基傳感器的制備方法，該前列腺特異性抗原紙基傳感器實現了前列腺特異性抗原(PSA)的快速檢測，且前列腺特異性抗原紙基傳感器的制造成本低、靈敏度更高。

本發明是通過以下技術手段實現的：

一種前列腺特異性抗原紙基傳感器的制備方法，包括以下步驟：

S1)紙基的合成：

選擇表面的平均孔隙面積在0.00353-0.00637平方毫米的紙張；在室溫下，將紙張浸入20μL含有蛋白A濃度為100μg/mL的酸性緩沖液中1h，酸性緩沖液的pH值為4.4-4.9；在pH7.4的緩沖液中用PSA抗體1與紙基上的A蛋白在室溫下反應30min；利用空白緩沖溶液沖洗紙基，以除去連接不穩定的抗體1；

S2)碳量子點紙基免疫傳感器的制備：

將碳量子點與鏈霉親和素結合形成碳量子點-鏈霉親和素結合體；碳量子點-鏈霉親和素結合體與生物素化PSA抗體2結合形成熒光探針；紙基、PSA抗原、碳量子點熒光探針形成類似三明治模型的前列腺特異性抗原紙基傳感器。