[發(fā)明專(zhuān)利]一種脫毒蝴蝶蘭新品種培育及組培擴(kuò)繁方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010461202.1
• 申請(qǐng)日: 2020-05-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111543322B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-07-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 呂曉惠;董飛;王燁楠;王俊峰;朱嬌;蘭成云;石少川;泮海軍;張冀華;馬蕾
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所;濟(jì)南麒麟花卉有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 濟(jì)南誠(chéng)智商標(biāo)專(zhuān)利事務(wù)所有限公司 37105
• 代理人: 韓百翠

本發(fā)明公開(kāi)了一種脫毒蝴蝶蘭新品種培育及組培擴(kuò)繁方法。本發(fā)明在果莢自然開(kāi)裂后，用鑷子輕敲果莢，種子可自裂口處蹦出，表面滅菌，用折成漏斗狀的滅菌濾紙過(guò)濾出種子，從而獲得了無(wú)附屬物的無(wú)毒種子，然后無(wú)菌播種，獲得蝴蝶蘭無(wú)病毒實(shí)生苗，配合田間養(yǎng)護(hù)做好病毒防控，優(yōu)選單株在擴(kuò)繁前進(jìn)行病毒檢測(cè)，只選擇無(wú)病毒的株系進(jìn)行擴(kuò)繁，進(jìn)而在獲得新品種的同時(shí)獲得無(wú)病毒種苗，提供無(wú)病毒組培母瓶，緩解蝴蝶蘭產(chǎn)業(yè)中急需的新品種和無(wú)病毒種苗需求。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種脫毒蝴蝶蘭新品種培育及組培擴(kuò)繁方法。

背景技術(shù)

蝴蝶蘭為蘭科蝴蝶蘭屬植物，因其花形奇特、花姿優(yōu)美、花色艷麗、花期長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn)，深受消費(fèi)者青睞，被譽(yù)為“蘭花皇后”，常作盆栽或切花。隨著國(guó)際花卉產(chǎn)業(yè)的迅速發(fā)展，我國(guó)蝴蝶蘭產(chǎn)業(yè)呈現(xiàn)出快速化、標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)模化的發(fā)展態(tài)勢(shì)，發(fā)展前景可觀。

蝴蝶蘭只有一個(gè)生長(zhǎng)點(diǎn)，屬單莖性蘭花，所以蝴蝶蘭很難進(jìn)行分株繁殖。目前國(guó)際上常用的繁殖方法是組織培養(yǎng)無(wú)性繁殖法。但是長(zhǎng)期的組織培養(yǎng)引發(fā)的病毒傳播越來(lái)越重，目前，在蝴蝶蘭上分離得到的病毒超過(guò)25種，其中危害最重、分布最廣的是建蘭花葉病毒（Cybidium mosaic virus，CymMV）和齒蘭環(huán)斑病毒（Odontoglossum ringspot virus，ORSV）。病毒傳播成為制約蘭花產(chǎn)業(yè)發(fā)展的瓶頸，病毒主要造成植株花葉、畸形、壞死、花瓣變形等癥狀，導(dǎo)致植株生長(zhǎng)不良，花小而少，花期縮短，嚴(yán)重影響其觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。

迄今為止，獲得無(wú)毒苗的主要途徑有莖尖剝離、熱處理和病毒抑制劑等方法。其中，莖尖培養(yǎng)應(yīng)用最廣，但其脫毒效果常受莖尖大小的影響，而且莖尖褐化和死亡率高；熱處理主要利用高溫可以抑制病毒的復(fù)制及運(yùn)動(dòng)蛋白的合成，從而造成病毒鈍化失活。然而研究表明CymMV和ORSV都具有一定的耐熱性，因此，單獨(dú)熱處理對(duì)蝴蝶蘭脫除CymMV和ORSV效果不明顯；病毒抑制劑方法主要通過(guò)抑制劑（孔雀綠、病毒唑和氨基寡糖素等）干擾病毒在植物體內(nèi)的復(fù)制來(lái)達(dá)到防治病毒病的目的。但是，病毒抑制劑的濃度很難把控，濃度太大會(huì)使莖尖死亡，濃度小無(wú)法實(shí)現(xiàn)脫毒。

由于蝴蝶蘭脫毒技術(shù)成活率低，蝴蝶蘭組培生產(chǎn)所需組培苗母瓶?jī)r(jià)格昂貴，購(gòu)買(mǎi)的母瓶往往是很多代擴(kuò)繁的產(chǎn)物，也會(huì)有單病毒或含量比較低的病毒，往往擴(kuò)繁幾代生產(chǎn)種苗后就無(wú)法繼續(xù)使用，需要年年購(gòu)買(mǎi)。如何獲得低成本的無(wú)病毒植株是蝴蝶蘭產(chǎn)業(yè)中的“卡脖子”問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種脫毒蝴蝶蘭新品種培育及組培擴(kuò)繁方法。本發(fā)明通過(guò)開(kāi)裂果莢的無(wú)菌播種，獲得蝴蝶蘭無(wú)病毒實(shí)生苗，配合田間養(yǎng)護(hù)做好病毒防控，優(yōu)選單株在擴(kuò)繁前進(jìn)行病毒檢測(cè)，只選擇無(wú)病毒的株系進(jìn)行擴(kuò)繁，進(jìn)而在獲得新品種的同時(shí)獲得無(wú)病毒種苗，提供無(wú)病毒組培母瓶，緩解蝴蝶蘭產(chǎn)業(yè)中急需的新品種和無(wú)病毒種苗需求。

本發(fā)明技術(shù)方案是：一種脫毒蝴蝶蘭新品種培育及組培擴(kuò)繁方法，其特征是，包括以下步驟：

1）獲得雜交果莢

選取性狀表現(xiàn)優(yōu)良的父、母本進(jìn)行雜交獲得果莢；將未開(kāi)裂但發(fā)育成熟的果莢進(jìn)行消毒；

2）開(kāi)裂果莢播種

將消毒過(guò)的果莢放在無(wú)菌組培瓶中，使其自然開(kāi)裂，待果莢開(kāi)裂后，輕敲果莢，種子自裂口處蹦出，先次氯酸鈉消毒，然后采用折成漏斗狀的滅菌濾紙過(guò)濾出種子，再播種到培養(yǎng)基上；

3）無(wú)菌培養(yǎng)獲得組培實(shí)生苗

將種子暗處理2周，之后進(jìn)行正常的培養(yǎng)，實(shí)生苗田間養(yǎng)護(hù)期間配合做好病毒防控；

4）優(yōu)秀實(shí)生單株擴(kuò)繁

實(shí)生苗開(kāi)花后，挑選出優(yōu)秀的實(shí)生單株，逐一進(jìn)行病毒檢測(cè)，顯示不含建蘭花葉病毒和齒蘭環(huán)斑病毒的單株在組培室內(nèi)進(jìn)行蝴蝶蘭花梗組培擴(kuò)繁，獲得初代母瓶；

5）保留組培母瓶