[發(fā)明專利]抗CD47單克隆抗體及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010461195.5
• 申請日: 2020-05-27
• 公開（公告）號: CN112062848B
• 公開（公告）日: 2022-06-17
• 發(fā)明（設計）人: 宋德勇;徐洪光;韓靜;韓鎮(zhèn);竇昌林;曹發(fā)揚
• 申請（專利權(quán)）人: 山東博安生物技術(shù)股份有限公司
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;A61K39/395;A61P35/00;A61P35/02;A61P37/06;A61P25/00;A61P37/02
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本發(fā)涉及結(jié)合CD47抗原的抗體或其抗原結(jié)合片段及其制備方法、組合物和應用。本發(fā)明的抗體與CD47抗原的相互作用良好，能夠用于制備抗CD47抗體藥物，可用于治療和/或預防CD47相關(guān)疾病，如癌癥。還可用于免疫學檢測CD47抗原。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)學或生物制藥技術(shù)領(lǐng)域，更具體地涉及人抗CD47的抗體，及其編碼序列、制備方法、組合物和應用。

背景技術(shù)

CD47也被稱為整合素相關(guān)蛋白(integrin associated protein，IAP)，是免疫球蛋白超家族成員。CD47廣泛的表達于細胞的表面，可與信號調(diào)節(jié)蛋白α(Signal regulatoryproteinα,SIRPα)、血小板反應蛋白(thrombospondin-1,TSP1)以及整合素(integrins)相互作用，介導凋亡、增殖、免疫等一系列的反應(Maes T,Joos GF,Brusselle GG.Am JRespir Cell Mol Biol.2012；47(3):261-270)。

人體需要20-30trillion的紅細胞，以此保持氧氣有效的運輸?shù)饺砀魈帯＜t細胞的生命周期較短僅有120天，每小時有100億的紅細胞生成，也有無數(shù)衰老的紅細胞被巨噬細胞吞噬清除。CD47是細胞表面一個重要的self標記，是調(diào)節(jié)巨噬細胞吞噬作用的一個重要信號。CD47可以與巨噬細胞表面SIRPα結(jié)合，磷酸化其ITIM，隨后招募SHP-1蛋白，產(chǎn)生一系列的級聯(lián)反應抑制巨噬細胞的吞噬作用。年輕的紅細胞表達較高的CD47向巨噬細胞釋放自己人，別吃我的信號，而衰老的紅細胞CD47下調(diào)，最終被巨噬細胞所清除。腫瘤細胞有一系列躲避人體免疫系統(tǒng)追殺的方案，包括分泌免疫抑制因子、下調(diào)MHC I表達，以及上調(diào)PD-L1抑制CD8+T細胞活性。聰明的腫瘤細胞當然不會放過CD47這個完美的掩體。不同的研究表明，幾乎所有的腫瘤細胞和組織都高表達CD47，是對應正常細胞和組織的3倍。通過CD47這個self信號，腫瘤細胞有效的躲避了巨噬細胞的吞噬作用。腫瘤細胞上調(diào)CD47的表達，以此欺騙巨噬細胞。那么通過CD47抗體block這個別吃我的信號，使巨噬細胞發(fā)揮吞噬作用。CD47抗體治療是通過DC細胞和CD8+T發(fā)揮腫瘤殺傷效應的。DC細胞通過CD47抗體和親吞噬分子協(xié)同作用，吞噬腫瘤細胞，并提呈腫瘤相關(guān)抗原給CD8+T，進而發(fā)揮CD8+T對腫瘤的特異性殺傷作用。

然而，目前在臨床中或上市的CD47抗體，在抗體親和力，免疫原性，副作用，抗腫瘤作用等方面仍存在不足，因此，亟待效果更佳的該靶點候選抗體開發(fā)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供具有特異性結(jié)合CD47抗原的抗體及其制備方法和應用。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了結(jié)合人CD47的抗體或其抗原結(jié)合片段。本發(fā)明所述抗體或其抗原結(jié)合片段是指脫離人體或動物體的抗體或抗原結(jié)合片段，即分離的抗體或其抗原結(jié)合片段。

在本發(fā)明的一個方面中，所述抗體或抗原結(jié)合片段輕鏈包含輕鏈互補決定區(qū)LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述互補決定區(qū)包括SEQ ID NO:1所示的輕鏈可變區(qū)的CDR1序列、CDR2序列和CDR3序列。所述抗體或其抗原結(jié)合片段重鏈包含重鏈互補決定區(qū)HCDR1、HCDR2和HCDR3，所述互補決定區(qū)包括SEQ ID NO:2所示的重鏈可變區(qū)的CDR1序列、CDR2序列和CDR3序列。優(yōu)選地，所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含SEQ ID NO:3所示LCDR1，SEQ ID NO:4所示LCDR2，SEQ ID NO:5所示LCDR3，SEQ ID NO:6所示HCDR1，SEQ ID NO:7所示HCDR2，SEQID NO:8所示HCDR3。