[發(fā)明專利]一種斑鳠的人工繁殖方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010460045.2
• 申請(qǐng)日: 2020-05-27
• 公開（公告）號(hào): CN111587818B
• 公開（公告）日: 2021-12-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉慶山;林斌;韋祥;覃士芬;張健;王鑫;丁瑤;何興恒;徐華建;譚冬初
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 武漢中科瑞華生態(tài)科技股份有限公司;廣西廣投橋鞏能源發(fā)展有限公司
• 主分類號(hào): A01K61/10
• 分類號(hào): A01K61/10;A01K61/17;A01N1/02
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務(wù)所(普通合伙) 42001
• 代理人: 王敏鋒

1.一種斑鳠的人工繁殖方法，先進(jìn)行精液冷凍儲(chǔ)備，然后在繁殖季節(jié)對(duì)雌魚進(jìn)行催產(chǎn)，并擠出卵粒，再將卵粒與解凍的精液混合受精得到受精卵，最后受精卵孵化，進(jìn)行苗種培育即可；其特征在于，精液冷凍儲(chǔ)備的具體方法如下：

(A)預(yù)混液的制備：以重量份計(jì)，先邊攪拌邊將0.2～0.3份月見草油滴加至1份雞蛋清，攪拌混勻，然后于55～65℃條件下水浴加熱5～8分鐘，10000～12000r/min攪拌15～20分鐘，離心取上清液；再向上清液中加入0.05～0.08份木瓜籽干細(xì)胞提取物和0.02～0.04份酵母葡聚糖，超聲波振蕩均勻，即得所述預(yù)混液，備用；

(B)防凍液的制備：以重量份計(jì)，先將3～4份質(zhì)量濃度8～12％甲醛水溶液與0.08～0.12份氯化鈉、1份麥芽糖攪拌混合，然后加入約0.2～0.3份預(yù)混液，超聲波振蕩均勻，即得所述防凍液；

(C)然后從雄魚精巢中采集精子活力90％以上的精液，再將精液與防凍液按照體積比1：15～25混合制成混合液；

(D)分裝，密封并平衡處理，液氮熏蒸并保存。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種斑鳠的人工繁殖方法，其特征在于，步驟(A)中，所述木瓜籽干細(xì)胞提取物的制備方法如下：先取成熟木瓜籽，洗凈晾干后粉碎成木瓜籽粉末，然后將木瓜籽粉末接種至培養(yǎng)基中，在溫度26～30℃和pH＝5.5～6.5條件下培養(yǎng)時(shí)間30～35天，后處理，即得所述的木瓜籽干細(xì)胞提取物。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種斑鳠的人工繁殖方法，其特征在于，步驟(C)中，精液采集的具體方法如下：從市場(chǎng)上購買的雄魚宰殺獲得精巢，或直接買回斑鳠雄魚的精巢；精巢必須飽滿，用手捏碎有乳白色的精液流出；精巢帶回?zé)o菌實(shí)驗(yàn)室，用剪刀剪碎，再用勻漿器磨成漿，用吸管吸2～3滴精液放到載玻片上，用清水激活，在顯微鏡下觀察精子的活力，將精子活力大于90％的精液分裝到事先準(zhǔn)備好的抗凍試管中。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種斑鳠的人工繁殖方法，其特征在于，步驟(D)的具體方法是：將混合液分裝至試管中，每支試管裝1mL，密封后在4℃冰箱內(nèi)平衡30分鐘，平衡結(jié)束后在液氮上方7cm處熏蒸10分鐘，熏蒸結(jié)束后放入液氮中保存。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種斑鳠的人工繁殖方法，其特征在于，催產(chǎn)的具體方法如下：在繁殖季節(jié)，將從野外收集的發(fā)育較好的雌魚或經(jīng)過人工馴養(yǎng)發(fā)育較好的成熟雌魚作為催產(chǎn)親魚，先對(duì)催產(chǎn)親魚進(jìn)行催產(chǎn)藥物注射，然后放入催產(chǎn)池中，開啟進(jìn)水閥進(jìn)行沖水，流速控制在0.5m/s以上，水溫為24～28℃，水中溶解氧保持在8mg/L以上，pH為7.0～8.2。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種斑鳠的人工繁殖方法，其特征在于，采用兩針注射法進(jìn)行催產(chǎn)藥物注射，即促黃體素釋放激素類似物、鯉魚腦垂體和絨毛膜促性腺激素的混合物，第一針劑量為每公斤雌魚注射PG1mg+LRH-A₃ 2μg，第二針劑量為每公斤雌魚注射PG 6～8mg+LRH-A₃ 6～10μg+HCG 800～1200IU。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種斑鳠的人工繁殖方法，其特征在于，所述催產(chǎn)池的準(zhǔn)備方法如下：準(zhǔn)備一長方形玻璃鋼催產(chǎn)池或水泥催產(chǎn)池，水泥催產(chǎn)池底部和池壁貼上瓷磚，安裝好進(jìn)排水管道，做好防逃，在催產(chǎn)池底部放置2～3個(gè)容量大于50kg的陶瓷壇，營造仿野外生存環(huán)境。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種斑鳠的人工繁殖方法，其特征在于，受精卵的獲得方法為：將雌魚撈出用毛巾檫干水分，將卵擠到干燥光滑的塑料盆里，同時(shí)將儲(chǔ)存在液氮罐中的精液取出放置在清水中6s解凍后倒入塑料盆中，用羽毛輕輕攪動(dòng)使精卵充分混合，再加入量清水激活，靜置1～2分鐘完成受精。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種斑鳠的人工繁殖方法，其特征在于，孵化的具體方法是：先將受精卵用羽毛均勻撒在聚乙烯粘網(wǎng)上，再放進(jìn)孵化槽內(nèi)進(jìn)行流水孵化；孵化時(shí)受精卵脫膜前孵化槽內(nèi)水體交換率為10次/d，脫膜后交換率為5次/d，脫膜后在孵化槽發(fā)育至仔魚鰾充氣后即可進(jìn)行苗種培育。